钴60辐照灭菌参景片的适用性研究

目的建立10-羟基-α-癸烯酸(10-HAD)含量测定方法,分析钴60辐照前后10-HAD的含量变化,结合微生物检测指标,评价制剂钴60辐照灭菌的适用性。方法采用HPLC法进行含量测定。C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:甲醇-0.4%磷酸溶液(50:50);流速1 mL/min;柱温30℃;检测波长210 nm。通过外标标准曲线法定量,并检验微生物指标。结果制剂中10-HAD钴60辐照前后含量基本一致,未出现显著差异。成分的含量在0.04～0.52μg范围内呈良好的线性关系,平均加样回收率为97.5%(RSD=1.1%,n=9)。微生物灭菌效果理想,符合要求。结论此研究为参景片钴60辐照(辐照剂量9k Gy)灭菌的适用性提供了依据。

基于非靶向尿液代谢组学方法的气虚模型评价

目的:通过代谢组学方法,从生物标志物及代谢通路角度,探讨Balb/C-nu小鼠游泳力竭法建立气虚模型的复制情况。方法:将Balb/C-nu小鼠随机分为正常组和气虚组,其中气虚组采用连续15 d尾部固定5%体质量金属游泳至力竭(鼻尖浸水时间>5 s)的方法建立气虚模型。利用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF/MS)进行尿液代谢组学分析,流动相选择乙腈(A)-0.1%甲酸水溶液(B)梯度洗脱(0~1 min,5%~8%A;1~4 min,8%~8.5%A;4~5 min,8.5%~12%A;5~10 min,12%~40%A;10~12 min,40%~100%A;12~15 min,100%A),流速0.3 mL·min^(-1),进样量10μL,电喷雾离子源(ESI),正、负离子模式检测,扫描范围为m/z 50~1000。运用主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)、人类代谢组数据库(HMDB)和MSE采集的高碰撞能量离子碎片信息,以及串联质谱法(MS/MS)碎片离子信息等鉴定潜在的生物标志物。采用京都基因和基因组百科全书(KEGG)数据库与MetaboAnalyst 5.0分析生物标志物的相应代谢通路及通路富集。结果:正常组和气虚组小鼠尿液内源性物质明显分离,并有24个具有显著差异的生物标志物。这些生物标志物涉及的代谢通路有三羧酸循环、糖酵解代谢、氨基酸代谢、脂肪酸代谢、嘧啶代谢、类固醇激素生物合成和色氨酸代谢等。其中,与能量相关的代谢通路有三羧酸循环、糖酵解代谢、氨基酸代谢、脂肪酸代谢、嘧啶代谢、类固醇激素生物合成。结论:通过尿液代谢组学考察,结合体征外观,成功评价了Balb/C-nu小鼠游泳力竭法建立的气虚模型,同时验证了气虚与能量代谢途径密切相关。

气虚型肝癌动物模型构建的思考

气虚型肝癌是机体以气虚为主,兼外邪内侵导致脏腑功能失调、气血运行不畅、毒瘀互结形成的癌变。在阐释传统中医和现代医学对肝癌的认识及其相关性的基础上,归纳气虚证动物模型(控制饮食法、中药泻下法、疲劳力竭法、复合法)和肝癌动物模型(自发性模型、诱发性模型、移植性模型、转基因模型)的造模方法,进一步探讨病证结合构建气虚型肝癌模型的方法,以期为该病的发病机制研究以及临床治疗提供实验依据。