雷公藤甲素药代动力学研究进展

雷公藤甲素(TP)作为雷公藤的主要活性成分,具有抗炎、免疫抑制、抗生育、抗囊肿和抗肿瘤等作用,但其治疗窗窄,对消化系统、泌尿生殖系统和血液系统等有较大的毒副作用,因此临床开发研究受到了一定限制。本文主要针对TP药代动力学的研究进行整理和归纳,并概述了基于改善TP体内药动学特性所研发的新型TP衍生物和相关制剂,以期为TP的新药开发研究提供助益。

四联活菌制剂增加小鼠脾脏和肠系膜淋巴结多种白细胞介素mRNA合成

目的探讨四联活菌(保加利亚杆菌、幼儿双歧杆菌、芽孢杆菌和嗜酸乳杆菌)制剂对小鼠肠道免疫相关分子的影响。方法将18只BALB/c小鼠随机分成对照组、益生菌培养上清组和菌液组。每只小鼠每天灌胃1次,连续处理1周。实时定量PCR检测脾脏和肠系膜淋巴结组织白细胞介素1α(IL-1α)、IL-2、IL-4、IL-6、IL-12α、IL-17A、IL-17F、IL-10、IL-18和IL-21、α干扰素(IFN-α)、IFN-β、IFN-γ、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、转化生长因子β(TGF-β)的m RNA水平,ELISA检测血清IL-17A、IL-21水平。结果与对照组相比,喂食益生菌培养上清组小鼠脾脏组织各种细胞因子的m RNA水平无明显改变,但喂食四联活菌可增加IL-12α、IL-17A、IL-17F和IL-21的m RNA水平;喂食益生菌培养上清和喂食四联活菌均可增加肠系膜组织IL-12α、IL-17F和IL-21的m RNA水平;外周血中IL-17F的水平升高。结论益生菌处理可增加机体白细胞介素水平。

同时测定小鼠血浆中氯吡格雷及其代谢产物浓度的LC-MS/MS法及其药代动力学研究

目的 :建立并验证小鼠血浆中氯吡格雷及其代谢物的LC-MS/MS检测方法 ,研究氯吡格雷在小鼠体内的药代动力学特征。方法:以吡罗昔康为内标,经乙腈沉淀蛋白后,采用电喷雾离子源(ESI)正离子扫描模式多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)方式检测氯吡格雷及其活性代谢物、羧酸代谢物和葡萄糖醛酸代谢物的血药浓度。色谱柱为安捷伦Poroshell120 SB-C18柱(100 mm×2.1 mm,2.7μm);流动相为水(含0.1%甲酸)和乙腈(含0.1%甲酸)并按梯度洗脱。小鼠单次灌胃给予氯吡格雷10 mg/kg,测定氯吡格雷及其3种主要代谢物的血药浓度,并研究其药代动力学特征。结果:氯吡格雷及其代谢产物在一定测定范围内均呈现良好的线性关系(r>0.99),提取回收率均大于80%,未见明显基质效应,其日内、日间精密度均较好(RSD<15%),准确度相对误差(RE)为-2.40%~5.00%,稳定性较好。在小鼠的药代动力学研究中,该方法能达到预期的实验要求。结论:所建立的LC-MS/MS分析方法能快速、准确地测定小鼠血浆中氯吡格雷及其代谢产物浓度,其专属性、回收率、基质效应、稳定性、精密度和准确度等均符合生物样品测定要求。

黄芪甲苷IV调节MRP3的表达及功能研究

目的:研究黄芪甲苷IV(AS-IV)对人肝癌细胞HepG2中多药耐药相关蛋白-3(MRP3)的调节作用,为AS-IV可能引发的药物相互作用阐明机制。方法:培养HepG2细胞,用不同浓度AS-IV进行干预,Western blotting方法检测细胞中MRP3的蛋白水平,流式细胞术检测胞内5-羧基荧光素(5-CF)的荧光强度,反映MRP的功能;给予MRP3 si RNA干扰,观察AS-IV诱导的MRP3蛋白表达是否增加其外排转运功能;提取胞核、总蛋白,检测胞核核因子E2相关因子2(Nrf2)、总Nrf2蛋白水平;给予Nrf2 si RNA干扰,观察AS-IV诱导的MRP3蛋白表达是否依赖于Nrf2。结果:200μmol/L AS-IV作用48 h后,细胞MRP3的蛋白水平显著增加(P<0.05),胞内5-CF的平均荧光强度(MFI)明显低于对照组(P<0.05),与单独给予AS-IV组相比,给予MRP3 si RNA干扰显著增加了胞内5-CF的MFI(P<0.05)。AS-IV增加了胞核内Nrf2的蛋白水平(P<0.01),亦增加了总Nrf2的蛋白表达(P<0.01)。给予Nrf2 si RNA干扰后,AS-IV诱导上调的MRP3被显著抑制(P<0.05)。结论:AS-IV可通过上调MRP3的蛋白表达,增加其外排转运功能,Nrf2的激活在AS-IV诱导MRP3蛋白表达中起着重要的作用。本研究提示,AS-IV与MRP3底物合用时,可能会产生药物-药物相互作用。