氟铝胁迫下茶树组培小苗的生长及其蛋白质分析

以茶树子叶柄诱导的无根小苗,在添加不同质量浓度 NaF,AlCl3的 MS 培养基上培养,以探讨茶树富集氟、铝的机理.结果表明,在初代培养中,NaF,AlCl3对小苗生长有明显的抑制或毒害作用.小苗培养至 50 d时,添加不同质量浓度 NaF 培养的小苗生长差异性达极显著水平,而添加不同质量浓度 AlCl3培养的小苗生长差异性未达到显著水平.初代培养未死亡的芽或组织在继代培养中能恢复生长.蛋白质电泳分析表明,大田栽培茶树的芽、茎、叶和只添加 NaF 1 mmol/L 培养基培养的小苗均出现了谱带 41,42;添加 AlCl33 mmol/L 的出现了谱带 42,而添加 AlCl3 3 mmol/L,NaF 1 mmol/L 与无氟、铝添加的均未出现谱带 41,42.

茶树富铝的研究进展及展望

茶树富集铝(A1),许多研究者对其进行了多方面的研究,取得了一些重要成果。本文拟从A1对茶树生长发育的作用及其对成茶品质的影响予以简要的综述并展开讨论。

茶多酚绿色荧光特性研究

以茶多酚为材料,研究了茶多酚浓度、溶液pH、溶剂、金属离子(Ca2+、Al3+)和热处理对茶多酚绿色荧光特性的影响。结果表明:以上各因素对荧光强度的影响都极为显著,当溶液pH=7.40.2、茶多酚浓度为3 mg/ml或溶剂采用50%乙醇水溶液时,荧光强度达到最大值;金属离子(Ca2+、Al3+)的直接影响不明显,主要通过影响游离茶多酚浓度而降低其荧光强度;加热处理能显著增大荧光强度。当茶多酚浓度过高(>3 mg/ml)或pH>8时,能导致最大发射峰位置显著红移,其它因素对其影响较小;此外,溶剂极性显著地影响激发峰的形状和荧光强度,但对最大发射峰位置影响较小。

山东茶园土壤高活性解钾细菌的筛选鉴定及肥效研究

为了筛选到适合山东茶园土壤环境的解钾菌株,以提高土壤钾素的高效转化效率,本研究经过菌株富集、分离、纯化等步骤,从山东茶园土壤中分离出9株解钾细菌。通过有效钾含量比较和菌株分类,筛选出1株活性最强菌株K2,经鉴定K2菌株为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。发酵试验表明,菌株K2最适宜生长的条件为pH值6.0,温度35℃,以麦芽糖、淀粉、玉米粉为碳源,酵母膏为氮源。施用该菌剂后土壤速效钾和速效磷含量比对照最大分别提高28.40%和28.49%。茶叶产量最大提高36.30%,同时茶叶中氨基酸含量显著增加,酚氨比值降低,有利于茶叶品质的提升。菌株K2可能是一株茶园土壤高效解钾细菌,可作为后续进一步研究茶园专用微生物菌剂的参考。

核果类果树流胶病研究进展

综述了国内外果树流胶病的研究进展;列出了常见果树流胶病的病原;分析了流胶病的传播与病害流行;提出了流胶病的诊断指标;总结出了流胶病的防治方法;指出了今后研究的重点问题。

茶树叶片荧光性绿斑病的初步研究

采用田间调查、病原生物培养、病理解剖和电子探针多种方法,对茶树叶片荧光性绿斑病的症状、发生和田间分布特点、病因进行了初步研究。结果表明:该病害典型症状表现为叶片下表皮局部凸起、呈绿色、且能发射绿色荧光;其凸起增厚是由于叶片海绵细胞病变、体积增大、细胞之间相互挤压所致;病害的发生与茶树生长势和营养供应水平密切相关;田间分布具分散性和不均衡性,无明显的发病中心;病理解剖和微生物培养没有发现病原生物,但可见细胞膜结构的破坏、细胞质中多泡体的形成以及多种异常细胞,而且病叶海绵细胞中含有较多的草酸钙晶体。综合以上结果可以初步判定:该病害属于生理性病害。

茶树多酚氧化酶基因的生物信息学分析及原核表达

通过PCR方法扩增出迎霜品种茶多酚氧化酶(PPO)的编码区序列,并将其登录于GenBank,注册号为GQ214317。生物信息学分析表明,该基因编码区全长1 800 bp,编码599个氨基酸,分子式为C3008H4677N813O900S18,存在两个铜离子结合域,没有跨膜区;进化树分析表明,茶与毛叶茶亲缘关系最近。成功构建了原核表达载体pET-ppo,并转化E.coli BL21(DE3),实现了PPO的原核表达。SDS-PAGE电泳检测结果表明,在71 KD处有一条特异蛋白条带,与预测大小相符。

茶树荧光性绿斑病叶细胞中的晶体研究

为探明茶树荧光性绿斑病叶细胞中大量存在的晶体性质,了解晶体形成与病害发生之间的相互关系,运用扫描电子显微镜、电子探针、X射线粉末衍射技术和化学分析多种方法,对病叶细胞中的晶体形态、化学组成以及含量与病害程度的相关性进行了研究,结果表明:病叶细胞中存在的晶体为草酸钙晶体,其分子式为CaC2O4·H2O,整个晶体并非仅由纯晶体物质所构成,在晶体内部还含有细胞中的其它物质,病叶细胞含有簇晶、棱晶、板晶和砂晶多种晶体形态;茶树叶片草酸钙晶体含量随病害程度加重而增加,两者相关性达到极显著水平。

“刷状芽”茶树的植物学特征及生物学特性

为探明茶树遗传变异和特异资源的遗传特性,对2003年发现的特异茶树“刷状芽”茶树进行了植物学特征、生物学特性的初步观察.结果表明该茶树属中小种类型,枝条顶端萌生多个连体芽,连体芽在生长发育过程中,其中的小芽又不断分化小芽,形成状似“扫帚”的芽.该茶树萌发早,全年无明显的休眠期,具有研究和利用价值.

发根农杆菌转化茶树的研究

以3个品种茶树的不同部位、器官为材料,探讨发根农杆菌转化茶树及毛状根增殖的条件.感染1025菌种的大红品种茎段,在添加IBA 0.4mg/L的1/2MS培养基上诱导出了毛状根.茶树毛状根细如头发,着生稀疏长根毛,具有激素自主性、分枝多、生长快等特点.经正交试验,将1/2MS培养基的KNO3,NH4NO3质量浓度降至MS培养基的1/8时的培养基,是毛状根伸长、分枝较好的基本培养基.添加IBA 0.2mg/L的培养基,毛状根的伸长、分枝优于添加IBA 0.1mg/L的培养基,但在毛状根上出现少量愈伤组织.

山东茶树品种引进情况的调查研究

通过实地调查结合问卷调查和文献查阅,对山东茶树引种工作进行了全面系统的分析。结果表明:山东引进茶树品种主要来源于浙江、福建、湖南和安徽,共引进茶树品种75个;引种方式主要为茶籽,以鸠坑和福鼎大白种植最广;无性苗引种数量呈上升趋势,但未形成规模,多处于试种阶段;山东引进品种的结构由单一适制绿茶向红绿茶兼制以及乌龙茶、多茶类适制方向发展;目前山东在生产上主要种植的无性系品种有:福鼎大白、龙井43、龙井长叶、白毫早、迎霜;适宜推广种植的无性系品种有:中茶108、乌牛早、舒茶早、碧香早、平阳特早、金观音、金萱等。

山东茶树品种引进利用现状与展望

山东位于我国茶树次适宜生长区，种茶区域处于北纬34°53’-37°49’、东经116°42’～122°42’之间，主要产区分为东南沿海丘陵区（胶州湾以南，沂沭河以东）、胶东半岛丘陵区（胶莱平原以东）和鲁中南泰沂山区，种茶的地市主要有日照、临沂、青岛、泰安、潍坊、烟台、威海、莱芜、淄博等。虽然有资料表明山东历史上有种茶的记载，但大规模的种植却源于上世纪六十年代中期的“南茶北引”。

不同成熟度茶籽外植体诱导发生体胚的研究

为了探究不同成熟度的茶籽作为外植体诱导体细胞胚胎发生的差异,该文选择成熟度依次递增的茶籽E1、E2、E3和E4作为外植体进行培养研究,结果表明:E4外植体接种成活率最高,但是诱导体细胞胚发生率较低。E1外植体在灭菌时耗损率相对较高,而且体胚诱导发生能力并非最佳。E2和E3外植体诱导分化体细胞胚的频率以及诱导获得的二级体胚的频率都较高,E2最佳,E3次之。以上结果说明E2茶籽外植体可以作为诱导体胚发生的优良材料。

新建茶园不同间作模式及覆盖遮阴效应比较研究——种植模式Ⅰ:茶行东西走向

研究了在东西走向的茶行中分别间作玉米、大豆、玉米+大豆以及覆盖遮阴对新建茶园生态环境、茶籽萌发、茶苗生长以及光合作用的影响。结果表明:⑴茶行东西走向以间作大豆的效果最好。间作大豆的茶园温度可降低3.1～3.6℃,光照强度降低86.4%～90.4%,日均相对湿度增加10.6%,土壤含水量增加13.0%,日均光合速率为对照的2.7倍,茶苗成活率、株高、茎粗、单株叶面积分别增加32.3%、60.5%、33.1%2、18.9%。⑵与覆盖遮阴相比,间作更能提高茶园的空气湿度。

茶树荧光性绿斑病叶膜结构及相关生理变化研究

以福鼎大白为材料,通过钙过量处理诱导出茶树荧光性绿斑病,研究茶树荧光性绿斑病叶膜系统损伤、电渗率以及与膜透性有关的渗透调节物质和活性氧酶清除系统的变化。研究结果表明:茶树荧光性绿斑病叶的细胞质膜以及叶绿体、线粒体、内质网、液泡的膜系统均遭到不同程度的损伤,随着病害程度加重,丙二醛、电解质渗透率逐渐升高;与此同时可溶性糖、可溶性蛋白、脯氨酸等渗透调节物质含量也逐渐升高,超氧化物歧化酶、过氧化物酶活性在发病初期显著升高,后期降低,但活性均高于对照。以上结果说明:茶树荧光性绿斑病叶在发病期间虽然启动了活性氧清除的膜保护机制,但仍然无法逆转膜系统损伤的发生。

不同基质对假植茶苗生长及生理特性的影响

以金萱茶树品种一年生扦插苗为试材,以茶园土、河沙、草炭、蛭石配制A1(河沙∶园土=1∶2)、A2(河沙∶园土=1∶1)和A3(河沙∶草炭∶蛭石=1∶1∶1)三种基质进行假植试验,通过比较三种基质理化性状,测定不同假植期间茶苗的根构型、根系活力、新梢长度、叶绿素荧光参数以及移栽前的成活率。结果表明:(1)三种基质中,以A3基质的容重和EC值最小,总孔隙度和持水孔隙度最大,有机质和速效氮、速效钾、速效磷含量最高,升温和持温效果好。A1基质的温度日较差最小,对温度的缓冲效果佳。(2)A3基质假植茶苗发根早,新生根的总根长、根表面积、根体积、根数以及总根活力、新梢长度极显著高于A1、A2。(3)叶绿素荧光参数Fv/Fo、Fv/Fm、ФPSⅡ、q P值虽高于A2、A1,但与A2差异不显著,与A1仅部分显著。(4)三种基质假植的茶苗成活率均在95%以上,A3最高达98.7%。(5)相关性分析表明,茶苗新生根总长、新梢长度与基质容重呈极显著负相关,与有机质、速效氮、速效磷、速效钾含量呈极显著正相关。所以,容重小、有机质及营养元素含量高的基质类型较适宜茶苗假植,本试验三种基质中以A3作为金萱茶苗假植基质效果最佳。

茶树4-香豆酸辅酶A连接酶基因Cs4CL1的克隆与蛋白表达分析

4-香豆酸辅酶A连接酶(4CL)是木质素合成过程中的关键酶。本试验以‘福鼎大白’茶树为材料,克隆得到Cs4CL1基因,该基因长度为1715 bp,开放阅读框长度1623 bp,编码540个氨基酸。氨基酸同源性分析显示,Cs4CL1蛋白具有植物4CL酶的典型特征,即AMP结合功能域和GEICIRG保守区。系统进化分析显示,Cs4CL1蛋白与蓝果树、烟草、番茄等植物的4CL1蛋白聚为一类,属于4CL亚家族A。利用原核表达系统可诱导出具有活性的Cs4CL1重组蛋白,该蛋白大小为78 kD。本研究为深入解析Cs4CL1在茶树木质素合成途径中的功能奠定了基础。

新建茶园不同间作模式及覆盖遮阴效应比较研究——种植模式Ⅱ:茶行南北走向

研究了在南北走向的茶行中间作玉米、大豆、玉米+大豆以及遮阴对山东新建茶园生态环境、茶籽萌发、茶苗生长以及光合作用的影响。结果表明:⑴在南北走向的茶行中以间作玉米的效果最好。与对照相比,间作玉米的茶园空气温度可降低1.7℃,日均光照强度降低47.6%,日均相对湿度增加15.8%,土壤含水量增加27.1%,茶苗的发芽期及全盛期分别提早8 d和11 d,茶苗成活率增加22.4%,株高、茎粗、节间长、叶面积各时期测定均表现最好;⑵与覆盖遮阴相比,间作更能提高茶园的空气湿度,但在南北走向下覆盖遮阴则更能有效降低茶园的光照和温度。

烘焙提香时间对工夫红茶品质的影响

为提高工夫红茶的甜香度,本文以山东夏季鲜叶加工的工夫红茶初制品为原料,在70℃的烘温下进行不同时间的烘焙提香处理,并通过感官审评、生化成分和香气分析方法研究其对工夫红茶品质的影响,结果表明：烘焙时间的长短不仅影响工夫红茶的香型和高低,而且也影响汤色和滋味,在本试验条件下,烘焙时间以1.0~1.5h的感官品质较好;此外,烘焙时间对工夫红茶各生化成分的影响不同,但对品质有利的生化成分以烘焙1.0h的茶样含量最高;随着烘焙时间的延长,工夫红茶香气的种类、含量以及组分比值发生显著变化,从而可以解释不同烘焙时间工夫红茶香型存在差异的原因。