熊本牡蛎多嵴和无嵴品系F_1生长性状的群体选育

为了改良熊本牡蛎(Crassostrea sikamea)生长性能,以多嵴品系和无嵴品系熊本牡蛎为材料,以壳高为指标,按照10%留种率,采用截头法进行了两个品系的群体选育研究,结果表明:选择反应及现实遗传力随着个体增大而增加,且多嵴品系选择反应略高于无嵴品系。对于多嵴品系而言,幼虫期、稚贝期、养成的选择反应及现实遗传分别为0.33±0.04、0.19±0.02,0.46±0.03、0.26±0.02,0.63±0.11、0.36±0.07;无嵴品系的分别为0.30±0.04、0.17±0.02,0.43±0.03、0.25±0.02,0.58±0.10、0.33±0.06。经过1周年的养成,多嵴品系和无嵴品系的壳高遗传改进量分别为8.41%、7.71%。由此可见,两个品系的现实遗传力相对较高,说明存在着一定程度的遗传变异。研究为熊本牡蛎遗传改良及新品系培育提供了理论与实践基础。

鳞砗磲的人工繁育和早期发生

基于2015年的预备性试验,于2016年3—6月在三亚开展了鳞砗磲人工繁育技术研究。结果显示,采用五羟色胺催产剂可以有效促使鳞砗磲排放配子,精卵比例为50∶1~100∶1时受精率、孵化率较高,孵化密度控制在15~20个/m L较适宜,经过36 h孵化,获得初孵D形幼虫;优选的D形幼虫经过5 d的微充气培养,即发育至足面盘幼虫,进入附着变态期。利用净水采苗法促使幼虫完成变态,经过7~10 d,幼虫出现鳃、次生壳,并建立完善的虫黄藻系统,即完成变态、形成稚贝。利用一定浓度虫黄藻浸泡足面盘幼虫2 h以内,可以有效地提高变态率。采用微流水＋微充气模式和2000~3000 lx光照（白天）进行稚贝培养,稚贝利用体内虫黄藻提供的营养就可以继续完成贝壳生长、器官发育。经过48 d和65 d的培育,分别成功获得壳长×壳高=（1174.0±146.5）μm×（1208.0±135.3）μm的稚贝约3万个,壳长×壳高=（1750.2±224.1）μm×（1816.5±226.5）μm的幼贝约0.5万个。本研究首次在国内人工繁育成功,获得了鳞砗磲苗种,为鳞砗磲人工大规模繁育、增殖放流、移植保育等工作奠定了基础。

熊本牡蛎(Crassostrea sikamea)多嵴和无嵴品系子二代生长性状的选择效应

为了进一步检查熊本牡蛎(Crassostrea sikamea)多嵴品系及无嵴品系的连续选择反应能力,以两个品系子一代上选组为材料,以壳高为指标,按照10%选择强度,开展了两个品系子二代混合上选研究,评估了两个品系子二代选择反应、现实遗传力,计算了两个品系的遗传改进量。结果表明:两个品系仍具有较高的现实遗传力,多嵴品系遗传参数均大于无嵴品系,表现出较好的遗传改良效果。多嵴和无嵴品系幼虫期的选择反应分别为0.47、0.34,稚贝期为0.65、0.40,养成期为0.82、0.56;幼虫期的现实遗传力分别为0.27、0.19,稚贝期为0.37、0.23,养成期为0.47、0.32;幼虫期的遗传改进量分别为4.83%、3.61%,稚贝期为7.55%、5.76%,养成期为9.95%、6.47%。经过一周年的养成,多嵴品系壳高显著大于无嵴品系,两个品系现实遗传力分别为0.50、0.35,遗传改进量分别为10.13%、6.61%。由此可见,多嵴品系具有较快的生长速度,遗传改良潜力较大。本研究为熊本牡蛎遗传改良和新品系培育奠定了坚实的基础。

砗蚝(Hippopus hippopus)的人工繁育

于2016年4—9月开展了砗蚝(Hippopus hippopus)人工繁育技术研究。采用五羟色胺进行催产、促使配子排放;精卵分别收集,进行异体间受精以避免自交;受精卵经过30h孵化,选出600万D形幼虫进行培育。砗蚝的早期生活史与砗磲(Tridacna spp.)相似,经历前期面盘幼虫、中期面盘幼虫、后期面盘幼虫、足面盘幼虫、单水管稚贝、双水管稚贝、外套膜触手稚贝、幼贝等阶段。与砗磲不同的是,砗蚝怀卵量较少,但卵径较大,D型幼虫也较大,幼虫趋光性更强,壳长2.0mm以后外套膜不伸出壳缘外,幼贝贝壳形态也不同于砗磲。同砗磲幼虫一样,砗蚝幼虫需要构建虫黄藻系统之后,才能出现鳃、次生壳等,从而完成变态成为稚贝。砗蚝幼虫变态率较低,仅为1.4%。中间育成期间,丝状藻和锥形螺是稚贝培育的主要敌害,需及时清理才能确保稚幼贝正常生长发育。经过120d的精心饲育,培养出平均壳长6.3mm幼贝500余个。本研究为进一步开展砗蚝人工繁育、中间育成、增殖放流、资源修复及移植保育提供了参考。

熊本牡蛎无嵴和多嵴品系生产性状比较

为了评估熊本牡蛎左壳放射嵴有无对其生产性能的影响,于2013年5月,以熊本牡蛎湛江群体子一代作为基础群体,筛选出无嵴及多嵴品系,采用繁殖生物学方法,比较了两个品系的表型性状差异。结果显示,野生群体中,多嵴亲本规格略大于无嵴亲本,鲜重、壳重及怀卵量均显著大于无嵴亲本;两个品系的受精孵化参数、D型幼虫大小及变态规格彼此间无显著差异;多嵴品系存活力及生长潜力在幼虫及养成期间显著高于无嵴品系。中间育成期间,湛江及大风江牡蛎养殖区环境对两品系生长性状造成了一定程度影响,表现出明显的环境效应,但是对存活力尚未造成影响。熊本牡蛎左壳放射嵴无相对于有是显性性状,主要受到一对显性基因控制,而多嵴性状是隐性性状,可以稳定遗传。研究为熊本牡蛎多嵴品系培育及其左壳放射嵴遗传机制奠定了坚实的理论基础与实践经验。

血液痕迹中DNA抽提方法的比较与优化

本文总结了6种DNA抽提方法,进行部分优化后对长时间离体血液痕迹中的DNA进行提取对比.结果表明:优化后的CTAB法可以简单、快速、高效地从凝血块儿中获得高纯度的DNA,并可满足后续PCR扩增和分子标记等分子遗传学研究.

BMP信号途径与心脏的形态建成

Bone m orphogenic protein (B M P)是骨 形态 建 成蛋 白 ,最初 的 研究 显 示它 与骨 骼及 其 相关 组 织的 发育 有关 ,后 来发 现 它在 包 括心 脏在 内的 人 类各 种 器官 发育 中都 有 着很 重 要的 作用 ,因 此,阐明 B M P 信 号 调控 途 径在心 脏分 化 中的 机 制具 有非 常 重要 的意 义 .最 近 ,研究 发 现了 很多 和 B M P 有关 的 生长 因子 ,并 且得 知 了 B M P 信号 的部 分 传递 途 径,它通 过诱 导 N kx2.5、G A TA -4来调 控 心脏 分化 ,如 果 掌握 了其 分子 机 制,则可 以 治疗 各种 相关 的心 脏 疾病 ,使 心 脏损 伤可 以得 到 恢复 .

斑马鱼血清样淀粉A基因在病毒感染中的表达分析

利用生物信息学技术对模式生物斑马鱼(Danio rerio)血清样淀粉A(serum amyloid A,SAA)蛋白与其他物种进行序列比对发现:SAA蛋白序列具有极高的同源性,SAA的进化趋势和物种进化趋势基本一致.实时荧光定量PCR结果显示:斑马鱼SAA对虹彩病毒(ISKNV)、脂多糖(LPS)和聚肌胞苷酸Poly(I:C)均表现出典型的急性应答蛋白特性,表达量均呈现先急剧升高,后迅速下降恢复到正常水平的模式,暗示其在先天性免疫应答中具有重要作用.

中国莲小分子热激蛋白HSP17.5基因克隆及表达分析

为了研究中国莲小分子热激蛋白的生理功能,通过RACE技术克隆得到小分子热激蛋白基因HSP17.5全长cDNA。该基因开放阅读框全长471bp,编码156个氨基酸,推测其分子量为17.5kD,等电点5.94。半定量RT-PCR试验结果显示,HSP17.5在中国莲授粉后不同时期的胚轴中均有表达,表达量呈现先降低后恢复的特点。HSP17.5在授粉后10d的子叶中有低丰度表达,之后消失。表明HSP17.5蛋白在中国莲种子萌发和幼苗早期的形态建成中可能起着重要的调节作用。

基因疫苗的免疫学分子机制

文中对病原体诱导宿主的免疫学过程以及基因疫苗作用的免疫学分子机制进行了综述,并对其未来发展进行了展望。

斑马鱼SAA基因克隆及表达分析

利用巢式PCR(nest PCR)的方法克隆斑马鱼血清淀粉样蛋白A基因,并进行生物信息学分析.实时荧光定量PCR结果显示:SAA在斑马鱼胚胎发育时期的表达量呈现明显的"增长-稳定-增长"趋势.成鱼组织分布中,SAA在11个斑马鱼组织中均能检测到,在心脏和肝脏中相对高表达.

斑马鱼TNFR2基因克隆及表达分析

利用巢式PCR方法克隆斑马鱼(Danio rerio)肿瘤坏死因子受体2(TNFR2)基因,该基因全长1 242bp,编码413个氨基酸,分子质量44.68 ku,等电点5.90。实时荧光定量PCR结果表明,TNFR2基因在斑马鱼胚胎发育时期的表达量呈现下降后趋于稳定,在斑马鱼不同组织中均能检测到,并且表达丰度差别不大,在肌肉中表达量最高,在肠道中表达量最低。

斑马鱼SAA蛋白原核表达、抗体制备及菌结合试验

通过构建斑马鱼(Danio rerio)SAA原核表达载体,在大肠杆菌(E.coli)TB1中诱导表达并纯化获得了斑马鱼SAA融合蛋白,将纯化的斑马鱼SAA蛋白免疫Balb/c小鼠,制备了特异性多克隆抗血清,并研究了斑马鱼SAA融合蛋白与细菌的结合能力及检测了抗体效价。结果表明,纯化的斑马鱼融合SAA蛋白能够与5种细菌直接结合,血清效价达到1∶2 000以上。

香港牡蛎(Crassostrea hongkongensis)Commd1基因的分子克隆及其在盐度胁迫下的表达分析

作为一类新近发现的蛋白家族,COMMD(copper metabolism Murr1 domain)广泛存在于多种生物体中,且参与多种生物学过程,包括钠转运、铜代谢以及核因子kappa B(nuclear factor kappa B,NF-κB)、低氧诱导因子1(hypoxia inducible factor 1,HIF-1)的调节等。为研究Commd1在盐度胁迫过程中的作用,采用RACE技术,首次从香港牡蛎Crassostrea hongkongensis中克隆获得Commd1基因c DNA全长序列,命名为Ch Commd1基因。该序列全长为841bp,5′和3′非编码区分别为18bp和259bp,开放阅读框为564bp;该阅读框编码一个含187个氨基酸,预测分子量为21.79k Da、理论等电点为5.21的蛋白。同源性比较和系统进化分析表明,香港牡蛎COMMD1蛋白与太平洋牡蛎Crassostrea gigas、光滑双脐螺Biomphalaria glabrata、加州海兔Aplysia california的同源性较高,是软体动物COMMD1家族的一个成员。实时荧光定量PCR结果显示,Ch Commd1基因在香港牡蛎各胚胎发育时期和成体组织中均有分布,而且,在盐度刺激后,其m RNA表达量在鳃和血淋巴中均明显增加。上述研究结果表明,Commd1基因在香港牡蛎发育和渗透压调节中可能发挥作用,为深入研究该基因在广盐适应性软体动物中的功能提供了依据。

香港牡蛎(Crassostrea hongkongensis)新型凝集素ChPerlucin的基因克隆与功能研究

C-型凝集素(C-type lectin)是一类能识别并结合多糖的免疫蛋白质超家族,本文首次克隆了一种新型香港牡蛎C-型凝集素基因——甘露聚糖结合凝集素,并获得了该基因的全长序列,命名为ChPerlucin。结果显示,ChPerlucin基因cDNA全长577bp,包括21bp的5′末端非翻译区(untranslated region,UTR)、73bp的3′UTR,以及483bp的开放阅读框(open reading frame,ORF),编码160个氨基酸,ChPerlucin蛋白理论分子量为18kD,等电点为5.95。ChPerlucin蛋白含有保守的C-型凝集素样结构域(C-type lectin or carbohydrate-recognition domain,CLECT);邻接法(Neighbor-Joining,NJ)进化树分析表明,ChPerlucin与其他贝类的Perlucin聚为一支,说明该基因是软体动物Perlucin家族的新成员。qRT-PCR结果显示,ChPerlucin在香港牡蛎所检测组织和各个胚胎发育时期中均有表达;病原菌刺激后,ChPerlucin表达量显著升高;利用毕赤酵母真核成功表达了ChPerlucin重组蛋白,发现ChPerlucin重组蛋白具有抑菌效果。以上结果表明ChPerlucin在香港牡蛎的先天性免疫过程中发挥了重要的作用。

长牡蛎新型模式识别受体CgLRRC69的克隆和功能鉴定

在双壳类软体动物中,血淋巴细胞介导的吞噬作用是清除入侵微生物的主要方式。本文在长牡蛎中鉴定了一个包含富含亮氨酸重复序列(Leucine-rich repeat, LRR)结构域的新型基因,命名为CgLRRC69。对该基因的组织分布分析表明, CgLRRC69 mRNA在血淋巴细胞、鳃、肌肉、外套膜、心脏、消化腺和性腺中广泛表达。副溶血弧菌感染可以显著地刺激CgLRRC69在血淋巴细胞中表达,并且在感染后6h达到峰值。同时,酶联免疫吸附实验发现CgLRRC69可以特异性结合脂多糖(lipopolysaccharide,LPS),表明它可能在免疫防御中有功能。吞噬实验结果显示,CgLRRC69重组蛋白可以显著地提高血淋巴细胞的吞噬能力;RNAi干扰CgLRRC69在牡蛎体内的表达,显著降低了血淋巴细胞对细菌的清除能力。因此,这些结果揭示了CgLRRC69作为一种新型模式识别受体,可以特异性识别革兰氏阴性菌的主要成分LPS,通过调理作用有效地清除细菌。

水稻秸秆的纤维素酶水解研究

木霉T-LSQ-18和黑曲霉SP-77固体发酵条件的优化,使T-LSQ-18菌株纤维素酶C1酶活达28.5IU/g,黑曲霉CB酶酶活达132lU/g;采用木霉T-LSQ-18:黑曲霉SP-77(6:1)的混合酶液水解预处理后的秸秆,使秸秆净减率达到35.3%。

在深化改革中加快转变战斗力生成模式

1优化武器装备体系 历次军事变革，大都是由装备技术因素引发的。所以，大力发展信息化武器装备，突出抓好基于信息系统的体系作战能力建设，是打赢信息化战争的重要措施。一是拓宽研发武器装备的技术渠道。走寓军于民、军民融合式发展道路，是当今世界军事强国普遍采用的做法。当年美国的“阿波罗”、GPS、信息高速公路以及当今的“智慧地球”等计划都是军民融合的。坚持以重大工程为牵引，集合军地拔尖技术人才进行技术攻关，在研发出世界先进武器装备和作战系统的同时，带动和促进技术的的飞跃式发展。民用技术发展使军事领域受益，军事技术突破带动经济起飞，形成互补、互促、互动的良性循环。二是加强作战系统综合集成。所谓综合集成，就是按照一定目的把不同种类、不同性质的系统组合在一起，集中各系统要素，优化体系结构，形成更高级、更智能的人机系统，以实现待定的功能。在推进中国特色军事变革中坚持作战体系综合集成，就是要即重视作战平台的性质和数量，也要重视各种作战平台和作战要素的一体化、集成化。

小学体育田径教学策略探究

“身体是革命的本钱”,祖国的栋梁除了要拥有一颗积极向上,不屈服的心,还要拥有一个强健的体魄。所以,学校在培养学生方面不但要让学生掌握必备知识,推动整个社会的发展进程,而且还要让学生通过体育锻炼拥有一颗健康向上、积极进取的恒心。

水产养殖新品种 牡蛎“华南1号”

第五届全国水产原种和良种审定委员会第三次会议审定通过了白金丰产鲫等12个水产新品种,现予公告。为推广优良品种,提高养殖效率,本刊将分期刊登这些品种的繁殖及养殖技术。一、品种概况1.培育背景牡蛎属于软体动物门,双壳纲,珍珠贝目,牡蛎科,是一种重要的海洋生物资源,为全球性分布类群。牡蛎肉味鲜美、富含多种人体必需氨基酸、微量元素,为世界上最重要的海水养殖经济种类之一。