基于IL-25/NF-κB信号通路探讨益气温阳护卫汤对支气管哮喘大鼠气道炎症的改善作用

目的 基于IL-25/NF-κB信号通路探讨益气温阳护卫汤对支气管哮喘大鼠气道炎症的作用机制。方法 将60只大鼠随机分为对照组、模型组、地塞米松组(0.2 mg/mL)和益气温阳护卫汤低、中、高剂量组(1、2、4 g/mL),每组10只,采用卵清蛋白(OVA)和氢氧化铝配制的混悬液进行腹腔注射,建立哮喘模型,造模后连续灌胃给药2周。每天观察各组大鼠饮食、精神状态、毛发、呼吸等情况,全自动血液分析仪对大鼠肺泡灌洗液(BALF)进行炎症细胞分类计数,HE染色观察肺组织病理变化,免疫组化(IHC)法检测肺组织IL-25蛋白表达,ELISA法检测BALF中IL-4、IL-5、IL-13水平,RT-qPCR检测肺组织IL-25、TRAF6 mRNA表达,Western blot法检测肺组织IL-25、TRAF6、IκBα、p-IκBα、NF-κB p65及p-NF-κB p65蛋白表达。结果 与对照组比较,模型组大鼠肺组织严重受损,大量炎性细胞浸润;BALF中各类炎症细胞数量、IL-4、IL-5、IL-13水平升高(P<0.01),肺组织IL-25、TRAF6 mRNA表达,IL-25、TRAF6、p-IκBα/IκBα、p-NF-κB p65/NF-κB p65蛋白表达升高(P<0.01);与模型组比较,益气温阳护卫汤各剂量均可改善肺组织炎性细胞浸润情况,降低BALF中各类炎性细胞数量、IL-4、IL-5、IL-13水平(P<0.05,P<0.01),降低肺组织IL-25、TRAF6 mRNA表达,IL-25、TRAF6、p-IκBα/IκBα、p-NF-κB p65/NF-κB p65蛋白表达(P<0.01)。结论 益气温阳护卫汤可以抑制支气管哮喘大鼠气道炎症,其作用可能与抑制IL-25/NF-κB信号通路活化,减少炎症因子表达有关。

对我国油井管产业发展的几点认识

介绍了石油天然气工业和油井管生产面临的形势,对中国油井管制造企业与世界上最优秀的油井管制造商之一法国Vallourec公司进行了比较分析,总结了目前世界油井管行业的特点。指出我国油井管产业发展应注重开发非API的高端油井管产品;关注国内和北美两大消费市场,提升技术服务能力;改变新建生产线扩张规模的发展思路;坚持技术创新,走"精品+服务"之路,不断提升企业软实力。

薛汉荣辨治湿咳经验

主要从外感湿邪与内生湿邪两个方面阐述湿咳的病因病机,分别从风寒夹湿、痰湿蕴肺、湿热郁肺、脾虚夹湿4个证型总结薛汉荣辨治湿咳的临床经验。

益气温阳护卫汤调控PI3K/Akt/mTOR自噬途径治疗支气管哮喘大鼠机制

目的:观察益气温阳护卫汤(YWHD)对哮喘大鼠及支气管上皮细胞(16HBE)自噬和磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路的调控,探讨YWHD治疗支气管哮喘(BA)的作用机制。方法:48只大鼠随机分为正常组、模型组、地塞米松组及YWHD低、中、高剂量组,每组8只。大鼠腹腔注射卵清蛋白(OVA)+氢氧化铝混悬液和OVA雾化吸入2周,建立BA动物实验模型,正常组给予等体积生理盐水。动物肺功能仪检测乙酰甲基胆碱(Mch)激发的大鼠支气管最大气道阻力(Max Rrs);酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠肺泡灌洗液中炎症因子白细胞介素(IL)-4、IL-13、IL-6、IL-33、IL-25、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、免疫球蛋白E(IgE)水平;苏木素-伊红(HE)及马松(Masson)染色法观察大鼠肺组织支气管病理变化;免疫荧光法检测支气管自噬蛋白微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)、Beclin1水平,实验观察YWHD含药血清对IL-13诱导的16HBE细胞自噬作用,通过mRFP-GFP-LC3腺病毒感染示踪细胞自噬水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞中LC3Ⅱ/Ⅰ、磷酸化(p)-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白表达。结果:与正常组比较,OVA诱导的模型组大鼠Max Rrs显著增大(P<0.01);肺泡灌洗液中IL-4、IL-13、IL-6、IL-33、IL-25、TNF-α、IgE的水平明显升高(P<0.05,P<0.01);支气管及血管周围伴有炎性细胞和淋巴细胞呈灶性浸润及上皮杯状细胞化生和上皮下胶原沉积增加;支气管自噬蛋白LC3B、Beclin1表达显著升高(P<0.01);IL-13诱导的16HBE细胞自噬流GFP向mRFP转变水平显著升高(P<0.01);p-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白表达显著下降,LC3Ⅱ/Ⅰ值显著升高(P<0.01)。与模型组比较,YWHD中、高剂量组大鼠Max Rrs显著减小(P<0.01);肺泡灌洗液中IL-4、IL-13、IL-6、IL-33、IL-25、TNF-α、IgE的水平明显降低(P<0.05,P<0.01);经YWHD中、高剂量给药后大鼠肺组织支气管少见淋巴细胞和粒细胞浸润,上皮杯状细胞化生和上皮下胶原沉积减少;肺组织支气管LC3B、Beclin1表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01);YWHD含药血清组GFP向mRFP转变的自噬流水平降低;p-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白表达明显升高,LC3Ⅱ/Ⅰ值明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论:YWHD可以改善BA大鼠气道高反应性和气道炎症,抑制肺组织中气道上皮细胞的自噬水平,其机制可能与PI3K/Akt/mTOR信号通路的激活有关。

益气温阳护卫汤含药血清对体外Th17/Treg细胞失衡与RORγ、Foxp3的影响

目的:研究益气温阳护卫汤含药血清对体外辅助性T淋巴细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)细胞失衡与维甲酸相关孤核受体γ(RORγ)、特异性叉头状转录因子3(Foxp3)的影响。方法:制备益气温阳护卫汤含药血清,CD4+T细胞进行原代分离、培养、鉴定。构建体外Th17/Treg细胞失衡模型:将细胞分为对照组、模型组、益气温阳护卫组、地塞米松组,除对照组外,其余组中分别加入等量转化生长因子-β(TGF-β)、白细胞介素(IL)-6、IL-23溶液,诱导CD4+T细胞向Th17细胞分化。给予相应的含药血清干预处理48 h后,采用流式细胞术检测各组Th17和Treg细胞比例。RT-PCR、Western Blot分别检测RORγ、Foxp3 mRNA和蛋白表达水平。结果:与对照组比较,模型组Th17细胞比例、Th17/Treg比例均显著上升(P<0.01),Treg细胞比例显著下降(P<0.01);与模型组比较,益气温阳护卫组及地塞米松组Th17细胞比例、Th17/Treg比例均显著降低(P<0.01,P<0.05),Treg细胞比例显著上升(P<0.01,P<0.05)。与对照组比较,模型组RORγ mRNA及蛋白表达均显著升高(P<0.05,P<0.01),Foxp3 mRNA及蛋白表达均显著降低(P<0.01,P<0.05);与模型组比较,益气温阳护卫组及地塞米松组RORγ mRNA及蛋白表达均显著降低(P<0.05),Foxp3 mRNA及蛋白表达均显著升高(P<0.05,P<0.01)。结论:益气温阳护卫汤含药血清能有效改善Th17/Treg细胞体外失衡,其机制可能与调节特异性转录因子RORγ、Foxp3的表达相关。

蠲哮汤调节三型固有淋巴样细胞治疗肥胖哮喘小鼠机制

目的探讨蠲哮汤(Juanxiao decotion,JXD)调节三型固有淋巴样细胞(type 3 innate lymphoid cells,ILC3s)治疗肥胖型哮喘的可能作用机制。方法60只BALB/c小鼠随机分为正常组、模型组(60%高脂饲料^(+)OVA)、JXD组(低、中、高剂量分别为8.5、17、34 g/kg)、地塞米松组(1 mg/kg),每组10只。除正常组,其余组高脂饲料喂养12周后,OVA致敏及雾化激发建立肥胖哮喘模型。首次雾化起,JXD低、中、高剂量组及地塞米松组给予相应药物灌胃,正常组和模型组给予等量生理盐水灌胃,持续7 d。苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察肺部病理改变,全自动生化仪检测血脂四项及肺泡灌洗液(alveolar lavage fluid,BALF)炎症细胞分类计数,酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测BALF和血清免疫球蛋白E(immunoglobulin E,IgE)水平,肺组织中白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-13(interleukin-13,IL-13)、C-C趋化因子受体17(CCL17)水平,流式细胞术分析肺和外周血中IL-17A^(+)ILC3、IL-22^(+)ILC3水平,Western blot检测肺组织中STAT3蛋白磷酸化水平。结果与正常组相比,模型组小鼠气道炎性细胞浸润,气道壁增厚,经地塞米松和JXD中、高剂量干预后小鼠肺部炎症情况得到改善,其中高剂量效果更明显。与正常组相比,模型组小鼠肺组织中IL-1β、IL-17A^(+)ILC3、IL-13、CCL17水平显著升高(P<0.05),IL-22^(+)ILC3比例和P-STAT3蛋白表达水平明显降低(P<0.01,P<0.05);与模型组相比,经JXD中、高剂量干预后肺组织中IL-1β、IL-17A^(+)ILC3、IL-13、CCL17水平显著下降,IL-22^(+)ILC3比例和P-STAT3表达明显增加(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。结论JXD能改善肥胖哮喘小鼠机体炎症环境,减轻肺部炎症和过敏反应,其机制可能与调节ILC3分泌细胞因子功能有关。

基于细胞自噬mTOR信号通路探讨益气温阳护卫法防治哮喘的作用机制

现阶段多项研究表明细胞自噬在哮喘发生、发展中有着重要的影响作用,成为国内外研究热点。笔者研究发现中医卫气与细胞自噬在功能、作用机制、特性等方向具有相似之处,认为二者具有一定的相关性,希望能通过调控细胞自噬以期达到防治哮喘的作用,并以此立论对中医卫气与自噬的联系,及运用益气温阳护卫法调控细胞自噬mTOR信号通路的理论依据进行初步探讨。

加味麻黄连翘赤小豆汤治疗湿热型咳嗽变异性哮喘的初探

咳嗽变异性哮喘是一种特殊类型哮喘,目前临床上对于湿热型的咳嗽变异性哮喘认知和研究较少,文章旨在论述薛汉荣教授根据多年的临床经验,从“湿热伤血,瘀热在里”与“湿热郁痹,上焦功能失常”的角度着手,灵活运用麻黄连翘赤小豆汤合上焦宣痹汤治疗湿热型咳嗽变异性哮喘的经验,并举临床医案以验之。