黄秋葵果胶与半乳糖凝集素-3相互作用的研究

采用DEAE-纤维素柱层析对黄秋葵果胶进行分离纯化,得到不同结构特征的果胶组分,采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮柱前衍生化HPLC法和HPGPC对分离纯化的果胶组分进行单糖组成分析和分子量分布进行分析,采用半乳糖凝集素-3诱导的红细胞凝集实验和竞争性荧光酶联免疫法研究不同结构特征的黄秋葵果胶组分抑制半乳糖凝集素-3活性的情况。结果表明,黄秋葵果胶经DEAE-纤维素柱层析分级后得到AEP-1和AEP-2 2个产物,均主要由鼠李糖、半乳糖醛酸和半乳糖构成,分子量分别约为380和130 k Da;半乳糖凝集素-3诱导的红细胞凝集实验和竞争性荧光酶联免疫法的实验结果均表明,AEP-2具有较强的抑制半乳糖凝集素-3的活性,初步阐释了黄秋葵抗肿瘤活性的机理,将促进黄秋葵深度开发利用。

血脂6项在Beckman AU系列多个检测系统精密度、不确定度的评估及可比性分析

目的评估实验室内Beckman AU系列全自动生化分析仪5套检测系统三酰甘油(TG)、总胆固醇(TCHO)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、载脂蛋白A1(APOA1)、载脂蛋白B(APOB)6项指标的精密度、不确定度及结果的可比性。方法采用NCCLS EP15-A2方案,进行精密度、可比性分析,批内及日间精密度、各仪器间检测结果的一致性以1/4、1/3、1/2CLIA′88TEa为评价标准。利用校准品不确定度、基于室内质控、室间质评数据评估这些项目的不确定度。结果 5套检测系统血脂6项指标的批内精密度、日间精密度、相对偏倚均符合临床要求;TG扩展不确定度为0.079、0.035mmol/L,TCHO扩展不确定度为0.248、0.157mmol/L,HDL-C扩展不确定度为0.144、0.018mmol/L,LDL-C扩展不确定度为0.140、0.186mmol/L,APOA1扩展不确定度为0.148、0.090mmol/L,APOB扩展不确定度为0.104、0.058mmol/L。结论血脂6项检测结果在Beckman AU系列5套检测系统精密度良好且相同项各结果呈显著相关,结果一致且可比,对各分析项目测量不确定度的评定直观表达不同因素对测量结果的影响程度,评定简单易行。

“实验室认可条件”下临床检验实习带教设计与实践

临床检验工作是多学科理论知识交叉,基础医学与临床医学综合,多项技术如光学技术、分子生物学技术、免疫分析技术等应用的实践。近年来＂实验室认可条件＂的推行,对实验室检验工作质量提出了更高的要求,临床检验工作不只注重标本检验,而且越发重视如何提高标本检测质量、如何开发实验室项目、如何提升检验科咨询服务与实验室管理水平。遵义医学院附属医院医学检验科是＂系科合一＂的临床教学实习基地,每年承担来自省内不同地区实习生的实习带教工作。

抗环瓜氨酸肽抗体、类风湿因子和抗核抗体检测诊断类风湿关节炎的应用价值

目的探讨抗环瓜氨酸肽抗体(ACCP)、类风湿因子(RF)和抗核抗体(ANA)检测诊断类风湿关节炎(RA)的应用价值。方法随机选择RA患者(RA组)、非RA自身免疫性疾病患者(非RA组)和健康对照者(健康对照组)各80例,检测并比较血清ACCP、RF、ANA阳性率;分析并比较3个指标诊断RA的灵敏度、特异度及其差异性。结果 RA组、非RA组和健康对照组血清ACCP阳性率分别为82.5%、2.5%、0.0%,RF阳性率分别为97.5%、25.0%、15.0%,ANA阳性率分别为30.0%、22.5%、5.0%。ACCP、RF和ANA对RA的诊断灵敏度分别为82.5%(66/80)、97.5%(78/80)和30.0%(24/80),特异度分别为100.0%、85.0%和95.0%,非RA自身免疫性疾病的诊断灵敏度分别为2.5%(2/80)、25.0%(20/80)和22.5%(18/80),特异度分别为100.0%、85.0%和95.0%。结论 RF诊断RA灵敏度较高,但特异度相对较差;ACCP诊断RA具有较高的特异度和灵敏度,可作为鉴别RA与其他自身免疫性疾病的有效指标;RF、ACCP联合检测有助于提高RA的早期确诊率;ANA对RA有辅助诊断价值。

2009—2013年某院重症监护病房常见细菌及耐药变迁

目的 了解重症监护病房（ICU）近5年检出的常见细菌及其耐药性变迁,为临床合理用药提供依据。方法 收集某三甲医院2009—2013年ICU患者送检标本分离的细菌,对其进行鉴定及药物敏感试验。结果 2009—2013年ICU共分离细菌1 196株,居前5位的细菌为鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌,分别占29.60%、14.38%、12.21%、12.21%、11.37%。2009—2013年金黄色葡萄球菌对苯唑西林、庆大霉素、克林霉素、环丙沙星和利福平耐药率呈逐年下降趋势（均P〈0.05）,5年未出现对万古霉素耐药的菌株;铜绿假单胞菌对头孢他啶、头孢吡肟、氨曲南、庆大霉素、阿米卡星、妥布霉素和哌拉西林/他唑巴坦的耐药率呈下降趋势（均P〈0.05）,2009—2012年亚胺培南耐药率为32.26%~46.43%,2013年为16.00%;鲍曼不动杆菌对阿米卡星、妥布霉素和复方磺胺甲口恶唑的耐药率均呈下降趋势（均P〈0.05）,2009—2011年阿米卡星耐药率均〉80%,2013年则为10.53%,5年间鲍曼不动杆菌对大部分抗菌药物具有较高的耐药性（耐药率〉80%）。2009—2013年肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌对哌拉西林/他唑巴坦、头孢唑林、头孢吡肟、阿米卡星和氨曲南等的耐药率呈下降趋势（均P〈0.05）。结论 该院ICU常见感染细菌对部分抗菌药物耐药性呈下降趋势,可能与国家政策的出台和医院的管理有关,建议继续加强抗菌药物管理,合理使用抗菌药物,防止细菌耐药性增加。

基于Deming环的TBL+PBL式教学在临床生化检验专业学生实习管理中的应用

医学检验系学生实习是继学校教学的延伸，是将课本内容与实际工作相结合的过程，也是初步积累临床工作经验、深入了解检验专业，并为即将奔赴的工作岗位全面准备的重要阶段，是进一步提高操作技能、动手能力、独立思考能力难得的机会。然而近年来自动化、信息化涌入检验临床工作，临床生化检验的工作与任务发生深刻变化，学生进入临床生化实习阶段，误认为临床生化工作就是简单的上机操作，导致理论与实际“脱节”，实习期间漫无目的，感觉学不到“真东西”。因此，转变实习带教与管理方式，以提高学生实习效果，培养高素质、学以致用的检验医学人才尤其重要。遵义医学院附属医院检验科是“系科合一”、三级甲等医院、临床教学实习基地，每年承担省内多地区实习生带教工作，自2012年起临床生化检验室努力探索良好的实习管理、带教模式，尝试多种教学方式、融入新的实习带教理念。以团队为基础学习（TBL）是一种新型的教学模式，是在以问题为基础的学习（PBL ）基础上创新兴起的，主要强调在清楚学习目标的情况下，通过团队协作主动学习。PBL 是以问题为基础，以医学生为主体，以小组讨论为形式，在指导教师的参与下围绕一主题进行研究、探讨的学习过程。Deming 环是由美国管理学家戴明博士提出的一种全面质量管理模式，其应用对于教学、实习质量管理也起到积极作用［1‐4］，主要包括计划（P）、执行（D）、检查（C）、处理（A）四个过程［5］。2013年本室基于 Deming 环，利用 TBL 、PBL 教学方法，以“仪器性能评价”综合“质量管理”为核心问题，将实习生分组、以团队协作形式共同解决核心问题，现报道如下。

两台化学发光分析仪检测3项肿瘤标志物性能评价及可比性分析

目的探讨两台Beckman DXI800全自动化学发光分析仪检测总前列腺抗原(TPSA)、游离前列腺抗原(FPSA)、铁蛋白(Ferritin)3项肿瘤标志物的精密度、正确度及结果的可比性。方法参照美国国家临床实验室标准化协会(CLSI)EP15-A方案,Beckman多项质控品高、低2个浓度、每个浓度重复测定4次,每天分析一个批次、连续5d对3项肿瘤标志物的精密度进行分析;各项校准品5个浓度平行测定2次,将结果与设定要求进行偏差评估、验证其正确度;收集患者标本20份分别于两台化学发光分析仪(参比系统X,比较系统Y)检测,每天测定4份,连续测定5d,评价两台化学发光分析仪3项结果间的可比性。结果两台化学发光分析仪批内不精密度与总不精密度均小于厂家声明,各项目相关系数均r>0.975,r2>0.95,各定值校准品测定值较"靶值"相对偏差均小于1/2TEa(总允许误差)。结论 TPSA、FPSA、Ferritin 2个检测系统的精密度良好,结果呈显著相关,5个定值校准品较"靶值"相对偏差均在临床可接受范围内,测定结果具可比性。

肝功能11项在Olympus AU系列多个检测系统中的精密度评价及可比性分析

目的探讨实验室内Olympus AU系列全自动生化分析仪多个检测系统肝功能11项的精密度及可比性分析。方法参照美国国家临床实验室标准化委员会EP15-A方案,BIO-RAD常规化学质控品高、低2个浓度,每天分析一个批次,每批次重复测定4次,连续5个工作日分别对肝功能11项检测项目精密度进行分析;收集患者标本20份,分别于两台生化分析仪AU5400-1、AU5400-2的4个检测单元(参比系统X,比较系统Y1、Y2、Y3)进行检测,每天测定4份,连续测定5天,并对肝功能11项结果可比性分析。结果 AU5400 4个检测单元肝功能11项精密度分别按1/4、1/3CLIA′88标准或厂家声明,批内精密度、批间精密度均在可接受范围,比较系统Y1、Y2、Y3各项目相对偏倚均小于1/2TEa CLIA′88或厂家声明,各项目相关系数均r2>0.95。结论肝功能11项检测结果在Olympus AU系列4个检测系统精密度良好且相同项各结果呈显著相关,测定结果一致且具可比性。

GCSPC模式在临床检验基础实习带教中的应用研究

临床检验基础是医学检验专业一门重要的主干学科，涵盖体液、血液等常规检验及其形态学的基础检验，包含手工与自动化操作技能。遵义医学院附属医院医学检验科是“系科合一”统一管理的模式，培养学生能学以致用、掌握扎实的理论知识、初步具备临床工作能力是教学宗旨，每年接收来自全省各医学院校实习生，多年的实习带教积累了相当丰富的经验。但随着检验医学的迅速发展，仪器自动化程度提高，实验室认可工作的推行，新的理念的涌入，实习带教中存在如若干问题，鉴于存在的这些问题笔者提出了新的实习带教管理模式，

临床生化检验和分子生物学实验教学改革的尝试与思考

近年来,随着高科技、新实验技术向医学领域的渗透,促使医学教育急需培养高素质、创新、实用的复合型人才,因此,医学院校迫切需要对各项教学环节进行改革和创新。然而这一艰巨任务涉及面广,它包括教育观念、教育环境建设、教师与学生素质等方面的革新,每个环节互动相关,其中培养学生创新、综合能力尤为重要,但方式仍需进一步探索。

“三性”实验优化整合在临床生化检验实验教学中的设计与初步实践

医学检验是一门实验技术、临床医学等多学科交叉的实用型、应用技术类学科,其理论抽象,故实验教学在对理论知识的理解及深化的过程中起着十分重要的作用。在目前本专业教学目标中,核心问题不再是＂教＂与＂学＂,而是＂学＂与＂用＂,即如何培养学生学以致用,用所学扎实的理论,创新实践、了解科研并具备临床工作能力。

血清C-反应蛋白测定在2型糖尿病中的临床应用

目的探讨血清C-反应蛋白(CRP)测定在2型糖尿病中的临床就用。方法采用奥林巴斯AU2700对健康对照组40例、2型糖尿病患者88例(分为伴大血管并发症组44例和不伴大血管并发症组44例)分别进行血清CRP、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平测定。测定结果用SPSS10.0统计软件进行处理,组间比较采用配对资料t检验。结果2型糖尿病伴大血管并发症组和不伴大血管并发症组的血清CRP水平较健康对照组明显增高(P<0.05),2型糖尿病伴大血管并发症组血清CRP水平较不伴大血管并发症组的血清CRP水平高,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论血清CRP对2型糖尿病及其大血管病变的发生、发展和预后有重要的预测价值。

DUSP9对高脂喂养胰岛素抵抗C57小鼠胆固醇、糖异生的影响

目的探讨DUSP9基因对高脂喂养诱导的胰岛素抵抗C57小鼠胆固醇、糖异生的影响。方法将成功构建的pEGFP-DUSP9裸质粒注射随机选取的高脂喂养小鼠(HD组,n=10),以空载pEGFP-N1注射的高脂喂养小鼠为对照(HE组,n=10),普食喂养的为阴性对照(NC组,n=10),质粒注射48h后分别取各组小鼠血清、肝组织,检测总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、空腹血糖(FBG),空腹胰岛素(FINS)等指标;实时荧光定量PCR(QPCR)法检测各肝组织中DUSP9、脂代谢相关基因固醇元件结合蛋白2(SREBP2)、低密度脂蛋白受体(LDLr)、糖异生关键酶-磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPCK)mRNA表达的变化,Western blot法检测DUSP9蛋白表达水平。结果 HD、HE组小鼠FBG、FINS、TC、LDL-C水平较NC组明显升高(P<0.01);HD组小鼠肝脏中DUSP9mRNA、蛋白表达水平均较HE组显著升高(P<0.01),SREBP2、LDLr mRNA表达水平均显著增加(P<0.01),PEPCK mRNA表达水平明显下调(P<0.01);HD组小鼠48h血清TC、LDL-C水平与HE组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 DUSP9可能通过上调SREBP2、LDLr水平改善高脂喂养胰岛素抵抗C57小鼠的胆固醇代谢,减少PEPCK mRNA的表达水平从而导致肝糖输出减少,FBG水平降低。

1例May-Hegglin异常的漏诊与血细胞镜检

近年来血常规检验几乎完全依赖于血细胞分析仪,却忽略了血细胞的人工镜检技能,造成漏诊、误诊的事例,甚至引发医疗纠纷,笔者遇1例May-Hegglin异常（May-Hegglin anomaly,MHA）患者,多次因忽略细胞形态学检验而被漏诊,现报告如下。

ECLIA和ELISA检测乙肝病毒血清标志物对比探讨

目的探讨电化学发光免疫技术(ECLIA)定量检测乙型肝炎病毒血清标志物(HBV-Markers,HBV-M)与酶联免疫吸附试验(ELISA)定性检测HBV-M的优、缺点及临床意义。方法采用ECLIA法和ELISA法同时测定80例HBV感染者和30例体检健康者HBV-M五项指标(HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe和抗-HBc),并对两种方法检测结果进行比较。结果两种方法测定HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe和抗-HBc结果符合率分别为94.54%、95.45%9、4.54%、80.00%、95.45%。经相关分析:HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe和抗-HBc均有相关(0.400<r<0.700,P<0.001),且呈中等相关。差异比较:HBsAg、抗-HBs和抗-HBc无统计学意义(P>0.05),HBeAg和抗-HBe有统计学意义(P=0.031和P=0.004)。结论 ECLIA和ELISA检测HBV-M五项指标有较好的符合性。ECLIA自动化程度高、检测范围宽。检测e系统较ELISA敏感。能定量检测,对评估HBV低水平感染及潜伏期感染、乙肝疫苗接种效果以及抗病毒治疗疗效判断具有重要的临床意义。

浅谈虚拟现实技术在检验医学教学中的应用

随着计算机技术的发展,各种新技术在教学中的应用逐渐推广,犹如过去一段时间普遍应用的多媒体技术,微课、慕课等网络技术正在被鼓励应用于教学,目前虚拟现实(Virtual Reality,VR)技术在教学中的应用也在逐步普及,尤其在医学领域和医学教学领域逐渐被普遍应用,且有着其独特的特点。检验医学又有着本专业独有特点,若应用VR技术,可有利于学生巩固基础理论知识,掌握基本操作技能,使抽象化变具体化、可视化,便于学生理解理论与实践的结合。

住院儿童肺炎支原体感染情况分析

目的了解我院住院儿童肺炎支原体感染状况,为临床诊断及治疗提供依据。方法回顾性分析2010年12月至2011年12月我院497例患儿肺炎支原体抗体检测结果。结果在497例患儿中,共检出阳性108例,阳性率为21.7%,其中女患儿阳性率为31.5%,男女差别具有统计学意义(P<0.01)。在各年龄段中,1岁以内患儿阳性率明显低于其他年龄段(P<0.01),学龄前儿童(4～6)发病率最高(47.5%);一年中不同季节发病率无明显差异(P>0.05)。结论肺炎支原体四季均能引起呼吸道感染,好发于学龄前儿童,女童感染机会高于男童。

ISO15189常态化运行成效及体会

ISO15189即《医学实验室———质量和能力的专用要求》,是国际标准化组织临床实验室起草的,用于指导医学实验室(medicallaboratory)或临床实验室(clinicallaboratory)建立自己的检测质量及技术管理体系并指导其运作的标准。我科室于2013年12月顺利通过了ISO15189初次评审,又于2015年6月顺利通过ISO15189监督评审和体系文件换版工作,于2017年1月顺利通过换证复评工作。目前科室完全按照CNAS-CL02:2012《医学实验室质量和能力认可准则》运行,并进行了部分改革,成效显著,本文就个人体会略作报道。

DUSP9真核表达载体的构建及其在Hepa1-6肝细胞中的表达

目的构建小鼠DUSP9基因真核表达载体,并在小鼠Hepa1-6肝细胞中表达DUSP9蛋白。方法采用RT-PCR方法,从小鼠肝组织获取DUSP9cDNA片断,经双酶切、连接重组至真核表达载体pEGFP-N1,构建pEGFP-DUSP9重组质粒,双酶切及DNA测序对该重组质粒进行鉴定。脂质体介导pEGFP-DUSP9转染Hepa1-6肝细胞,实时荧光定量PCR、Western blot检测DUSP9mRNA及蛋白表达水平的变化。结果 pEGFP-DUSP9重组质粒经双酶切及测序鉴定证明构建完全正确,成功转染Hepa1-6肝细胞并高效表达,检测到明显上调的DUSP9mRNA和蛋白表达水平。结论成功构建真核表达载体pEGFP-DUSP9,并在Hepa1-6肝细胞中表达了DUSP9蛋白,可为研究DUSP9的生理功能及了解其在糖、脂代谢、胰岛素抵抗进程中的作用奠定坚实的基础。

免疫比浊法测定血清前白蛋白对临床诊断肝病的意义

前白蛋白(Prealbumin,PA)是由肝细胞合成,分子量为54kD,其半寿期约为12小时[1].由于PA半寿期很短,可灵敏地反映肝细胞合成功能状况.随着免疫化学测定技术的发展,PA测定已成为临床生物化学检验的一个常规项目,在肝病的诊断和治疗中,PA水平检测越来越受到重视.本文对免疫比浊法测定PA在临床诊断肝病的价值进行评价.