大葱不同播期与葱蛆发生的关系

大葱的苗期发生葱蛆危害而造成幼苗死亡,通过连续两年对不同播期下大葱葱蛆发生率的调查,研究大葱不同播期与葱蛆发生的关系。结果表明,大葱秋季育苗的播种时间与葱蛆发生有一定的相关性,播期越早,葱蛆发生率越高,危害越重,适当的晚播可以有效地避免葱蛆的发生。在黑龙江省大葱生产中,8月底到9月初是比较适合的播种期。不同的年份对葱蛆的发生虽然会产生一定影响,但基本规律是一致的。葱蛆的发生程度也与不同的品种有关,"齐叶长白"的葱蛆发生程度要低于"哈大葱一号"。

不同栽培方式对党参性状和指标成分含量的影响

目的:基于“优形优质”探究不同栽培方式对党参品质的影响,为优质党参生态种植模式研究提供参考。方法:测量党参外观性状指标,测定水分、醇溶性浸出物含量,HPLC测定党参样品紫丁香苷、党参苷Ⅰ、党参炔苷及苍术内酯Ⅲ的含量,HPGPC测定党参果聚糖含量。结果:普通、搭架、套种和仿野生4种不同栽培方式中,套种与仿野生栽培有利于党参芦下直径粗、皮部宽度、芦头直径和干重的形成。搭架、仿野生栽培的党参木部色泽偏黄色、皮部色泽偏黄棕色。搭架和套种栽培的药材紫丁香苷和党参苷Ⅰ含量显著高于普通和仿野生栽培。套种栽培的药材党参炔苷含量最高(0.5459 mg/g),显著高于其他栽培方式,搭架栽培的药材党参炔苷含量最低(0.2940 mg/g)。苍术内酯Ⅲ含量在仿野生栽培药材中最高(0.1526 mg/g),显著高于其他栽培方式。4种栽培方式下党参的水分(≤16%)、浸出物(≥55%)均符合药典标准,仿野生栽培党参含水量为7.80%,显著低于其他栽培方式。普通栽培的党参果聚糖含量最高(38.66%),搭架栽培党参含量最低(16.66%)。党参色泽越深,含水量越高,党参果聚糖含量与色泽的明亮度L^(*)呈正相关(P<0.01)。结论:综合考虑党参性状和指标成分、管理成本和土地资源等多种因素,党参-黄芩套种和仿野生栽培为较高效的党参种植模式,具有推广种植前景,为党参药材合理栽培和资源开发利用提供参考依据。

辣椒CaCP26基因的cDNA克隆和分析

利用cDNA-AFLP方法,在辣椒雄性不育两用系的可育株花蕾与不育株花蕾获得阳性差异TDF（transcription derived fragment,转录衍生片段）,通过电子克隆的方法获得大小为865 bp的cDNA序列,并在辣椒雄性不育两用系HW58可育株花蕾中进行RT-PCR验证,测序结果与电子克隆结果的一致性高达99.61%。经Blast N比对,所克隆基因与烟草CP26基因序列的同源性高达90%,命名为CaCP26（GenBank登录号为GQ999612）。该基因871 bp,包含一个864 bp的开放阅读框,编码287个氨基酸,所编码的蛋白质为疏水蛋白,分子质量30 710.47 u,理论等电点为5.807,有跨膜域,无信号肽,二级结构以无规则卷曲为主;利用Swiss-model得到CaCP26蛋白（65~285aa）的三级结构;系统进化树结果显示,辣椒CaCP26与烟草CP26的亲缘关系最近。半定量RT-PCR分析表明,CaCP26在小孢子单核期的辣椒雄性不育两用系可育株的相对表达量是不育株花蕾相对表达量的6.58倍。

几个辣椒核质互作雄性不育材料的育性调查

在5、7、9月,对18个辣椒核质互作雄性不育材料进行了花粉量、自然坐果率与单果种子数性状的调查。结果表明:1A、2A、4A、6A、8A、13A、17A、18A的花粉量均极少或没有,自然坐果率和单果种子数在开花坐果期一直为0,属于稳定型不育型材料;7A、12A、14A的在供试时期内可以自然坐果,但其单果种子数始终为0,也属于稳定型不育型材料;3A、5A、9A、10A、11A,可以坐果且有种子,表现出部分不育;15A、16A属于环境敏感性的不育材料,育性受环境因子的影响。

基于中药鉴别思路的药用植物学与中药鉴定学教学融合

为了提高学生中药鉴别能力,激发学生学习药用植物学与中药鉴定学的热情,营造良好的学习氛围,对教学模式进行改革,构建药用植物学与中药鉴定学理论课与实践课的融合教学模式。该模式可以充分发挥学生的主体作用,有利于高校创新型人才的培养。

山西省临汾市隰县药用植物资源普查概况

目的通过调查山西省临汾市隰县药用植物资源种类、分布、数量等现状,为当地药用植物野生资源保护及可持续利用提供依据。方法依据《全国中药资源普查技术规范》,采用线路踏查、样地调查和实地走访等形式,结合现代技术,对隰县药用植物资源进行普查,并统计分析。结果本次普查工作覆盖6个乡镇37个样地,共计185个套方,1110个样方,涵盖野生药用植物种类131种,包括蕨类植物、裸子植物和被子植物三大类群,其中优势科主要集中在蔷薇科、菊科、豆科、百合科和唇形科,中药材种植资源有赤芍、丹参、射干、苍术、穿山龙、黄精等。结论山西省临汾市隰县野生药用植物资源具有生物多样性,应加强野生药用植物资源的保护力度及种植资源的规范化指导。

潞党参甾体类成分及其抗炎活性

目的研究潞党参Codonopsis pilosula(Franch.)Nannf.甾体类成分及其抗炎活性。方法潞党参甲醇提取物的分析采用硅胶、TLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。采用脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7细胞炎症模型进行体外抗炎活性评价。Griess法测定NO水平,酶联免疫吸附法(ELISA法)检测炎性因子白介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。结果从中分离得到4个化合物,分别鉴定为α-菠甾酮(1)、22,23-二氢菠菜甾酮(2)、α-菠甾醇(3)、22,23-二氢菠菜甾醇(4),其中化合物1~2为一菠甾酮类,化合物3~4为一菠甾醇类。菠甾酮类和菠甾醇类均能显著抑制NO和炎性因子IL-6和TNF-α的释放,且菠甾酮类抑制活性优于菠甾醇类。结论潞党参甾体类成分具有良好的抗炎活性。

基于中药鉴别岗位胜任力培养的教学模式探讨

本着以学生为中心的教学理念,构建以岗位胜任力为导向的中药鉴定人才培养的教学模式,已成为各医药院校提高中药鉴定人才培养质量的关键。文章通过分析与中药鉴定能力培养密切相关的课程体系,总结了长期教学实践中教与学的一些问题,结合教学案例,构建了药用植物学、中药鉴定学、生药学等课程之间相互融合的教学模式,旨在发挥学生的主体作用,培养学生的中药鉴别岗位胜任力,提高中药鉴定学的教学质量,促进高等学校金课建设和创新型人才的培养。

党参不同组织化学成分分布及转录组学分析

目的:分析党参不同组织转录组特征,解析党参根中活性成分积累的遗传基础,为党参的高品质生产与种植提供理论依据。方法:选取盛花期党参根、茎、叶、花不同组织为实验材料,采用高效液相色谱法(HPLC)检测党参苷Ⅰ、党参炔苷、苍术内酯Ⅲ含量,利用RNA-Seq对不同组织进行转录组测序,通过基因本体(GO)、京都基因和基因组百科全书(KEGG)数据库富集分析筛选分析差异表达基因,探讨党参不同组织化学成分分布特征及转录谱特征。结果:党参根中党参多糖及党参苷Ⅰ含量显著高于其他各组织。党参根转录谱与茎、叶、花存在显著差异,差异基因表达聚类分析、GO、KEGG富集分析发现差异基因主要富集在黄酮类、苯丙烷类生物合成、蔗糖淀粉代谢、植物激素信号传导、植物病原菌互作、MAPK级联信号传递、三磷酸腺苷结合转运盒(ABC)转运蛋白等途径。苯丙烷类化合物生物合成相关基因在根、花中表达量显著上调,ABC转运蛋白则多在花中高表达,党参多糖合成关键酶基因蔗糖:蔗糖1-果糖基转移酶(1-SST)、果聚糖1-外切水解酶(1-Feh)及大量与次生代谢产物积累密切相关的胁迫响应基因等在党参根中显著上调表达。结论:党参根中活性成分含量与转录谱特征与茎、叶、花等组织存在显著差异,表现出组织特异性,同时胁迫响应相关基因及活性成分菊粉型果聚糖、苯丙烷类化合物合成相关基因在根中表达上调。

潞党参道地性形成相关转录因子筛选及表达分析

为了挖掘影响山西道地药材潞党参道地性形成的转录因子,该研究基于山西潞党参与甘肃白条党转录组数据筛选潞党参特异性转录因子,并对其进行基因表达模式分析,为通过分子辅助育种进行潞党参优种选育提供理论基础。根据不同产地潞党参与白条党转录组数据,对差异转录因子进行GO功能注释、鉴定、保守基序分析及基因表达模式分析。自转录组数据库中共筛选出61个差异基因,分属最多的AP2/ERF-ERF家族的保守基序为[2X]-[LG]-[3X]-T-[3X]-[AARAYDRAA]-[3X]-[RG]-[2X]-A-[2X]-[NFP]。分析发现,差异基因中43个在潞党参中表达量显著高于白条党,包括AP2/ERF-ERF家族11个、NAC家族5个、bHLH家族1个、RWP-RK家族2个,而有18个转录因子基因在白条党中上调表达。转录结合活性、代谢进程、应激反应相关的GO terms分别为103、26、23个。不同器官特异性表达分析表明转录因子基因CpNAC92、CpNAC100、CpbHLH128、CpRAP2-7不仅在潞党参中上调表达,在根系中表达量也显著高于其他器官。环境胁迫条件下基因表达模式分析发现,除CpNAC100基因只响应低温、过铁胁迫外,其他3个基因均可响应低温、温差、过铁胁迫。潞党参特异性转录因子基因CpNAC92、CpNAC100、CpbHLH128、CpRAP2-7的筛选与表达分析,为进一步研究潞党参道地性形成机制奠定了理论基础。

辣椒不育系和保持系线粒体差异基因获得及SNP分析

通过对辣椒细胞质雄性不育(CMS)系及其相应保持系育性相关基因的分析,检寻SNP位点,旨在探索其与辣椒细胞质雄性不育性的关系。以高盐-蛋白酶K法提取线粒体DNA,采用AFLP技术分析了辣椒不育系和保持系的mtDNA的差异,从128对引物扩增产物中发现了不育系和保持系的差异片段,经回收、克隆获得不育系特异片段CanLE长度140 bp,保持系特异片段CanLB长度126 bp。利用Blast对其进行序列比对分析,其中CanLE与细胞色素P450家族蛋白同源,CanLB和赖氨酰-tRNA合成酶同源。进一步分别克隆并获得了不育系和保持系辣椒细胞色素P450全长,序列分析发现,两者存在单核苷酸多态性(SNP),其中5个碱基差异,3个为同义突变,2个氨基酸发生改变。

蕤仁的生药学鉴别研究

目的对蕤仁药材Prinsepiae Nux的性状、微性状及显微鉴别特征进行系统研究,为其鉴定以及《中国药典》2020年版的制定提供科学依据。方法采用性状鉴别法、微性状鉴别法、常规显微鉴别法及偏振光显微鉴别法,对12批蕤核Prinsepia uniflora和9批齿叶扁核木P. uniflora Batal. var. serrata Rehd.果核进行系统的生药学研究。结果从形状、大小、颜色、表面特征、质地、断面、气、味等方面,对蕤核及齿叶扁核木果核的性状特征进行观察。针对质地坚硬、经软化处理后仍不适宜制备横切片以观察完整植物组织构造并确定组织部位的药材,采用定位取材徒手切片技术,可准确获取特定部位的植物组织显微特征;针对木化组织集成较大群束,经粉碎后难以呈现单个细胞完整形态特征的药材,采用解离组织制片技术,可获取清晰、完整无重叠的单个细胞全貌及特征信息。结论首次获取了蕤仁显微鉴别特征(内果皮石细胞、种皮表皮细胞、中果皮纤维、内胚乳细胞、子叶细胞)及微性状鉴别特征(内果皮、子叶、种皮)的全息彩色影像数据。显微特征中内果皮石细胞可作为蕤仁的专属性显微鉴别标志物,显微和微性状鉴别研究结果填补了彩色影像信息的空白。

基于转录组的不同产地党参糖基转移酶鉴定及分析

潞党参为山西道地药材,其药效成分党参多糖等含量显著高于其他产地党参[Codonopsis pilosula(Franch.)Nannf.]。糖基转移酶是党参主要药效成分党参多糖和党参苷Ⅰ等合成的关键酶,本研究基于不同产地党参转录组数据,对糖基转移酶基因进行GO及KEGG功能注释、保守结构域分析、进化树分析及表达模式分析,为探索潞党参道地性形成机制提供理论依据。本研究共筛选鉴定出98个糖基转移酶基因,分属于GT family 1、GT family 2、GT family 90等家族。GO功能注释发现多属于分子功能中的催化活性条目。KEGG功能注释发现党参糖基转移酶主要参与聚糖生物以及萜类和聚酮类化合物代谢。其中,GT family 1的42个糖基转移酶基因保守结构域为:[X]-W-[2X]-Q-[3X]-[LH]-[5X]-[FLTHCGWNS]-[2X]-E-[4X]-[GVP]-[4X]-P-[4X]-Q-[2X]-[NAK]。通过与拟南芥的糖基转移酶序列比对分析,党参糖基转移酶主要位于拟南芥UGT73、72、85分支中。基因表达模式分析发现党参CpUGT73AH2在潞党参植株中高表达,并可响应干旱、低温胁迫诱导。最终,本研究自党参糖基转移酶家族1中筛选得到一个参与萜类和聚酮类化合物代谢的可以响应环境胁迫的糖基转移酶基因CpUGT73AH2,为进一步研究党参糖基转移酶在潞党参道地性形成中的作用奠定了理论基础。

基于SSR标记的党参属部分药用植物的遗传多样性和遗传结构评价

目的:采用简单重复序列(SSR)标记技术对来自中国6个省市的党参属4种药用植物进行分析,为党参核心种质资源构建和分子标记辅助育种积累资料。方法:利用10对SSR分子标记引物对党参的遗传多样性和分化程度进行分析,并对党参属的3种药用植物(党参、素花党参、川党参)居群进行聚类分析和遗传结构评价。结果:党参10对SSR引物各位点平均等位基因数(Na)和多态性位点百分率(PPL)分别为4. 1和100%;观察杂合度(Ho),期望杂合度(He),平均杂合度(Ha),Shannon’s信息指数(I)的平均值分别为0. 431 9,0. 486 2,0. 410 3,0. 853 7。党参居群水平上的Na,I,He和Ho分别为1. 9~3. 2,0. 44~0. 90,0. 28~0. 57和0. 27~0. 61;其中甘肃陇西德兴家种居群遗传多样性最丰富。遗传相似度的聚类分析将供试党参、素花党参、川党参和秦岭党参共38个居群划分为3类,秦岭党参居群单独为一类(类群Ⅰ),川党参居群和素花党参居群为第二类(类群Ⅱ),党参居群为第三类(类群Ⅲ)。党参、素花党参、川党参的遗传结构分析分为2个基因池,过渡类型少。结论:党参具有丰富的遗传多样性,这一特性与其迁地引种的历史以及自身生物学特性相关;党参居群间存在较高程度的遗传分化,这可能源于自然地理隔离以及近期人类活动引起的生态环境片段化。本文为党参遗传多样性、遗传结构和资源保护等方面的研究提供了理论依据。

党参CpGAPDH基因的克隆及表达分析

甘油醛-3-磷酸脱氢酶（glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase，GAPDH）基因为糖代谢过程中关键酶基因及常用内参基因。该研究以党参Codonopsispilosula转录组数据库为基础，以马铃薯GAPDH基因为参照，同源克隆得到党参甜肋日基因，命名为印GAPDH，基因开放阅读框（ORF）全长1014bp，编码337个氨基酸。生物信息学分析表明，CpGAPDH与其他物种GAPDH具有高度相似性，与马铃薯、丹参GAPDH亲缘关系较近，无信号肽，预测其定位于细胞质，且具多个磷酸化位点，结合保守结构域预测分析，该蛋白属于四聚体NAD结合酶超家族。原核表达分析发现重组工程菌可诱导表达出接近44．3kDa的蛋白质，与理论相对分子质量基本相符。qRT-PCR分析显示印GAPDH基因在不同组织及不同发育时期根系中相对表达量差异不显著，稳定性分析显示该基因表达较稳定，由此克隆得到了1个新的党参候选内参基因，为党参多糖合成相关基因的表达分析奠定了基础。

党参CpPMM基因的克隆与表达分析

GDP-甘露糖为党参多糖合成的重要前体物质,参与糖链的合成。磷酸甘露糖变位酶(phosphomannomutase,PMM)催化甘露糖-6-磷酸(Man-6-P)向甘露糖-1-磷酸(Man-1-P)转化,从而合成GDP-甘露糖。该研究依据党参Codonopsis pilosula转录组数据中PMM基因序列信息,设计特异性引物,克隆得到了党参PMM基因全长,命名为CpPMM。通过生物信息学、原核表达以及qRT-PCR技术分析CpPMM基因的表达与党参多糖合成之间的相关性。结果显示,CpPMM基因包含1个741 bp的开放阅读框(ORF),编码246个氨基酸,与其他物种的PMM具有高度相似性,同菊科向日葵具有高度同源性,预测为亲水性非跨膜蛋白,无信号肽,预测其定位于细胞质中,含有多个磷酸化位点,结合保守结构域预测分析,该蛋白属于HAD(haloacid dehalogenase,卤素脱氢酶)超家族;原核表达研究显示,CpPMM融合蛋白大小约为29 kDa,同预测相对分子质量基本相似,目的蛋白为包涵体,部分可溶;qRT-PCR结果表明,CpPMM基因具有时空表达特异性,结果期表达量显著高于盛花期等其他3个时期,存在显著性差异;不同发育时期党参根系多糖含量测定显示,随着党参生育期的推移,党参多糖含量呈现逐渐增高的趋势,在采挖期达到最高,且各时期党参多糖含量均存在显著性差异。该研究从党参根中克隆得到了CpPMM基因,可表达为蛋白,其表达水平与党参多糖含量呈高度相关性,为进一步研究CpPMM基因功能及药用植物中多糖类化合物生物合成途径的解析奠定了基础。