牛体外受精时老化卵对受精率与染色体异常发生的影响

通过延长体外培养时间得到牛老化卵 ,对其体外受精率与染色体的异常发生进行了研究。体外受精 4 8h后的受精率 ,4 6 h培养组与 2 2 h和 34 h培养组之间差异显著 ( P<0 .0 5)。随着老化时间的延长 ,受精率及胚胎发育速度明显降低。染色体分析结果表明 ,4 6 h组的受精卵的染色体异常发生率为 6 1 .6 % ,2 2 h组4 4.6 % ,2组之间差异显著 ( P<0 .0 5)。单倍体 ( n=30 )的发生率也随着老化时间的延长而增加。这些单倍体的性染色体的构成表明 ,含有 X-性染色体的胚的出现率显著高于含有 Y-染色体的胚的出现率 ( P<0 .0 5)。单倍体的发生是由卵的老化而引起单一配子的孤雌发生。体外培养时间的延长对正常的

牛体外受精卵5～10细胞期单一卵裂球染色体诊断

利用单一卵裂球的染色体诊断牛体外受精 5 -～ 1 0 -细胞期胚胎的正常性。牛体外受精后 5 -～ 1 0 -细胞期的胚胎用0 .5 %链霉蛋白酶处理分离单一卵裂球 ,然后用 1 0 0 ng/ml长春花碱处理 1 0 h,制作染色体标本。检查 3 3枚不同发育期胚胎及卵裂球 1 85个 ,有 43 .8%的可进行染色体分析 (81 /1 85 )。结果表明 ,正常 2倍体的发生率为 46.9% ,染色体异常的卵裂球中 ,单倍体的发生率为 5 0 .6% ,显著高于多倍体 (2 .5 % )的发生率 (P<0 .0 0 1 )。单倍体中含有 X-性染色体和含有 Y-性染色体的性比基本相同。

牛体外受精胚的玻璃化保存及细胞遗传学研究

用 2 5 %的乙二醇和 0 .2mol/L蔗糖与 2 5 %乙二醇混合的玻璃化溶液对牛体外受精的早期囊胚用 1步法冷冻保存 ,融解后 ,在D -PBS液 (含有 0 .5mol蔗糖 )中 15min除去冷冻保护剂 ,培养 48和 96h。结果表明 :用含有 0 .2mol的蔗糖和 2 5 %的乙二醇混合的玻璃化溶液保存的早期囊胚的生存力明显高于不含蔗糖的玻璃化溶液 (P <0 .0 0 1)。染色体分析结果表明 :含有蔗糖的玻璃化溶液保存的囊胚的卵裂细胞数明显高于单独使用 2 5 %乙醇保存的囊胚 (P <0 .0 5 )。染色体异常发生率无明显变化。

不同季节牛体外受精胚的发育能力和细胞遗传学分析

本实验对不同季节的荷斯坦奶牛体外受精 48h后的卵裂率、受精卵的发育能力及细胞遗传学进行了分析研究。结果表明 ,在夏季 ( 7- 9月 ) ,牛体外受精后的卵裂率及囊胚的发生率均低于其它季节。将这些囊胚制作染色体标本 ,通过细胞遗传学分析 ,夏季体外受精后发育的囊胚的卵裂细胞数明显少于其它月份的卵裂细胞数(P <0 .0 5)。

牛不同直径卵泡内卵母细胞体外受精后的卵裂率和染色体异常分析

将不同直径牛卵泡内卵母细胞体外成熟培养 2 2 h后 ,对其体外受精后的卵裂率、胚胎发育速度和胚胎染色体异常发生率进行了研究。结果表明 ,体外受精后 4 8h,直径 3～ 6 mm卵泡内卵母细胞体外受精后的卵裂率明显高于直径1～ 2 mm和 7～ 10 mm卵泡内卵母细胞体外受精后的卵裂率 (P<0 .0 5 )。体外受精后 4 8h,直径 3～ 6 mm卵泡内卵母细胞体外受精后的胚胎的发育速度明显快于直径 1～ 2 mm和 7～ 10 mm卵泡组胚胎 (P<0 .0 5 )。通过对不同卵裂期胚胎的染色体标本分析表明 ,直径 1～ 2 m m卵泡内卵母细胞体外受精后的胚胎染色体异常发生率明显高于直径 3～ 6mm卵泡组 (P<0 .0 5 ) ,但与直径 7～ 10 mm卵泡组之间无显著性差异。

牛老化卵体外受精后的胚胎发育速度与细胞遗传学研究

体外成熟培养的牛老化卵受精后发育到囊胚期速度减慢。囊胚期的发育率分别为 2 2h培养组为 35 .3% ,34h组 2 3.6 % ,4 6h组 15 .4 % ,胚胎的发育速度随培养时间的延长而明显减慢 (P <0 .0 5 )。 4 6h组的囊胚期胚胎的平均卵裂球数明显少于 2 2h组 (P <0 .0 5 ) ,老化组的染色体平均分裂像、分裂指数均明显低于对照组 (P <0 .0 5 )。染色体异常发生率 4 6h组高于 2

牛未成熟卵母细胞体外受精及染色体分析

收集不同供体牛的卵母细胞并分成两组。体外成熟培养16h为不完全成熟组;体外成熟培养24h为完全成熟组。结果显示,体外受精48h后,成熟组大部分胚胎发育到8细胞期和16细胞期,不完全成熟组的多数胚胎发育到2细胞期和4细胞期,染色体异常发生率显著高于成熟组。染色体异常表现为单倍体、多倍体和混合倍体。引起染色体异常发生的原因可能是由于精子穿入时透明带或卵母细胞膜的功能障碍所引起。

冻存牛体外受精胚融解后生存率与染色体分析

体外受精后 7～ 9天的牛胚胎用 1 0 %甘油 (Glycerol)冷冻保存 ,融解 48h后 ,胚胎生存率表明 ,7～ 8天的囊胚的生存率明显高于 9天的囊胚生存率 (P <0 .0 5)。染色体分析表明 ,冷冻保存 7天的囊胚卵裂球数和平均分裂像明显低于相同天数的新鲜囊胚 (P <0 .0 5)。染色体异常发生率较高 ,但与新鲜囊胚之间无明显差异。

长春花碱在牛体外受精胚中染色体标本处理及性别分析

长春花碱是一种常用的细胞分裂阻止剂 ,在细胞遗传学分析及体外受精胚的性别鉴定等方面有着重要意义。该研究对牛体外受精胚的第一卵裂期染色体标本制作及性比进行了分析。废弃牛卵巢内卵子经体外成熟培养 ,体外受精 2 0h后 ,在培养基中添加 10 0ng/ml长春花碱处理 8h或 10h。结果表明 ,用长春花碱处理 8h的胚胎标本大部分含有可分析的中期分裂像并可进行性别判断 ,明显高于 10h处理的胚胎标本 (P <0 .0 5 )。性比分析表明 ,牛体外受精的胚胎的雄性发生率略高于雌性发生率。

白香猪发情周期外周血清P_4、E_2和LH含量的变化

用放射免疫分析法(RIA)测定了10头白香猪发情周期外周血清孕酮(P4)、17β-雌二醇(E2)和促黄体素(LH)含量的变化。血清孕酮的含量,在发情周期的第2d逐渐升高,峰值为21.25ng/ml±2.00ng/ml;E2含量的变化较特殊,在发情当天出现一个峰值,但最高值却出现在发情周期的第11d～13d,为79.48pg/ml±10.77pg/ml;促黄体素的含量在发情当日达到最高值以后逐渐下降。