GHR和IGF-IR在济宁青山羊子宫内分布和表达的发育性变化

旨在探讨济宁青山羊生后发育过程中生长激素受体(Growth hormone,GHR)和胰岛素样生长因子I受体(Insulin-like growth factor-I,IGF-IR)在子宫的分布及其mRNA的表达规律。运用实时荧光定量PCR技术,检测GHR mRNA和IGF-IR mRNA的表达规律;SABC法检测GHR和IGF-IR免疫阳性细胞在子宫的分布。结果表明,GHR和IGF-IR免疫阳性染色主要见于子宫腺管上皮、基质、血管内皮和子宫平滑肌细胞的胞质中,偶见胞核着色。GHR和IGF-IR的阳性细胞数与其mRNA表达的变化趋势基本一致,且IGF-IR低于GHR。GHR和IGFIR在初情期(60日龄)和性成熟(120日龄)达到高峰(P<0.01),120日龄后下降,并维持在一个相对稳定的水平。GHR和IGF-IR在子宫的生长发育过程中起着重要作用,且初情期和性成熟期可能是济宁青山羊生后子宫发育最快的时期。

济宁青山羊子宫内ERα、ERβ和PR的分布及其mRNA表达的增龄性变化

旨在探讨济宁青山羊出生后发育过程中雌激素受体（Estrogenreceptor，ERα和ERβ）和孕激素受体（Pro—gesteronereceptor，PR）在子宫的定位及其mRNA的表达规律。利用SABC法检测ERα、ERβ和PR在不同日龄组子宫的分布；以GAPDH为内参基因，qRT～PCR法检测3种mRNA的相对表达量。结果显示，ERα、ERβ和PR阳性物质主要见于腔上皮、腺上皮、基质、血管内皮和平滑肌细胞的胞核中，偶见胞质阳性着色。ERα、ERβ和PR阳性细胞光密度与其mRNA表达趋势基本一致，但ERβ 低于ERα。ERα和E即在出生当天～30日龄处于低水平，60日龄开始上升，90～120日龄达到高峰，以后维持在高水平状态；PR在出生当天较高，而在30日龄处于最低水平，初情期（60日龄）后逐渐升高，并在性成熟（120日龄）和性成熟后（180日龄）出现2个高峰。ERα、ERβ和PR参与调节子宫内膜与肌层的增殖和分化。

不同解冻温度对精子活力的影响

温度是精子最敏感的外界因素之一。人们的注意力多集中在稀释液和冷冻方法的研究,对冷冻精液的解冻方法和技术的研究不足。但实践证明,牛精液冷冻效果好坏与解冻温度有很大关系。长期以来,人们沿用冷冻精液的解冻温度38～40℃解冻冷冻精液。为此,可以通过本试验了解不同解冻温度对牛冷冻精子复苏的影响,找出适宜牛细管冷冻精液的最佳解冻温度。

螺旋藻对仔猪生长性能、免疫性能及粪便菌群的影响

为开拓螺旋藻饲料资源,本试验研究了螺旋藻单独及其与含有枯草芽孢杆菌和乳酸菌的益生菌联用对仔猪生长性能、免疫性能以及粪便菌群的影响。按2×2析因试验设计,将80头平均体重为(8.85±0.20)kg、口蹄疫(FMD)母源抗体为阴性的断奶仔猪随机均分为对照组、螺旋藻组(添加0.5%的螺旋藻)、益生菌组(添加0.5 kg/t的益生菌)以及藻菌组(添加0.5%的螺旋藻与0.5 kg/t的益生菌),每组5个重复,每个重复4头猪,饲粮以粉料形式饲喂。试验期28 d。第8日免疫猪O型及A型FMD疫苗,第7日及第28日采集血清及新鲜粪便。结果显示:1)螺旋藻显著提高了仔猪平均日增重(P<0.05),显著降低了料重比(P<0.05)。2)第7日和第28日螺旋藻对O型和A型FMD抗体滴度皆无显著影响(P>0.05)。3)第28日螺旋藻极显著提高了仔猪血清免疫球蛋白G(Ig G)、免疫球蛋白M(Ig M)及补体3含量(P<0.01),对血清补体4含量无显著影响(P>0.05)。4)第7日和第28日螺旋藻对仔猪粪便中乳酸菌、大肠杆菌数量无显著影响(P>0.05)。除第28日Ig G、Ig M和补体3含量外,螺旋藻与益生菌无互作(P>0.05)。结果表明,FMD疫苗免疫期间饲粮中添加0.5%的螺旋藻可以促进仔猪的生长,与益生菌配伍能够提高仔猪的体液免疫性能。

猪温病热盛证动物模型的建立

筛选猪温病发热模型的造模方法并确定临床症状评定标准。以呋塞米注射液、脂多糖(LPS)、大肠杆菌菌悬液为致模因素,采用3种不同方法进行造模,即猪耳缘静脉注射呋塞米注射液(0.05 mL/kg BW),再以LPS(0.5μg/kg BW、1.5μg/kg BW)耳缘静脉注射攻毒;猪耳缘静脉注射LPS(1.5μg/kg BW),再以大肠杆菌菌悬液(0.3 mL/kg BW、0.5 mL/kg BW)耳缘静脉注射攻毒;猪耳缘静脉注射大肠杆菌菌悬液(0.3 mL/kg BW、0.2 mL/kg BW)进行攻毒。观测猪直肠温度、呼吸、饮食、精神、呕吐等情况。结果显示,注射呋塞米注射液与不同剂量LPS未制造出猪温病的全部临床症状;同时注射LPS与不同剂量大肠杆菌菌悬液能复制出猪温病模型,但大肠杆菌菌悬液0.5 mL/kg BW剂量组动物存在死亡,且LPS与大肠杆菌菌悬液均有致热之效;注射不同剂量的大肠杆菌菌悬液,剂量为0.3 mL/kg的大肠杆菌菌悬液即能有效复制出猪温病模型。结果提示,猪按0.3 mL/kg BW的剂量,经耳缘静脉单次注射浓度为2×10^(9)cfu/mL的大肠杆菌菌悬液即可复制出猪温病热盛证模型;可将“发热,精神萎靡,饮食欲下降,不愿走动,呼吸加深加粗或喘,粪便变软或稀,耳部、鼻盘、蹄部、臀部出现出血斑,舌象深红或绛紫等临床症状”作为猪温病热盛证临床症状评定标准。