修正性鼻内窥镜手术面临问题及对策

目的 探讨修正性鼻内窥镜手术过程中面临的问题及治疗对策。方法 对 10 4例复发的鼻息肉慢性鼻窦炎患者进行修正性鼻内窥镜手术。结果 手术后 6个月进行评定 ,有效率为 82 7%。结论 复发的鼻息肉慢性鼻窦炎患者可进行修正性鼻内窥镜手术 ,通过麻醉、新解剖标志的确定、粘连、瘢痕骨质增生、出血等问题的正确处理 ,可提高手术质量。

超抗原活化淋巴细胞对喉癌Hep-2细胞系的抑制作用

目的观察超抗原活化淋巴细胞后对喉癌细胞的抑制作用。方法金黄色葡萄球菌肠毒素A与人淋巴细胞混合培养24h,激活淋巴细胞,再加入人喉鳞状细胞癌Hep-2细胞混合培养72h,通过MTT法观察喉癌细胞的抑制情况。结果①实验组金黄色葡萄球菌肠毒素A激活淋巴细胞后对人喉鳞癌Hep-2细胞的生长有明显的抑制作用,抑制率是42.68%,高于对照组4.82%(P<0.01)。②抑制作用呈现时间的依赖性。③金黄色葡萄球菌肠毒素A在不同浓度时对喉癌细胞的生长均有抑制作用,特别在浓度是1μg/ml、72h培养时抑制率最高,达82.83%。结论超抗原活化淋巴细胞后明显抑制喉癌细胞的生长。

慢性鼻窦炎对咽鼓管咽口黏膜上皮超微结构的影响

目的探讨慢性鼻窦炎对咽鼓管咽口黏膜上皮超微结构的影响,进一步反映对中耳、咽鼓管功能的影响。方法取6例慢性鼻窦炎患者和4例健康人咽鼓管咽口的组织做透射电镜标本,对比观察两类组织黏膜上皮的超微结构。结果①健康人咽鼓管咽口黏膜上皮为假复层纤毛柱状上皮,可见亮颗粒分泌细胞,各类细胞可见表面活性物质样板层体。②慢性鼻窦炎咽鼓管咽口可出现部分假复层纤毛柱状上皮脱落,细胞的纤毛、微绒毛倒伏、脱落,胞质泡状系统融合、扩张、溶解,分泌颗粒、杯状细胞增多。细胞间隙增大,有瘢痕,有炎症细胞浸润。表面活性物质样板层体减少、消失。结论正常咽鼓管咽口黏膜上皮为假复层纤毛柱状上皮,慢性鼻窦炎可引起咽鼓管咽口上皮、上皮各类细胞的超微结构发生改变,表面活性物质样板层体减少、消失。

豚鼠变应性鼻炎模型鼻黏膜的病理改变

目的:观察变应性鼻炎鼻黏膜的病理变化。方法:用橄榄油将甲苯-2,4-二异氰酸酯配成浓度为10%的溶液作为致敏剂,滴鼻,建立豚鼠变应性鼻炎动物模型8例。8例正常豚鼠作对照。致敏结束、模型成功后,取两组鼻黏膜组织,光镜下观察病理变化。结果:模型组鼻黏膜上皮脱落,杯状细胞增生,鳞状上皮组织转化,上皮坏死,固有层和黏膜下层腺体增生,血管扩张,组织水肿,并见特征性的嗜酸性粒细胞、肥大细胞浸润,这种病理改变与变应性鼻炎的临床表现大致吻合。对照组鼻黏膜上皮层为假复层纤毛柱状上皮,连续、完整、清晰,可见正常的黏膜上皮层、固有层和黏膜下层。结论:变应性鼻炎鼻黏膜出现特征性的炎症病理改变。

豚鼠变应性鼻炎模型鼻黏膜超微结构的改变

目的:探讨豚鼠变应性鼻炎模型鼻黏膜出现的超微结构病理变化。方法:用橄榄油将甲苯-2,4-二异氰酸酯配成浓度为10%溶液作为致敏剂,滴鼻,建立豚鼠变应性鼻炎模型8例。另8例正常豚鼠作对照。致敏结束、模型成功后,取两组鼻黏膜进行透射电镜观察。结果:透射电镜见①对照组:鼻黏膜上皮细胞结构完整,表面有纤毛,排列整齐,纤毛内微管排列规则、清晰。胞质内细胞器丰富,偶见嗜酸性粒细胞。偶见表面活性物质板层体。②模型组:黏膜上皮破损。杯状细胞破损,纤毛微管结构紊乱,出现复合、短纤毛。微绒毛消失。细胞体积缩小,电子密度增加。核变形、固缩。细胞器退变、空泡化。见大量嗜酸性粒细胞,并见其胞膜破裂,伪足形成,脱颗粒及空泡形成。肥大细胞较多,可见巨噬细胞及浆细胞。血管扩张。浆液腺体旺盛增生。这种形态学的改变与变应性鼻炎的临床表现大致吻合。结论:变应性鼻炎鼻黏膜出现形态学的改变,基本病理是上皮损害,血管扩张和毛细血管内皮细胞连接扩大,组织水肿,浆液腺体增生,嗜酸性粒细胞、肥大细胞等浸润、脱颗粒。

豚鼠变应性鼻炎模型血清组胺的测定

目的探讨组胺在变应性鼻炎发病机制中的作用。方法用橄榄油将甲苯-2,4-二异氰酸酯配成浓度为10%溶液作为致敏剂,滴鼻,建立豚鼠变应性鼻炎动物模型8例。另8例正常豚鼠作对照。致敏结束、模型成功后取血清,用双抗夹心ELASA法测定血清组胺的含量。结果模型组血清组胺含量为(9.59±1.11)ng/mL,高于对照组的(7.62±0.96)ng/mL(P<0.01)。结论甲苯-2,4-二异氰酸酯的橄榄油溶剂滴鼻可诱发豚鼠产生变应性鼻炎的症状和血清组胺的浓度升高,成功建立了变应性鼻炎的豚鼠动物模型。

豚鼠变应性鼻炎模型鼻黏膜基底膜增厚重塑的超微结构

目的观察豚鼠变应性鼻炎模型鼻黏膜上皮下基底膜增厚重塑超微结构的病理变化。方法用橄榄油将甲苯-2,4-二异氰酸酯配成浓度为10%溶液作为致敏剂,滴鼻,建立豚鼠变应性鼻炎动物模型8例。另取8例正常豚鼠作对照。致敏结束、模型成功后,取两组鼻黏膜进行透射电镜观察。结果透射电镜见基底膜分透明板、致密板和网板三层,变应性鼻炎在网板出现胶原纤维沉积、增厚,无细胞成分。透明板、致密板无变化。结论变应性炎症可引起鼻黏膜上皮下胶原纤维沉积,引起基底膜增厚重塑。

豚鼠变应性鼻炎模型鼻黏膜P物质的观察

P物质（substance P,SP）是1931年由Von Euler和Caddum从动物的脑、肠中提取,在中枢神经系统中作为神经递质或神经调质,在周围神经系统中作为诱导神经源性炎症的物质起作用。P物质参与变应性鼻炎（allergic rhinitis，AR）的发病机制。本文进一步观察鼻黏膜的P物质。

辛夷对实验性变应性鼻炎红细胞免疫功能的影响

目的探讨辛夷对变应性鼻炎(AR)的治疗作用和对红细胞免疫功能的影响。方法8只为正常豚鼠不做模型,用单纯橄榄油滴鼻作对照(对照组1)。用橄榄油将甲苯-2,4-二异氰酸酯配成浓度为10%溶液作为致敏剂,滴鼻,建立豚鼠变应性鼻炎动物模型16只,其中8只以后用生理盐水滴鼻做对照(对照组2),8只用0.5%生理盐水辛夷挥发油滴鼻(辛夷组)。致敏结束、模型成功后取血,测定红细胞C3b受体花环率和红细胞IC花环率。结果①对照组2红细胞C3b受体花环率和IC花环率低于对照组1(P<0.05),显示AR状态下红细胞的免疫功能降低。②辛夷治疗组的红细胞C3b受体花环率和IC花环率高于对照组2(P<0.05),表明辛夷治疗AR后可以提高红细胞的免疫功能。③辛夷治疗组的红细胞C3b受体花环率和IC花环率与对照组1相当(P>0.05),表明辛夷治疗后,红细胞免疫功能可恢复到正常水平。结论辛夷可改善红细胞免疫功能,用于治疗变应性鼻炎。

变应性鼻炎红细胞免疫功能的实验观察

目的探讨红细胞免疫系统功能异常与变应性鼻炎的发病关系。方法用橄榄油将甲苯-2,4-二异氰酸酯配成浓度为10％溶液作为致敏剂,滴鼻,建立豚鼠变应性鼻炎动物模型8只,另8只正常豚鼠作对照。致敏结束、模型成功后取血,测定红细胞C3b受体花环率和红细胞IC花环率。结果模型组的红细胞C3b受体花环率和红细胞lC花环率均低于对照组(P<0．05)。结论红细胞免疫系统功能异常与变应性鼻炎的发病、发展有关。

鹅不食草对实验性变应性鼻炎血清组胺影响的观察

组胺在变应性鼻炎（Allegic Rhinitis，AR）发病的多个环节起重要作用，又称β-咪唑乙胺，由肥大细胞、嗜碱性粒细胞受刺激后脱颗粒释放组氨酸，组氨酸再经组氨酸脱羧酶脱羧后产生，作用于其受体引起效应。鹅不食草又称地胡菽、窝更比，是菊科石胡荽植物的干燥有花全草、传统的解表中药。味辛、性温，入肺、肝、脾经，有祛风、散寒、去翳、利湿、散瘀、消肿、通窍、止咳、通痹、解毒等功能，Naito报告可以减轻鼻阻塞，Wu等报告可抗过敏。本文研究鹅不食草对豚鼠AR模型的干预作用。

咽鼓管咽口表面活性物质板层体超微结构的观察

目的观察咽鼓管咽口黏膜上皮表面活性物质板层体的超微结构。方法取4例知情同意受检的健康人咽鼓管咽口的组织做透射电镜标本,观察表面活性物质板层体的超微结构。结果咽鼓管咽口下壁黏膜上皮为假复层纤毛柱状上皮,可见亮颗粒分泌细胞,各类细胞可见表面活性物质板层体,圆或椭圆形,层状或线圈状小体,致密电子密度,散在。结论咽鼓管咽口下壁黏膜上皮为假复层纤毛柱状上皮,上皮内有亮颗粒分泌细胞,上皮各类细胞可见表面活性物质板层体,分泌表面活性物质,参与咽鼓管的功能。

咽鼓管咽口黏膜上皮的超微结构

目的观察咽鼓管咽口黏膜上皮的超微结构。方法取4例健康人咽鼓管咽口的组织做透射电镜标本,观察黏膜上皮的超微结构。结果咽鼓管咽口黏膜上皮为假复层纤毛柱状上皮,由纤毛柱状细胞、无纤毛柱状细胞、分泌细胞、中间细胞和基底细胞等组成,这些细胞的基部均贴附在基底膜上。可见亮颗粒分泌细胞。各类细胞可见表面活性物质板层体。黏膜下见弹性纤维和胶原纤维构成弹性纤维带。结论咽鼓管咽口黏膜上皮为假复层纤毛柱状上皮,可见亮颗粒分泌细胞,各类细胞可见板层体存在,分泌表面活性物质,弹性纤维带维持和形成咽鼓管咽口。

头颈部恶性肿瘤与血小板增多关系的探讨

检测３９８例头颈部恶性肿瘤患者血小板，并与５９例健康人比较，结果发现：①恶性肿瘤疗前组、复发组及转移组的血小板增多；②疗前组血小板数随恶性肿瘤病程的进展而增高；③在有效治疗后，血小板降低或恢复正常。结果表明恶性肿瘤可引起血小板增多；血小板增多可作为肿瘤发生、发展，疗效、预后判断的参考指标。作者对发生血小板增高的机理，血小板与肿瘤增殖及在转移中的作用，血小板增多的肿瘤学临床意义及血小板抑制剂抗肿瘤转移等四个问题进行了讨论。

辛夷对豚鼠变应性鼻炎模型鼻黏膜P物质的影响

目的探讨辛夷对变应性鼻炎鼻黏膜P物质的影响。方法8只为正常豚鼠不做模型,用单纯橄榄油滴鼻作对照(对照组1)。用橄榄油将甲苯-2,4-二异氰酸酯配成浓度为10%溶液作为致敏剂,滴鼻,建立豚鼠变应性鼻炎动物模型16只,其中8只以后用生理盐水滴鼻做对照(对照组2),8只用0.5%生理盐水辛夷挥发油滴鼻(辛夷治疗组)。致敏结束、模型成功后,取3组鼻黏膜进行免疫组化染色,观察P物质在鼻黏膜中的分布情况。结果①对照组1:P物质分布于正常鼻黏膜上皮细胞、固有层和黏膜下层的血管内皮细胞、腺细胞及导管。对照组2:鼻黏膜上述部位P物质染色加深,密度增大。辛夷治疗组:鼻黏膜上述部位P物质染色变浅、密度减低。②3组P物质阳性细胞表达计数的比较表明:对照组1P物质阳性细胞计数低于对照组2(P<0.05),显示变应性鼻炎状态下鼻黏膜P物质阳性细胞计数增多,密度增大。辛夷治疗组鼻黏膜P物质阳性细胞计数低于对照组2(P<0.05),表明辛夷治疗变应性鼻炎后可以抑制鼻黏膜P物质的生成。辛夷治疗组的P物质阳性细胞计数与对照组1相当(P>0.05),表明辛夷治疗后,P物质阳性细胞计数可降到正常水平。结论辛夷可抑制变应性鼻炎鼻黏膜中P物质,用于治疗变应性鼻炎。

健康人鼻咽部表面活性物质的测定

目的探讨健康人鼻咽部表面活性物质的状况,并对磷脂成分进行研究。方法采集健康人鼻咽部灌洗液,用高效液相色谱方法对表面活性物质的磷脂酰丝氨酸、磷脂酰乙胺醇、磷脂酰胆碱和鞘磷脂进行测定。结果①鼻咽部存在表面活性物质,磷脂4种成分均可测出;②磷脂成分的构成中,磷脂酰胆碱含量最多,为(53.94±17.10)%,是主要成分,其次是鞘磷脂和磷脂酰丝氨酸,分别是(22.18±24.08)%和(17.58±9.03)%,磷脂酰乙醇胺只占小部分,为(6.30±4.28)%。结论①鼻咽部存在表面活性物质;②鼻咽部表面活性物质的磷脂由磷脂酰丝氨酸、磷脂酰乙胺醇、磷脂酰胆碱和鞘磷脂组成,磷脂酰胆碱含量最多,对鼻咽部表面活性物质起决定作用。

葡萄球菌肠毒素A和黑色素瘤抗原A3基因重组真核共表达载体的构建及其在293T细胞的表达

目的构建葡萄球菌肠毒素A(staphylococcal endotoxinA,SEA)和喉癌来源的黑色素瘤抗原A3(melanoma-associated antigenA3,MAGE-A3)基因共表达的真核表达载体,检测、鉴定其在293T细胞中的表达情况。方法分别用RT-PCR方法 及人工化学合成法获得MAGE-A3和SEA基因片段,然后依次将MAGE-A3和SEA基因克隆至含内部核糖体进入位点的真核表达载体IRES序列的上、下游,构建成重组质粒pMGEA3-IRES-SEA。经脂质体转染至293T细胞以后,用荧光定量PCR、蛋白免疫印迹分别鉴定SEA和MAGE-A3基因的表达。结果限制性内切酶酶切分析证实MAGE-A3和SEA基因均正确地克隆在pMAGEA3-IRES-SEA中,基因测序结果与GenBank公布的MAGE-A3、SEA序列完全一致,实现了双基因的正确重组。重组质粒转染293T细胞后能检测到MAGE-A3、SEA基因的高水平的有效表达。稳定表达双基因的293T细胞上清对外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)增殖有促进作用,与细胞中SEA的表达和分泌有关。结论成功地构建了pMAGEA3-IRES-SEA真核表达质粒,并能在293T细胞中有效表达MAGE-A3和SEA蛋白,由此奠定了其作为抗喉癌DNA疫苗应用的基础。

喉癌Hep-2细胞来源的exosomes的发现和鉴定

目的：观察喉癌Hep-2细胞可否分泌exosomes,并从形态学角度鉴定。方法：大量培养喉癌Hep-2细胞,热休克处理,收集培养上清。先通过3/0.8μm深层过滤小型滤芯对上清进行预处理,去除直径较大的颗粒和杂质。采用Exosome Isolation Kit（商品化试剂盒）收集培养上清液4ml,依次加入Exosome Isolation Kit内试剂,通过exosomes提取专用过滤柱,收集浓缩液。用高倍透射电子显微镜对exosomes做鉴定。结果：成功从喉癌Hep-2细胞培养上清中分离提取出exosomes,电镜观察见exosomes呈圆形或椭圆形双层膜的囊泡状结构,直径约20～100nm,密度较高,分散均匀。结论：首次发现喉癌细胞自身能分泌exosomes,为喉癌免疫治疗做出新的探求。

豚鼠变应性鼻炎模型鼻黏膜嗜酸性粒细胞的脱颗粒

鼻黏膜局部嗜酸性粒细胞（eosinophils,EOS）参与变应性鼻炎（allergic rhinitis,AR）发病,EOS脱颗粒与鼻黏膜组织病理学改变有关,广泛的脱颗粒是EOS发挥病理学作用的先决条件。呼吸道黏膜EOS聚集的本身不引起高反应性,只有聚集的EOS激活后才引起相关症状。活化的标志就是EOS的形态和功能发生变化。本研究通过电镜观察豚鼠AR模型鼻黏膜EOS脱颗粒的状态。