电针调控背根神经节巨噬细胞浸润改善紫杉醇诱导神经病理痛的机制研究

目的:观察电针双侧足三里穴对紫杉醇诱导神经病理痛小鼠模型背根神经节(DRG)巨噬细胞标记物CD68、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、白细胞介素-1β(IL-1β)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响,探讨电针调控紫杉醇诱导神经病理痛的机制。方法:选择成年C57小鼠30只,采用随机数字表法分为对照组、模型组、电针组,每组10只。模型组、电针组在第1、3、5、7天分别通过腹腔注射2 mg/kg紫杉醇进行造模;对照组注射相同体积的溶媒。造模结束后(第9天),电针组给予电针双侧足三里穴治疗,频率15 Hz,强度1 mA,30 min/次,1次/d,共7 d。采用“up and down”法测定足底机械阈值(PWMT);采用苏木精和伊红(HE)染色观察各组DRG组织的病理特征;采用免疫荧光染色法检测DRG组织MCP-1和CD68免疫阳性面积百分比;采用Western blot法检测DRG组织CD68、MCP-1、iNOS和IL-1β蛋白表达水平;采用透射电镜观察DRG组织巨噬细胞超微结构。结果:①PWMT:与对照组同一时间点比较,模型组第8、11、13、15天PWMT明显降低(P<0.05);与模型组同一时间点比较,电针组第11、13、15天PWMT明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。②DRG组织病理学特征:炎症细胞形态为近圆形,颜色为蓝紫色,对照组有少量的炎症细胞,模型组聚集浸润状态的炎症细胞数量增加,电针组聚集浸润状态的炎症细胞数量较少。③DRG组织MCP-1、CD68免疫阳性面积百分比:与对照组比较,模型组DRG组织MCP-1、CD68免疫阳性面积百分比明显升高(P<0.05);与模型组比较,电针组DRG组织MCP-1、CD68免疫阳性面积百分比明显降低(P<0.05)。④DRG组织MCP-1、CD68、IL-1β和iNOS蛋白表达水平:与对照组比较,模型组DRG组织MCP-1、CD68、IL-1β和iNOS蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与模型组比较,电针组DRG组织MCP-1、CD68、IL-1β和iNOS蛋白表达水平明显下降(P<0.05)。⑤DRG组织巨噬细胞超微结构:对照组DRG组织巨噬细胞形态呈近圆形,有圆钝形突起;模型组DRG组织巨噬细胞形态呈扁平状,有伪足,胞体比对照组大;电针组DRG组织巨噬细胞的形态呈近圆形,胞体比对照组大。结论:电针双侧足三里穴可改善紫杉醇诱导的神经病理痛小鼠疼痛程度,其机制可能是电针通过下调DRG中MCP-1表达,抑制巨噬细胞在DRG组织中的浸润,减少DRG组织中IL-1β、iNOS和CD68炎症因子释放,从而发挥镇痛作用。

电针激活CB2受体增强细胞自噬功能缓解炎性痛的机制

目的观察电针对野生型小鼠和内源性大麻素2型受体(Canabinoid receptor 2,CB2受体)基因敲除小鼠完全弗氏佐剂(Complete Freund’s adjuvant,CFA)诱导的炎性痛的缓解作用和炎症皮肤组织中细胞自噬功能的影响;激活CB2受体模拟电针作用,观察其对NR8383巨噬细胞自噬功能以及线粒体受损情况的影响,探讨电针能否通过激活CB2受体增强炎症皮肤组织自噬功能并清除受损线粒体从而缓解炎性痛。方法采用热板测痛法测定小鼠的热痛阈;采用von Frey丝,以“up and down”方法测定小鼠机械痛阈;采用Western blot检测野生型和CB2受体基因敲除小鼠足背皮肤组织中自噬相关蛋白p62和微管相关蛋白轻链3(light chain 3,LC3)的表达及NR8383巨噬细胞中p62和LC3的表达;采用流式细胞术检测受损线粒体的数量。结果①CFA诱导炎性痛模型的野生型小鼠和CB2受体基因敲除小鼠的热痛阈值和机械痛觉阈值均较溶媒对照组显著下降(P<0.01);电针可显著提高野生型炎性痛模型小鼠的热痛阈值和机械痛阈值(P<0.05),而对CB2受体基因敲除炎性痛模型小鼠无显著影响(P>0.05)。②电针可翻转炎性痛模型的野生型小鼠炎症皮肤组织中自噬相关蛋白p62表达增加和LC3-Ⅱ/Ⅰ比值降低,从而促进炎症皮肤组织中细胞自噬功能,而对CB2受体基因敲除炎性痛模型小鼠无影响;③采用CB2受体激动剂AM1241激活NR8383巨噬细胞中CB2受体可减少p62蛋白表达,升高LC3-Ⅱ/Ⅰ比值,从而改善CFA引起的自噬功能减弱,该作用可被CB2受体拮抗剂AM630所翻转;④采用CB2受体激动剂AM1241激活NR8383巨噬细胞中CB2受体可减少受损线粒体的数量,该作用可被CB2受体拮抗剂AM630所翻转,提示CB2受体的激活能促进巨噬细胞的自噬作用,从而清除受损的线粒体。结论电针通过激活CB2受体,增强炎症皮肤组织细胞自噬功能,清除受损的线粒体,从而缓解炎性痛。

AMPK参与调控疼痛机制的研究进展

疼痛被称为第五大生命指征,其发生发展过程涉及神经、代谢、免疫等多项生命活动。腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine monophosphate-activated protein kinase, AMPK)是生物能量代谢的关键分子。它广泛表达和分布于各种代谢相关组织,被能量应激激活,响应于ATP消耗增加或生成减少。近年来,诸多研究表明激活AMPK通过多种通路调节疼痛,说明AMPK广泛参与了疼痛的发生发展环节。本文在目前研究基础上梳理了AMPK参与调控疼痛的机制,为AMPK作为镇痛靶点的机制研究和临床治疗提供思路。

情志与伤肝之气机

情志是中医病因学内因要素之一,早在《内经》就有"百病生于气"、"怒则气上"、肝在志为怒等,阐明情志致病与脏腑气机的密切关系。肝主疏泄,调畅气机、调节情志。情志异常超过人的心理或生理承受能力时,则发生病变,首先往往是伤肝之气机,同时与情志病症相互影响,互为因果。

电针对膝关节骨性关节炎的临床疗效及血清GRO-α、VEGF的影响

目的:观察电针治疗膝关节骨性关节炎(KOA)的临床疗效,探讨其作用机制。方法:78例KOA患者,双盲法随机分为对照组(常规西药对症治疗)和治疗组(电针治疗),每组各39例。观察两组患者治疗前后VAS、WOMAC、ES评分,采用Luminex MAGPIX检测血清炎性因子GRO-α、VEGF浓度。结果:两组治疗后VAS、WOMAC、ES评分及血清GRO-α、VEGF浓度均低于治疗前,差异有统计学意义(P <0. 05或P <0. 01);与对照组相比,治疗组的VAS、WOMAC、ES评分及血清GRO-α、VEGF浓度降低显著,差异有统计学意义(P <0. 01)。结论:电针能有效减轻KOA患者临床症状,可能通过抑制炎性因子GRO-α、VEGF释放,产生镇痛效应。

针刺结合艾灸调节骨关节炎模型大鼠滑膜昼夜节律蛋白的表达

背景:滑膜炎症是膝骨性关节炎的主要病理特征之一,既往研究表明针灸治疗膝骨性关节炎效果显著,而针灸是否通过调控滑膜中的相关蛋白改善相关症状值得进一步研究。目的:探讨针刺结合艾灸对膝骨性关节炎大鼠滑膜组织中的生物钟蛋白(Clock、Bmal1)、TRPV4和炎症因子白细胞介素1β的影响。方法:80只3月龄SPF级雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、针刺组、针+灸组,每组20只,后3组以手术方法制备膝骨关节炎大鼠模型,于术后第7天取右膝足三里(ST36)、犊鼻(ST35)和内膝眼(EX-LE5)进行治疗,针刺组针刺5 mm,15 min/次,1次/d,共21 d;针+灸组治疗同针刺组,并结合悬起灸。所有大鼠相应处理结束后,采用旷场实验测大鼠自发活动能力;苏木精-伊红染色观察滑膜组织病理结构;Western blot检测滑膜组织Clock,Bmal1,TRPV4的表达;免疫荧光法检测滑膜组织白细胞介素1β的表达。结果与结论:(1)与对照组比较,模型组大鼠自发活动明显降低,其滑膜组织Clock及Bmal1表达量明显降低,TRPV4和炎性因子白细胞介素1β的表达明显升高(P<0.01),并且滑膜上皮损失严重。(2)与模型组比较,针刺和针+灸均能显著改善大鼠自发活动,提高骨关节炎大鼠滑膜组织中Clock及Bmal1蛋白表达水平(P<0.05),降低TRPV4和白细胞介素1β的表达(P<0.05),改善滑膜上皮损失程度;与针刺组相比,针+灸组改善更为明显(P<0.05)。(3)相对于针刺,针刺结合艾灸更能有效调节膝骨关节炎大鼠关节炎性损伤状况,降低滑膜细胞TRPV4的表达,促进骨关节炎大鼠滑膜组织中Clock,Bmal1的表达,从而调节滑膜细胞生物钟,降低炎性因子的表达,减缓膝骨关节炎的退变。

针刺对胶原诱导性关节炎大鼠胃肠动力的影响

目的:利用制备的胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠模型,探讨针刺足三里对CIA大鼠胃肠动力的影响。方法:将60只12周龄雄性大鼠随机分为4组:正常组、模型组、电针组、手针组,每组15只,建立牛Ⅱ型胶原与不完全弗氏佐剂诱导CIA大鼠模型。电针组和手针组于造模完成后第1天取足三里穴治疗,15 min/次,1次/d,连续治疗14 d。在3 d,7 d,14 d时,采用跖围法测大鼠跖围长度,并在治疗14 d后,用苏木精-伊红(HE)染色观察膝关节的病理学变化,计算大鼠的胃排空率和肠推进率,结肠蠕动波测定方法检测大鼠的肠蠕动波次数,通过蛋白质免疫印迹法检测胃黏膜中促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)和血管活性肠肽(VIP)的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠跖关节肿胀明显(P<0.01),软骨组织破坏严重并有炎症细胞浸润,胃排空率和肠推进率均降低(P<0.01),胃黏膜中CRF和VIP表达明显增多(P<0.01)。与模型组比较,针刺后大鼠跖关节肿胀程度明显降低(P<0.05),软骨破坏程度减轻和炎症细胞浸润明显减少,胃排空率和肠推进率提升(P<0.05),肠蠕动波次数增加,胃黏膜中CRF和VIP表达量减少(P<0.05),其中手针干预效果最为显著。结论:针刺足三里对CIA大鼠的肠动力障碍具有调节作用,并且手针组疗效优于电针组治疗。

工作动机在临床护士工作-家庭冲突与隐性缺勤间的中介效应

目的探讨临床护士工作动机在工作-家庭冲突与隐性缺勤间的中介作用,为降低护士隐性缺勤提供依据。方法2022年9—12月采用横断面调查法,以一般资料调查表、工作-家庭冲突量表、工作动机量表、斯坦福隐性缺勤量表对以方便抽样选取的522名临床护士进行问卷调查,分析工作动机在工作-家庭冲突与隐性缺勤间的中介效应。结果回收有效问卷511份,其中男15名,女496名,年龄20~52岁。临床护士工作-家庭冲突对隐性缺勤具有正向影响(r=0.319,P<0.05),且工作动机在工作-家庭冲突与隐性缺勤间具有部分中介作用(效应值为0.082),中介作用占总效应的35.00%。结论护理管理者和护士自身应采取多种方式降低工作-家庭冲突,促进护士工作-家庭平衡,提高工作动机,从而降低隐性缺勤,促进临床护理人员职业健康发展。

电针对带状疱疹后遗神经痛大鼠脊髓背角血管内皮生长因子表达的影响

目的:观察不同频率电针对带状疱疹后遗神经痛(PHN)大鼠脊髓背角血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法:将SD大鼠随机分为溶媒对照组、模型组、2 Hz电针组、15 Hz电针组、100 Hz电针组、假电针组,每组16只。采用单次腹腔注射超强辣椒素受体激动剂树脂毒素(RTX)诱导PHN模型。各电针组采用不同频率电针大鼠"环跳""阳陵泉"穴,隔日1次,持续治疗35d,假电针组将毫针浅刺穴位皮下,不进行电流刺激。采用von Frey丝隔日检测各组大鼠机械痛阈值。采用实时荧光定量PCR技术、Western blot法检测不同频率电针对脊髓背角VEGF 188mRNA和VEGF-A蛋白表达的影响。结果:与溶媒对照组比较,RTX诱导的PHN模型大鼠出现机械痛觉超敏(P<0.01)。与假电针组比较,2Hz、15Hz电针可以显著改善PHN大鼠机械痛觉超敏(P<0.05),而100 Hz电针无显著作用(P>0.05)。与溶媒对照组比较,模型组VEGF 188 mRNA和VEGF-A蛋白表达均显著升高(P<0.05)。2 Hz电针可以显著抑制VEGF 188mRNA和VEGF-A蛋白的表达(P<0.05),而15 Hz、100 Hz电针无显著作用(P>0.05)。RTX诱导的PHN大鼠脊髓背角VEGF表达和机械痛阈值呈负相关。结论:2 Hz电针通过抑制VEGF在PHN大鼠脊髓背角的表达,从而缓解机械痛觉超敏,提示2Hz电针是治疗PHN的最佳频率。

CB2受体参与电针抑制NLRP3炎性小体活化缓解紫杉醇化疗后神经病理痛机制

目的:探讨CB2受体是否参与电针抑制NLRP3炎性小体活化从而缓解紫杉醇化疗后引起的神经病理痛。方法:将32只野生型(WT)和32只CB2R基因敲除(KO)小鼠分别随机分为溶媒对照组、紫杉醇组、电针组、假电针组,每组8只。各组小鼠在第1、3、5、7d腹腔注射紫杉醇(2mg/kg)诱导神经病理痛模型。在紫杉醇第1次注射后的第9天开始,针刺双侧"环跳"穴(GB30),每天进行1次电针治疗,共7d。电针治疗参数为1m A,疏密波,频率2Hz,时间为30min。测试小鼠机械痛阈值、坐骨神经组织中CB2R(只测野生型小鼠)、NLRP3、Caspase-1p20和IL-1βp17的蛋白表达水平。数据采用SPSS 23.0分析。结果:与各自的溶媒对照组比较,紫杉醇能显著下调WT和KO小鼠的机械痛阈(P<0.05),上调CB2R、NLRP3、Caspase-1p20和IL-1βp17的表达(P<0.05);与各自的紫杉醇组比较,WT电针组在治疗后第5天显著增加了机械痛阈(P<0.05)、进一步上调CB2R的表达(P<0.05),下调NLRP3、Caspase-1p20和IL-1βp17的表达(P<0.05),而WT假电针组则无此效果,KO电针组和假电针组对机械痛阈及检测的相关蛋白表达无显著影响。结论:电针通过激活外周CB2受体,抑制NLRP3炎性小体信号通路的激活,从而缓解紫杉醇化疗后神经病理痛。

温针灸减轻膝骨性关节炎大鼠软骨组织的氧化损伤和炎性反应

目的:观察温针灸对膝骨性关节炎(KOA)模型大鼠软骨组织中氧化应激的相关因子和促炎因子表达的影响,探讨其作用机制。方法:SD大鼠按随机数字表法分为对照组、模型组、针刺组、艾灸组和温针灸组,每组12只。采用膝关节注射碘乙酸钠制备KOA大鼠模型。针刺组、艾灸组和温针灸组于造模后3 d分别针刺、艾灸、针刺+艾灸“足三里”,15 min/次,1次/d,连续21 d。每隔3 d,采用排水法检测大鼠足部体积,使用电子测痛仪检测大鼠的足底机械缩足反射阈值(MPT),并于21 d治疗结束后,通过HE染色法观察其膝关节的病理形态变化,计算Mankin评分以评估软骨破坏程度,用比色法检测大鼠膝关节软骨组织脂质过氧化物丙二醛(MDA)含量,免疫荧光染色法检测膝关节软骨组织NOX2、超氧化物歧化酶2(SOD2)和白细胞介素(IL)-1β的阳性表达。结果:与同时点对照组比较,模型组大鼠右侧足部体积、Mankin评分和膝关节软骨组织MDA含量、NOX2及IL-1β阳性表达均上升(P<0.01,P<0.05),MPT、SOD2阳性表达均明显降低(P<0.01)。治疗后与同时点模型组比较,针刺组、艾灸组和温针灸组大鼠右侧足部体积、Mankin评分和膝关节软骨组织MDA含量、NOX2及IL-1β阳性表达均降低(P<0.05),MPT、SOD2阳性表达均升高(P<0.05,P<0.01)。治疗后与同时点针刺组、艾灸组比较,温针灸组大鼠右侧足部体积、Mankin评分和膝关节软骨组织MDA含量、NOX2及IL-1β阳性表达均明显降低(P<0.05),MPT、SOD2阳性表达均明显升高(P<0.05)。HE染色结果显示,模型组关节面粗糙受损,软骨下新生血管形成,结缔组织中度增生,淋巴细胞和单核细胞大量浸润,干预21 d后针灸组尤其是温针组上述情况明显减轻。结论:温针灸可通过抑制KOA软骨组织氧化应激损伤和炎性反应发挥对KOA的治疗作用,且效果优于单纯针刺或艾灸治疗。

让中华民族共同体意识扎根少年儿童心中 湖北建始县红岩寺镇民族小学民族团结进步创建工作纪实

湖北省恩施土家族苗族自治州建始县红岩寺镇民族小学创办于1935年,有着“鄂西窗口学校”的美誉。学校现有6个年级、24个教学班,学生1200多名。近年来,学校以铸牢中华民族共同体意识为主线,紧扣“中华民族一家亲,同心共筑中国梦”的总目标,扎实开展民族团结进步教育进校园、进教材、进课堂等活动,先后获得“全国特色学校”与湖北省、恩施州“民族团结进步创建活动示范学校”“恩施州民族文化传承基地”等荣誉称号。