β-catenin,cyclin D1和c-myc在大肠癌组织中的表达

目的:探讨β-catenin(β-连环素)在大肠癌的表达及其与癌基因cyclinD1和C-myc的关系。 方法:应用免疫组化Powervision^(TM)二步法,检测25名正常人大肠黏膜,42例大肠腺瘤和58例大肠癌组织β-catenin,cyclinD1和C-myc的表达情况。 结果:正常大肠黏膜β-catenin胞膜阳性表达,cyclinD1和C-myc阴性。大肠腺瘤和大肠癌组织β-catenin呈胞质和/或胞核异位表达,大肠癌异位表达率为65.5％,显著高于大肠腺瘤(42.9％,P<0.05)。大肠癌cyclinD1和C-myc阳性率分别为74.1％、70.7％,均显著高于大肠腺瘤(45.2％,33.3％;P均<0.01)。大肠癌中β-catenin与cyclinD1和C-myc表达呈明显正相关(r=0.32,0.57;P<0.05,P<0.01)。 结论:β-catenin异位表达可能是原癌基因cyclinD1和C-myc激活的原因之一,并在大肠癌发生过程中可能起重要作用。

咖啡酸苯乙酯对人大肠癌HCT116细胞裸鼠皮下移植瘤生长的影响

目的观察咖啡酸苯乙酯(CAPE)对人大肠癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响。方法以大肠癌细胞株HCT116为研究对象,对20只BALB/c裸鼠建立人大肠癌皮下移植瘤模型,随机分为对照组和治疗组各10只。治疗组以CAPE5mg/d,观察两组第7、14、21、28天皮下移植瘤生长情况及裸鼠体重的变化;治疗结束时取肿瘤组织及心、肝、肺、肾、肠等行病理组织学检查,TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡。结果CAPE对HCT116裸鼠移植瘤的生长有明显抑制作用,与对照组相比,瘤体重量明显降低、体积减小(P<0.01),坏死面积显著增加,凋亡指数明显升高,但对裸鼠体重无明显影响,心、肝、肺、肾、肠等组织未见明显病理学改变。结论CAPE具有抑制人大肠癌裸鼠皮下移植瘤生长的作用,可能与其诱导细胞凋亡有关。

大肠癌APE1的表达特点及临床意义

目的探讨脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶(APE1)在大肠癌发生、发展中的作用。方法应用免疫组化SP法检测125例大肠癌、72例大肠腺瘤、60例癌旁大肠黏膜和40例正常大肠黏膜中APE1的表达情况,并分析APE1与大肠癌临床病理之间的关系。结果正常大肠黏膜APE1呈胞核表达,大肠腺瘤和大肠癌组织APE1表达特征发生改变,呈胞核表达、单纯胞质表达或核浆共同表达。APE1胞质异位表达率大肠癌组织为73·6%,大肠腺瘤组织为83·3%,二者无显著性差异(P>0·05),但均显著高于癌旁大肠黏膜(10%)和正常大肠黏膜(0%,P<0·01)。APE1胞质异位表达与大肠癌临床分期和淋巴结转移有关(P<0·01,P<0·05)。结论APE1胞质异位表达可能在大肠癌的发生、发展中起重要作用。

咖啡酸苯乙酯对大肠癌细胞β-catenin蛋白表达的影响

目的探讨咖啡酸苯乙酯(caffeicacidphenethylester,CAPE)对体外培养的人大肠癌HCT116和SW480细胞β-catenin蛋白表达的影响。方法以大肠癌细胞株HCT116和SW480为研究对象,应用间接免疫荧光、Westernblotting检测2·5、5·0、10mg/LCAPE处理24、48h后细胞β-catenin表达变化。结果Westernblotting检测结果显示2·5、5·0、10mg/LCAPE处理HCT116和SW480细胞24、48h后β-catenin总蛋白表达降低,呈剂量和时间依赖性,间接免疫荧光检测结果显示细胞β-catenin蛋白胞核及胞浆表达下调,细胞连接处胞膜表达上调。结论CAPE能明显下调β-catenin蛋白表达并阻止其核转位,这可能是其抗癌作用的重要分子机制。

咖啡酸苯乙酯对大肠癌HCT116细胞增生的抑制作用

目的:探讨咖啡酸苯乙酯(caffeic acid phenethyl ester, CAPE)对体外培养的大肠癌细胞HCT116细胞增生、细胞周期和凋亡的影响. 方法:不同浓度CAPE处理体外培养的HCT116细胞后,采用MTT法检测处理后24、48、72、96 h HCT116细胞的增生活性;PI染色、流式细胞仪检测处理后24 h细胞周期分布;Annexin V-FITC/PI双染色、流式细胞仪检测处理后24 h细胞凋亡率. 结果:80,40,20,10,5.0,2.5 mg/L CAPE处理HCT116细胞24,48,72,96 h后,细胞增生明显受到抑制,呈时间和剂量依赖性特点.流式细胞仪细胞周期分析表明,10,5.0,2.5 mg/L CAPE处理HCT116细胞24 h后,G0/G1期细胞百分率上升,S期细胞百分率下降,呈剂量依赖性.流式细胞仪细胞凋亡率分析表明: 10,5.0,2.5 mg/L CAPE处理HCT116细胞24 h后, 细胞凋亡率上升,呈剂量依赖性. 结论:CAPE对HCT116细胞具有明显的增生抑制作用,其机制与其阻滞细胞周期和诱导凋亡有关.

得力生注射液联合肝动脉化疗栓塞治疗原发性肝癌的临床研究

目的评价得力生注射液联合经肝动脉化疗栓塞术(transcatheterarterialchemoembolization,TACE)治疗原发性肝癌(hepatocelluarcarcinoma,HCC)患者的临床效果及不良反应。方法选择无手术指征的HCC患者62例,随机分为试验组(得力生联合TACE)32例和对照组(单纯TACE)30例,选用FAP肝动脉化疗方案,试验组加用得力生注射液50ml/d静滴,15d^20d。治疗2个周期后观测患者的近期疗效、细胞免疫功能、生活质量及不良反应。结果试验组有效率为56.3%(18/32),对照组为43.3%(13/30),两组之间差异无统计学意义,(P>0.05)。试验组较对照组生活质量(KPS评分)明显提高,(P<0.05)。试验组细胞免疫功能提高,其中NK细胞升高明显,差异有统计学意义,(P<0.05)。试验组化疗毒副反应减轻,与对照组比较无统计学意义,(P>0.05)。结论得力生注射液联合TACE治疗能提高HCC患生存质量,增强患者的细胞免疫功能。

TGF-β_1在烧伤合并内毒素血症骨髓粒单系造血变化中的作用

目的 探讨TGF β1与c kit相互关系及其在烧伤合并内毒素血症骨髓粒单系造血变化中的作用。方法 采用免疫组化法检测 2 0 %TBSAⅢ度烧伤合并内毒素 (1 μg/g体重 )腹腔注射后 1周内小鼠骨髓细胞TGF β1、c kit表达 ,并对骨髓粒单系造血变化进行了动态观察。结果 烧伤合并内毒素血症早期骨髓粒单系略呈增生反应 ,继而呈现造血抑制。烧注后 1、3d骨髓细胞TGF β1表达增强 ,c kit表达减弱 ;且TGF β1与骨髓CFU GM和c kit变化趋势相反。结论 TGF β1在烧伤合并内毒素血症骨髓粒单系造血抑制中起着重要作用 ,其机制与下调骨髓细胞c kit表达有关。

Wnt／β-catenin信号转导途径:大肠癌治疗的新靶点

大肠癌是最常见的恶性肿瘤之一,其发病呈上升趋势,严重威胁人民生命健康,目前主要采取以手术和放化疗为主的综合治疗,传统的化疗药物对患者的预后也只能起到有限的作用,因此新的分子靶向治疗迫在眉睫．Wnt/β-catenin信号途径在胚胎发育过程以及多种肿瘤的发生、发展中起重要作用．由于其在人类不同肿瘤中的广泛激活,调节细胞的生长、迁移和分化,已被公认为肿瘤发生过程中关键的信号通路之一,尤其在大肠癌的发生、发展上,目前研究表明,约90％的大肠癌发生与该通路过度激活有关．近年研究发现,一些非甾体抗炎药、植物类化合物、酪氨酸激酶抑制剂和血管生成抑制剂等能抑制Wnt／β-catenin信号途径过度激活,以及针对该途径重要信号分子的小分子抑制剂和基因治疗等分子靶向治疗均显示了很好的抗癌前景．

咖啡酸苯乙酯诱导人大肠癌细胞凋亡的研究

目的 :探讨咖啡酸苯乙酯 (caffeicacid phenethylester ,CAPE )诱导大肠癌HCT116细胞发生凋亡的作用 ,为CAPE用于大肠癌的临床治疗提供依据。方法 :采用MTT法、HE染色、AnnexinV FITC/PI双染色流式细胞术和末端脱氧核苷酸标记法(TUNEL) ,检测不同浓度CAPE作用后HCT116细胞增殖活性和细胞凋亡的变化。结果 :2 5、5 0、10 0mg/L的CAPE处理HCT116细胞 2 4h后 ,抑制率分别为12 2 0 %、2 2 44 %、3 7 86% ,细胞增殖明显受到抑制 ,呈量效依赖性 ;凋亡率分别为( 10 2 0± 0 66) %、 ( 16 60± 0 61) %、( 2 5 5 3± 3 2 7) % ,均显著高于对照组 ( 5 47± 0 93 ) % ,P <0 0 1。HE染色呈现典型的凋亡细胞形态特征。TUNEL法标记见明显的凋亡阳性细胞。结论

PBL教学模式在临床-病理讨论课中的应用

PBL（problem-based learning）已逐渐形成一种新的现代课堂教学模式。将PBL教学应用于临床一病理讨论课后，学生的临床病例分析能力大大增强，独立思考能力和逻辑思维能力也显著增强。实践表明：PBL教学在临床一病理讨论课中有很大的推广和运用空间。

烧伤合并内毒素血症骨髓粒单系造血反应

目的 探讨烧伤合并内毒素血症骨髓粒单系造血反应及骨髓细胞病理改变。方法 采用细胞计数和细胞培养观测总体表面积 (TBSA) 2 0 %Ⅲ度烧伤合并内毒素 (1μg/g体重 )腹腔注射后 1周内小鼠的外周血粒细胞和单核细胞总数及骨髓粒 -巨噬细胞集落形成单位 (CFU GM)动态变化 ,并用光、电镜和骨髓细胞原位凋亡检测 (TUNEL)法观察骨髓细胞病理改变和细胞凋亡。结果 烧伤合并内毒素注射后 6小时内 ,外周血粒细胞和单核细胞总数、骨髓CFU GM略增多 ,以后逐渐减少 ,1～ 5天外周血粒细胞和单核细胞总数、以及 12小时～ 5天的骨髓CFU GM显著低于正常对照组。烧伤注射后早期 ,可见较多的凋亡阳性细胞及骨髓细胞核固缩、碎裂、凋亡小体、线粒体肿胀、空泡化等病理改变。结论 烧伤合并内毒素血症早期骨髓粒单系略呈增生反应 ,继而呈造血抑制 ,与单烧组、单注内毒素组比较 ,具有抑制出现时间早、程度重、持续时间长的特点。

大肠癌β-连环素和上皮钙黏附素表达及其意义

目的 :探讨 β 连环素 (β catenin ,β cat)和上皮钙黏附素 (E cadherin ,E cd)在大肠癌发生、发展中的作用。方法 :采用免疫组化方法检测 2 5例正常人大肠黏膜、4 2例大肠腺瘤、19例腺瘤癌变及 5 8例大肠癌组织的 β cat、E cd的表达情况。结果 :正常大肠黏膜 β cat、E cd呈胞膜阳性表达。大肠腺瘤、腺瘤癌变和大肠癌组织 β cat表达特征发生改变 ,胞膜表达缺失 ,呈胞浆和 或胞核异位表达 ,腺瘤癌变 β cat异位表达率为 89 5 % ,显著高于大肠腺瘤 (4 2 9% ,P <0 0 1)和大肠癌 (65 5 % ,P <0 0 5 ) ;β cat异位表达与大肠癌的组织分化程度、淋巴结转移、Dukes分期等因素有关。大肠癌 β cat、E cd胞膜表达缺失率分别为 77 6%、70 7% ,显著高于大肠腺瘤 (33 3%、2 8 6% )和腺瘤癌变 (4 2 1%、36 8% ) (P <0 0 1) ,且与大肠癌淋巴结转移和Dukes分期有关。结论 :β cat异位表达可能参与了大肠癌发生、发展过程 ;β cat、E

烧伤合并内毒素血症骨髓粒单系造血变化及其机制的探讨

目的 :探讨烧伤合并内毒素血症骨髓粒单系造血变化及其机制。方法 :采用细胞计数和细胞培养观测2 0 %总体表面积 度烧伤合并内毒素 (按体重 1μg/ g)腹腔注射后 (烧注组 ) 1周内小鼠外周血粒细胞和单核细胞总数及骨髓粒巨噬细胞集落形成单位 (CFU GM)的动态变化 ;同时用免疫组织化学和放射免疫法检测骨髓细胞环氧化酶 2 (COX 2 )和转化生长因子 β1 (TGFβ1 )表达及骨髓细胞上清前列腺素 E2 (PGE2 )含量变化。结果 :烧注后 6小时内外周血粒细胞和单核细胞总数、骨髓 CFU GM略增多 ,以后逐渐减少 ,外周血粒细胞和单核细胞总数在 1～ 5日、骨髓 CFU GM在 12小时～ 5日显著低于正常对照组。烧注后 1、3日骨髓细胞COX 2和 TGFβ1 表达明显增强 ,12小时～ 5日 PGE2 显著高于正常对照组 ,PGE2 与 CFU GM呈显著负相关。结论 :烧伤合并内毒素血症骨髓粒单系造血抑制 ;PGE2 可能在烧伤合并内毒素血症骨髓粒单系抑制中起重要作用 ;TGFβ1 可能也是粒单系抑制的原因之一。

替莫唑胺联合全脑放疗治疗非小细胞肺癌脑转移临床研究

目的观察替莫唑胺(temozolomide,TMZ)配合全脑放疗与单纯全脑放疗治疗非小细胞肺癌(NSCLC)脑转移的疗效、生存时间及不良反应。方法将50例NSCLC伴脑转移患者随机分为单纯放疗组(放疗组25例)和放化疗联合组(联合组25例)。放疗组:全脑常规放疗剂量DT4000cGy/4周,对单发转移瘤缩野追加照射DT1 500cGy/1.5周。联合组:放疗方法与单纯放疗组相同,放疗第1天开始给药TMZ 200mg/m^2,第1～5天,28d重复。结果放疗组和联合组总有效率分别为44.0%(11/ 25)和63.3%(19/30)(P<0.05);治疗后中位生存时间放疗组为4.5个月,联合组为8.6个月,两组中位生存时间比较差异有统计学意义(P<0.01),联合组骨髓抑制和胃肠反应高于放疗组,但大部分患者能耐受。结论NSCLC伴脑转移患者行全脑放疗加TMZ可以提高脑肿瘤的局部控制率和延长生存时间。

骨骼肌卫星细胞的纯化、培养、鉴定及生物学特性的研究

目的研究骨骼肌卫星细胞体外纯化、培养、鉴定的方法及其生物学特性。方法采用I型胶原酶和胰蛋白酶两步消化法纯化出大鼠骨骼肌卫星细胞(SC),进行体外原代和传代培养,借此观察SC的增殖、分化特点并进行免疫细胞化学染色鉴定。结果两步消化法是获取SC可靠的方法。生长培养基促使细胞的增殖;延迟分瓶或分化培养基促使细胞分化形成肌管。骨骼肌肌球蛋白(myosin)单克隆抗体免疫细胞化学染色SC呈弱阳性,而肌管呈强阳性。结论体外培养的大鼠SC在合适的培养条件和传代比例下能够增殖与分化并保持其生物学特性,为其在组织工程和基因治疗中的应用奠定了基础。

重组人P53腺病毒增强肝癌细胞放疗的敏感性

目的:探讨重组人P53腺病毒(recombinant human adenovirusP53,rAd-P53)对不同P53状态肝癌细胞生长的抑制和放射增敏作用。方法:以重组人P53腺病毒分别感染突变型P53肝癌细胞PLC/PRF/5和野生型P53肝癌细胞SMMC-7721,Western blotting检测肝癌细胞P53蛋白表达,MTT法检测细胞存活率,台酚蓝染色绘制细胞生长曲线。肝癌细胞感染rAd-P5348h后照射不同剂量的X射线,克隆形成法检测放射增敏比,TUNEL法检测细胞凋亡。结果:50MOIrAd-P53转染PLC/PRF/5和SMMC-7721细胞后转染效率分别为89.37%和87.53%,转染48h可见P53蛋白高表达,MTT法显示细胞存活率分别为3.41%和35.44%,细胞生长曲线显示感染后第5天两种细胞生长抑制率分别为41.91%和17.03%(P<0.01),PLC/PRF/5细胞的凋亡率[(8.8±1.4)%]显著高于SMMC-7721[(4.1±1.1)%](P<0.01)。应用20MOI的rAd-P53转染细胞48h后加X射线(4Gy)照射,PLC/PRF/5细胞的凋亡率为(26.9±5.6)%,显著高于SMMC-7721细胞凋亡率(16.4±2.9)%(P<0.01);20MOI的rAd-P53转染后加照射PLC/PRF/5和SMMC-7721,细胞的放射增敏比SER(Dq)值分别为1.30和1.16;SER(D0)值分别为1.57和1.25。结论:rAd-P53能显著抑制人肝癌细胞生长、诱导细胞凋亡并提高细胞的放射敏感性,其对PLC/PRF/5细胞作用显著强于SMMC-7721细胞;表明不同内源性P53状态的肝癌细胞对rAd-P53治疗及其协同的放疗敏感性可能不同。

APE1在非小细胞肺癌中的表达特点及其与预后的关系

目的探讨脱嘌呤/嘧啶核酸内切酶(apurinic/apyrimidinic endonuclease,APE1)在非小细胞肺癌中的表达特点及其与患者预后的关系。方法应用免疫组化方法检测103例非小细胞肺癌组织和36例正常肺组织中APE1的表达情况,按染色强度将其分为低表达组和高表达组,并分析APE1在非小细胞肺癌表达情况与临床病理及患者预后的关系。结果正常肺组织及肺癌组织均有APE1表达,但正常肺组织以细胞核表达为主,肺癌组织主要在细胞质表达;APE1的表达与患者的年龄、性别、肿瘤大小、有无淋巴结转移及组织类型无明显关系;生存分析显示APE1的表达强弱与患者的预后明显相关。结论APE1蛋白表达增强与定位的改变与肺癌发生及发展有关,APE1基因表达增强可能是非小细胞肺癌患者预后不良的指标之一。

骨肉瘤中APE1的表达及其与血管生成的关系

目的 探讨APE1在骨肉瘤中的表达及其与肿瘤发生、发展以及血管生成的关系。方法 采用免疫组化S P法检测10例正常骨、10例良性骨瘤和60例骨肉瘤组织中APE1、CD3 4和FⅧ Rag等蛋白表达,并根据CD3 4和FⅧ Rag染色结果计数微血管密度。结果 APE1蛋白表达主要定位于肿瘤细胞的胞核,骨肉瘤中APE1显著高于正常骨(P <0 0 5 ) ,60例骨肉瘤中43例(72 % )呈高表达,17例呈低表达,APE1强表达组中的MVD显著高于弱表达组(P <0 0 1)。结论 APE1在骨肉瘤中过度表达与骨肉瘤分化以及微血管密度密切相关,有可能作为骨肉瘤抗血管生成治疗中一个新的靶向分子。

大鼠半胸照射致肺纤维化模型的病理学观察

目的观察辐射致鼠肺纤维化病变发生过程的病理特征及其规律。方法35只雄性SD大鼠分为实验组21只和对照组14只。实验组用8MV直线加速器给予大鼠右半胸20Gy单次照射,对照组佯装照射。在照射后1、3、7、14、28、84、164d共7个时相点,分批活杀大鼠(照射组3只,对照组2只),观察其全肺大体形态改变,取右肺中叶组织进行光镜及电镜病理组织形态观察。结果照射后1、3、7d可见肺实质细胞的损伤,内皮细胞核损伤出现最早;照射后14、28d肺泡间隔渐加宽,并有胶原和成纤维细胞的增生;照射后84、164d出现典型的肺纤维化病灶,肺实变区域有新生的血管内皮细胞和较多的肺泡Ⅱ型上皮细胞,肺泡腔内可见大量吞噬细胞。结论血管内皮细胞可能为辐射损伤最敏感的肺实质细胞。

MRI评价乳腺癌行保乳术的可行性研究

目的探讨应用MRI评价乳腺癌行保乳术的可行性。方法90例乳腺癌患者完成了术前在体MRI检查,其中74例同时作了钼钯摄影,参照乳腺癌保乳术(breast-conserving surgery,BCS)所需条件,分别分析患者是否适宜行BCS。术后对乳腺癌标本大体和显微病理形态学进行观察,将MRI、钼钯与组织病理学观察结果进行对照分析。结果MRI能够准确评价乳腺癌灶的位置、大小、浸润范围、数目、乳腺皮肤、胸壁和腋窝淋巴结状态,MRI判断39例(43.33%)可行BCS,与病理结果的符合率为88.89%。钼钯判断37例(52.86%)可行BCS,与病理结果的符合率为78.57%。结论MRI能为乳腺癌BCS患者的筛选提供比较全面而准确的信息,应用MRI评价乳腺癌行BCS是可行的。