同种异体软骨脱细胞基质在关节软骨缺损中的应用研究

目的:探索使用同种异体软骨脱细胞基质( DCM)修复关节软骨缺损的效果及可能机制。方法:原代培养新西兰大白兔耳软骨细胞和骨髓间充质干细胞( BMMSCs),软骨细胞扩增后诱导形成软骨细胞膜片,将细胞膜片脱细胞处理后制作为DCM,冷冻干燥备用。将BMMSCs 附和在DCM 表面共培养,SEM 观察材料微观形态以及BMMSCs 与材料的附和情况。qPCR检测DCM 对BMMSCs 软骨向分化的影响。使用同种异体DCM 修复兔膝关节软骨缺损,3个月后使用HE 染色和免疫组织化学染色检测缺损修复效果。结果:成功培养出复层软骨细胞膜片并制作出DCM;在SEM 下观察可见BMMSCs 与DCM结合良好;并发现DCM 可诱导BMMSCs 分泌细胞外基质。qPCR检测发现DCM 促进BMMSCs 表达COL-II 和SOX-9 表达,抑制COL-I 和COL-X 表达,不影响Aggrecan 表达。动物实验显示DCM + BMMSCs 组关节软骨缺损的修复程度优于对照组。结论:同种异体DCM 可能是通过SOX-9 通路诱导BMMSCs 的软骨向分化,促进软骨缺损的修复。