肝爽颗粒联合富马酸替诺福韦二吡呋酯片治疗慢性乙型肝炎肝硬化的疗效及对肝纤维化的影响

目的 观察肝爽颗粒联合富马酸替诺福韦二吡呋酯片治疗慢性乙型肝炎肝硬化的疗效及对肝纤维化的影响。方法 选取2018年1月—2021年12月兰州市第二人民医院肝病专家门诊收治的慢性乙型肝炎肝硬化患者110例,按照抽签法分为替诺福韦组(TDF组)与联合治疗组,各55例。TDF组予以富马酸替诺福韦二吡呋酯片,联合治疗组在TDF组基础上加用肝爽颗粒,2组均连续治疗12个月。比较2组临床疗效,治疗前及治疗3、6、12个月后肝功能指标[丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBil)、白蛋白(Alb)]、肝纤维化指标[透明质酸(HA)、层黏蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型前胶原(PCⅣ)]、炎性指标[干扰素诱导蛋白-10(IP-10)、生长分化因子-15(GDF-15)、五聚素3(PTX3)],不良反应。结果 治疗3、6、12个月后,2组血清ALT、AST、TBil水平低于治疗前,且联合治疗组血清ALT、AST水平低于TDF组(P<0.01);治疗6、12个月后2组血清Alb水平高于治疗前,治疗6个月后联合治疗组血清Alb水平高于TDF组(P<0.01)。治疗3、6、12个月后,2组血清HA、LN、PCⅢ和PCⅣ水平低于治疗前,且联合治疗组低于TDF组(P<0.05或P<0.01)。治疗12个月后,2组血清IP-10、GDF-15、PTX3水平低于治疗前,且联合治疗组低于TDF组(P<0.01)。联合治疗组与TDF组不良反应总发生率比较,差异无统计学意义(1.82%vs.1.82%,χ^(2)=0.509,P=0.475)。结论 慢性乙型肝炎肝硬化患者采用肝爽颗粒联合富马酸替诺福韦二吡呋酯片治疗,可有效改善肝功能,延缓肝纤维化进程,减轻炎性反应,安全性较高。

44株甘肃疑似非结核分枝杆菌临床分离株的菌种鉴定

目的对甘肃44株疑似非结核分枝杆菌临床分离株进行菌种鉴定。方法收集2010年甘肃省兰州市胸科医院从结核病患者痰标本中分离的、抗酸染色阳性和改良罗氏培养基,TCH和PNB鉴别培养基培养鉴定为非结核分枝杆菌(non-tuberculosis Mycobacteria,NTM),采用rpoB-PRA和PCR产物DNA测序等分子生物学方法进行细菌种的鉴定。结果共对44株疑似非结核分枝杆菌临床分离株进行了鉴定。经rpoB-PRA、rpoB和hsp65基因DNA测序分析,其中非结核分枝杆菌13株(29.55%),包括龟分枝杆菌(M.chelonae)5株,戈登分枝杆菌(M.gordonae)4株,胞内分枝杆菌(M.intracellulare)2株,赛特分枝杆菌(M.setense)1株,耻垢分枝杆菌(M.smegmatis)1株;诺卡菌(Nocardia)31株(70.45%),其中鼻疽诺卡菌(N.farcinica)30株,卡尔涅亚诺卡菌(N.carnea)1株。结论抗酸染色阳性、PNB/TCH鉴定为非结核分枝杆菌临床分离株中包含不同种类的非结核分枝杆菌和诺卡菌,应开展进一步菌种鉴定,以便于临床正确诊断和合理治疗。

甘肃省临床分离结核分枝杆菌MLVA分型初步研究

目的随机选取2005-2007年间甘肃省肺科医院临床分离结核分枝杆菌菌株,通过多位点可变数目串联重复序列(Multiple locus variable numbers of tandemrepeats analysis,MLVA)分型,了解甘肃结核分枝杆菌流行菌株基因型情况。方法选择标化的15个VNTR位点,对临床分离菌株DNA进行检测,DNA指纹图谱使用Bio Numerics4.5软件进行统计分析,得出聚类分析结果。结果 228株结核分枝杆菌被分为4大基因群,7个大基因类型,分别包含13(5.7%)、3(1.3%)、7(3.1%)、1(0.4%)、171(75%)、31(13.6%)、2(0.9%)个株菌;在株水平基因分型上,93(40.8%)株为单菌株基因型;其余菌株基因型分别包含2-10株结核分枝杆菌,共构成132个基因簇。结论甘肃结核分枝杆菌菌株存在丰富的基因多态性,ML-VA方法具有较高的基因分型能力,可以满足结核分枝杆菌株水平DNA分型的需要。甘肃省结核分枝杆菌流行株主要为北京家族基因型菌株。

两种结核分枝杆菌感染检测试剂盒性能的评估

目的评估两种γ干扰素(IFN-γ)释放试验(IGRA)检测结核分枝杆菌(MTB)感染试剂盒的临床检验性能。方法共检测105份临床血液标本(结核组61份,非结核性肺部疾病组31份,健康对照组13份),其中两种试剂对比检测82份(结核组43份,非结核性肺部疾病组26份,健康对照组13份),以澳大利亚Cellestis公司的QuantiFERON-TB Gold产品为参比试剂,评估考核试剂对感染判定的准确性;并对结核组与健康对照组的IFN-γ释放水平进行分析,初步探讨结核患者的基础免疫状况。结果参比试剂对诊断结核感染的敏感性为81.39%(35/43),特异性为76.92%(30/39),阳性预测值为79.55%(35/44),阴性预测值为78.95%(30/38),诊断有效性为79.27%(65/82);考核试剂对结核感染诊断的敏感性为73.77%(45/61),特异性为84.09%(37/44),阳性预测值为86.54%(45/52),阴性预测值为69.81%(37/53),诊断有效性为78.09%(82/105),两种试剂的检测结果有86.56%的一致率(Kappa=0.734);结核组IFN-γ的释放水平显著高于健康对照组(t=2.529,P=0.014)。结论考核试剂与参比试剂检测性能相当,对辅助诊断MTB感染有指导意义;结核患者T细胞活性可能存在着某种程度的反应性增高。

228株结核分枝杆菌MLVA分型研究

目的:通过多位点可变数目串联重复序列(MLVA)分型,了解甘肃省临床分离结核分枝杆菌菌株基因型情况。方法:选择标化的15个VNTR位点,对临床分离菌株DNA进行检测,DNA指纹图谱使用BioNumerics4.5软件进行统计分析,得出聚类分析结果。结果:228株结核分枝杆菌被分为4大基因群,7个主要基因型,分别包含13(5.7%)、3(1.3%)、7(3.1%)、1(0.4%)、171(75.0%)、31(13.6%)、2(0.9%)个菌株;在株水平基因分型上,93(40.8%)株为独立基因型;其余菌株基因型分别包含2～10株结核分枝杆菌,共构成132个基因簇。结论:甘肃省临床分离结核分枝杆菌菌株存在丰富的基因多态性,MLVA方法具有较高的基因分型能力,可以满足结核分枝杆菌株水平DNA分型的需要。甘肃省临床分离结核分枝杆菌菌株主要为北京家族基因型菌株。

基于金标免疫层析技术SARS-CoV-2抗体检测COVID-19的临床应用价值分析

目的研究基于金标免疫层析技术新型冠状病毒(SARS-CoV-2)抗体检测对新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的临床应用价值。方法大肠杆菌表达SARS-CoV-2 N蛋白,应用重组N蛋白制备双抗原夹心SARS-CoV-2抗体金标检测试剂盒,用该试剂盒检测95例COVID-19确诊患者,41例疑似患者,88例排除COVID-19的发热和肺部感染患者及48例发热门诊工作医务人员血清样本,SARS-CoV-2核酸检测(RT-PCR)作为金标准对照,以特异性、灵敏度、阳性预测值、阴性预测值及准确度评价其临床应用价值。对比分析不同感染时期COVID-19确诊和疑似患者及境外输入性与本地COVID-19确诊和疑似患者SARS-CoV-2抗体检测结果。分析SARS-CoV-2抗体检测试剂交叉反应及基础性疾病干扰实验。采用SPSS 23.0软件进行统计分析,以P<0.05表示差异有统计学意义。结果SARS-CoV-2特异性抗体检测试剂的特异性、灵敏度、阳性预测值、阴性预测值及准确度分别为96.32%、81.05%、93.90%、87.91%、90.04%。COVID-19疑似患者的血清抗体阳性率与COVID-19确诊患者之间差异有统计学意义(P=0.002),与非COVID-19患者之间差异有统计学意义(P<0.001)。COVID-19确诊和疑似患者入院首次血清抗体阳性率与其住院期间的检测结果差异无统计学意义(P>0.05)。境外输入性COVID-19确诊和疑似患者抗体阳性率与本地患者之间差异均无统计学意义(P>0.05)。SARS-CoV-2抗体检测试剂与肺炎支原体和其他呼吸道病原体感染之间交叉反应较低,基础性疾病的干扰也较低。结论基于免疫层析的SARS-CoV-2抗体检测对COVID-19诊断特异性强,灵敏度和准确度高,与病毒核酸检测联合应用可用于COVID-19早期诊断和疑似患者的排除。

1例L型支气管戈登菌肺部感染的报道

放线菌目戈登菌属支气管戈登菌存在于环境中,在机体免疫力下降时可感染致病。从1例肺部感染4年的78岁患者痰标本中分离出1株菌株,经聚合酶链反应(PCR)扩增16SrRNADNA,序列比对分析证实为支气管戈登菌。该菌株在含蔗糖的Middlebrook7H9(7H9-L)半固体培养基上呈煎蛋样嵌入性生长,在含氯化钠的92-3TB(92-3TB-L)液体培养基也生长,而在罗氏培养基、BACTECMGIT-960、不含氯化钠的92-3TB(92-3TB-B)液体培养基及不含蔗糖的Middlebrook7H9(7H9-B)半固体培养基不生长。涂片抗酸染色显微镜下可见大小不等的抗酸染色阴性球状或短杆状菌。传代培养2代后可见橘红色菌落,涂片抗酸染色可见少量抗酸染色弱阳性杆状菌,革兰染色及扫描电子显微镜观察菌体为杆状。结果表明,从患者痰液中分离的菌株为L型支气管戈登菌,提示肺部感染迁延不愈的免疫力低下患者需考虑感染L型支气管戈登菌的可能。

丙硫乙烟胺抗结核分枝杆菌临床耐药界限的研究

目的通过测定丙硫乙烟胺(Th)对128株临床分离的结核分枝杆菌的最低抑菌浓度(MIC), 分析MIC与既往Th的用药史及经过含Th方案治疗的疗效相关性,以期确定Th的临床耐药界限。方 法住院的结核病患者128例,留取痰或体液进行结核分枝杆菌培养、药敏试验及MIC测定,并系统 观察47例肺结核患者接受Th治疗方案的痰菌阴转率,各组间率的比较用x2检验。结果(1)既往未接 受Th药物治疗的临床分离株中,MIC=2．5μg／mL者占72．5％,MIC≤5．0μg／mL者占77．5％;(2)既往曾 接受Th药物治疗的临床分离株中,MIC>5．0μg／mL者占96．4％;(3)如以MIC≥5．0 μg／mL,为临床耐药界 限,MIC<5．0μg／mL与MIC≥5．0μg／mL比较,3、6、12个月患者痰菌阴转率分别为53．6％、75．0％、82．1％及 15．8％,31．6％、42．1％,两组比较差异均有非常显著性(P<0．01)。结论(1)曾接受Th药物治疗的结核病 患者分离株MIC显著高于未接受Th治疗的患者,随着用药时间的延长,MIC随之升高;(2)根据MIC与 临床疗效分析结果,提示采用MIC≥5．0 μg／mL为临床耐药界限为宜;(3)既往曾接受Th药物治疗的结核 病患者,应进行Th的药敏试验,并坚持合理、联合用药的原则,防止耐药株的产生。

新型冠状病毒细胞受体ACE2的研究进展

新型冠状病毒肺炎是一种由新型冠状病毒引发的急性传染病,已在全球呈现多点暴发趋势。近期的多项研究显示新型冠状病毒的S蛋白RBD区域可以和血管紧张素转化酶Ⅱ结合进入细胞。因此,血管紧张素转化酶Ⅱ与病毒感染细胞密切相关,可能是新型冠状病毒肺炎潜在的治疗靶点,深入研究血管紧张素转化酶Ⅱ与新型冠状病毒之间的关系将有助于把控人群遗传易感性及药物研发,推动疾控、临床和科研人员更快地制定出相关防控、诊疗方案。本研究综述新型冠状病毒及细胞表面受体血管紧张素转化酶Ⅱ目前的研究进展。

结核分枝杆菌SYBR Green实时荧光定量PCR快速检测方法的建立

目的建立一种能够快速、灵敏、特异的鉴定结核分枝杆菌的实时荧光定量PCR(real-time quantitative polymerase chain reaction,qPCR)检测方法。方法根据结核分枝杆菌基因保守序列设计引物,并构建标准品。对确诊肺结核病人培养涂阳的结核痰液标本113份。正常人的痰液58份。戈登分枝杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯球菌、表皮葡萄球菌、肺炎链球菌痰液标本共计30份。应用SYBR Green实时荧光定量PCR法、痰涂片抗酸染色法检测结核分枝杆菌。结果SYBRG Geen实时荧光定量PCR法、痰涂片抗酸染色法检测的特异性分别为99.1%、43.3%。结论荧光定量PCR是一种能够快速、灵敏度高、特异性强的结核分枝杆菌辅助诊断方法,具有重要的应用价值。

414例肺结核患者耐药菌谱分析

目的:研究肺结核患者的耐药特点及变化趋势,探讨耐药肺结核病的防治对策。方法:对本院2005～2008年间结核菌培养阳性且具有完整诊断病例的414份标本进行药敏试验,并对其耐药情况进行统计分析。结果:414例痰菌培养阳性标本中,耐药患者202例,总耐药率为48.8%,耐多药率为3.4%。其中初治病例230例,耐药率为23.4%,在初治耐药患者中单耐药率为35.0%,多耐药率为7.0%,耐多药率为0.4%;复治病例184例,耐药率为25.4%,在复治耐药患者中单耐药率为24.5%,多耐药率为25.5%,耐多药率为7.0%。导致患者耐多药的主要原因是人为因素,尤其是治疗不规范,用药不规则。结论:本院肺结核患者耐药情况略好于全国水平,但仍不可忽视,应加强患者管理,运用有效、合理的治疗方案治疗本病。

43株甘肃临床分离非结核分枝杆菌分类鉴定

目的了解甘肃当前临床流行的非结核分枝杆菌(NTM)的病原谱特点及其主要NTM种类,为指导临床诊疗、有效防治NTM肺病提供参考依据。方法收集2012年~2014年来源于甘肃省不同地区的875株临床分离分枝杆菌菌株,经PNB/TCH方法初步鉴定为疑似NTM菌株,采用16SrRNA基因测序技术进行菌种鉴定。结果 875株分枝杆菌临床分离菌株中分离出疑似NTM菌株46株。经16SrRNA基因序列分析鉴定,43株为NTM,3株为诺卡氏菌。43株NTM菌株分别为胞内分枝杆菌、堪萨斯分枝杆菌、塞内加尔分枝杆菌、鸟分枝杆菌、戈登氏分枝杆菌、楚尔盖分枝杆菌、罕见分枝杆菌、偶然分枝杆菌和脓肿分枝杆菌。其中,胞内分枝杆菌有31株,占总NTM菌株数的72.09%。结论甘肃省非结核分枝杆菌群以胞内分枝杆菌为主,应用16SrRNA基因序列分析鉴定方法能准确鉴定出NTM菌种,为临床诊治提供依据。

耐多药肺结核采用含阿米卡星或卷曲霉素化疗方案治疗的结果分析

选取2012年6月至2014年6月兰州市胸科医院接诊的符合入选标准的耐多药肺结核患者98例,按照随机化的原则分为研究组（48例）和对照组（50例）,研究组患者采用含常用剂量卷曲霉素的化疗方案（6Cm-Lfx-Pto-PAS-Z/18Lfx-Pto-PAS-Z）进行治疗;对照组患者采用国产常用剂量阿米卡星的化疗方案（6Am-Lfx-Pto-PAS-Z/18Lfx-Pto-PAS-Z）进行治疗.观察两组患者在化疗3、6、12、18及24个月的痰抗酸杆菌阴转率、痰结核分枝杆菌培养的阴转率、胸部X线摄影显示的病灶吸收情况、疗效及不良反应情况.评价含卷曲霉素或阿米卡星两种化疗方案在治疗耐多药肺结核患者中的临床疗效.采用SPSS 17.0软件进行数据分析,计量资料采用t检验,计数资料采用χ^2检验,以P＜0.05为差异有统计学意义.化疗过程中,研究组有3例患者退组,对照组有2例患者退组.研究组患者化疗3、6、12、18及24个月的痰培养阴转率分别为48.89％ （22/45）、57.78％ （26/45）、64.44％（29/45）、71.11％（32/45）和80.00％（36/45）,明显高于对照组[分别为27.08％（13/48）、35.42％（17/48）、41.67％（20/48）、50.00％（24/48）和56.25％（27/48）],两组比较差异有统计学意义（χ^2值分别为4.71、4.67、4.83、4.32、6.00;P值分别为0.030、0.031、0.028、0.038、0.014）.化疗3个月及总疗程结束后,胸部X线摄影显示病灶吸收的总有效率为60.00％（27/45）和84.44％（38/45）,明显高于对照组的35.42％（17/48）和56.25％（27/48）,两组比较差异有统计学意义（χ^2值分别为5.63、8.77;P值分别为0.018、0.003）.两组患者化疗后的药物不良反应发生率分别为22.22％（10/45）和29.17％（14/48）,差异无统计学意义（χ^2=0.59,P=0.444）.故认为含卷曲霉素的化疗方案治疗耐多药结核病患者的效果明显优于含常用剂量的阿米卡星的化疗方案.

不同药物预防抗结核药物致肝损害的疗效比较

目的:对比葡醛内酯片、水飞蓟宾葡甲胺片、中药复方预防抗结核药物致肝损害的临床疗效。方法:将150例肺结核(PTB)患者随机分为治疗1、2、3组,每组50例,3组均采用异烟肼、利福平、吡嗪酰胺及乙胺丁醇等药物抗结核治疗,治疗1组同时给予葡醛内酯片预防肝损害,治疗2组同时给予水飞蓟宾葡甲胺片预防肝损害,治疗3组采用中药复方预防肝损害。观察3组患者肝损害发生率、肝功能指标、不良反应发生率及临床疗效。结果:治疗1组、2组患者的肝损害发生率与治疗3组相比差异无统计学意义(P>0.05);3组的肝功能指标值差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:在抗肺结核保肝治疗中,中药复方、葡醛内酯片、水飞蓟宾葡甲胺片等具有同等的保肝、护肝作用。

结核病患者凝血功能的变化及意义

目的观察结核病患者治疗前后凝血功能的变化和结核病不同分型之间凝血指标的差异,探讨其临床意义。方法采用CA-50半自动凝血分析仪测定结核病患者611例,其中继发性肺结核患者330例、结核性胸膜炎患者94例、结核性腹膜炎患者72例和结核性脑膜炎患者115例的凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(Fbg)和凝血酶时间(TT)。用Ac.Tdiff2血球分析仪计数血小板(PLT)。结果结核病患者Fbg、PLT升高,TT延长(P<0.01),PT、APTT与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。经常规化疗和对症治疗后,结核病患者好转组Fbg、PLT、TT明显降低(P>0.05),结核病患者未好转组指标无变化,仍高于正常人(P<0.01)。继发性肺结核患者330例PT延长(P<0.05),结核性脑膜炎患者115例PT缩短(P<0.05),结核性胸膜炎94例患者和结核性腹膜炎72例患者的TT延长并高于其他两组(P<0.01)。结论结核病患者凝血指标发生变化并与治疗效果相关,不同型结核病患者凝血指标也有显著差异,可作为结核病诊断、监测治疗效果和预后的辅助指标。

医院感染及菌谱分析

在“医院感染控制”愈来愈受到重视的情况下 ,各医院定期总结本院常见病原菌菌谱及总体耐药概率和趋势 ,以科学指导临床规范用药。本文总结了 2 0 0 3年兰州市肺科医院的常见病原菌菌谱及耐药情况 ,用以反馈临床 ,减少临床用药的盲目性和滞后性。

甘肃耐氨基糖苷类结核分枝杆菌样本相关基因位点的研究

目的了解耐氨基糖苷类结核分枝杆菌临床分离株rrs与rpsl基因突变特征及其与耐药的关系。方法对86株活动性肺结核患者痰标本分离的结核分枝杆菌进行菌型鉴定及结核分枝杆菌药敏试验,利用二代测序技术全基因组测序获得rrs与rpsl基因序列,并对序列比对分析。结果86株多耐药样本中24个样本在rpsl发生了点突变,临床样本药敏结果显示24个点突变样本,其中9个样本突变类型为A263G,15个样本的突变类型为A128G,这些突变位点与链霉素、卡那霉素、阿米卡星、耐卷曲霉耐药相关。同时发现10个样本在rrs基因发生了点突变,1株突变类型为G5T,2株突变类型为A513C,其中1株突变类型为C517T,2株突变类型为T1030C,1株突变类型为A1401G,2株突变类型为C1456T,1株突变类型为G1481T,这些突变位点与链霉素、卡那霉素、阿米卡星、耐卷曲霉耐药相关。结论结核分枝杆菌对氨基糖苷类耐药与rrs和rpsl基因突变有关,突变类型rpslA128G、rpslA263G、rrsC517T、rrsA513C与链霉素耐药相关,突变类型rrsA1401G、rrsG1484T与链霉素、卡那霉素、阿米卡星、卷曲霉素交叉耐药相关。突变类型rrsC1456T与链霉素耐药相关,突变类型尚未见相关文献报道,为新的突变位点。为进一步研究耐药机制以及耐药结核病的快速检测提供了依据。