VEGF相关信号通路在血管新生中的研究进展

组织器官在生理或病理状态下,受到促血管生成因子的刺激,引发生血管新生。VEGF、Notch、Wnt/β-catenin、Ang1(2)/tie2、PI3K-AKT等多个信号通路参与到该过程,对血管新生的各个阶段产生影响。其中VEGF联系众多信号通路,对血管新生整个过程进行调节,发挥了无可替代的作用。近年来国内外对VEGF及相关信号通路调节血管新生机制的研究取得了一定的进展,对多种疾病发病机制的阐明及临床药物的研发提供了新的理论依据。我们总结了近年来相关研究成果,希望为血管新生相关疾病的治疗提供新的可能性。

莫诺苷对局灶性脑缺血再灌注大鼠Wnt7a和APC表达的影响

目的观察莫诺苷对局灶性脑缺血再灌注大鼠Wnt7a和APC表达的影响。方法用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型(MCAO)。将50只Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组,模型组,莫诺苷小、中、大剂量组(30 mg/kg、90mg/kg、270 mg/kg)。利用蛋白免疫印迹法检测Wnt7a和APC表达变化。结果造模7 d,模型组大鼠皮层Wnt7a的表达比假手术组显著升高,APC表达显著下降;与模型组相比,莫诺苷大剂量组Wnt7a表达明显升高;莫诺苷小、中、大剂量组APC的表达显著降低。结论莫诺苷可以促进缺血性脑损伤后Wnt7a表达,抑制APC表达,从而激活Wnt信号通路。

莫诺苷对缺血再灌注大鼠皮层TIMP表达的影响

目的研究莫诺苷对缺血再灌注7 d大鼠皮层中金属基质蛋白酶组织抑制剂(tissue inhibitor of metalloproteinase,TIMP)表达的影响。方法 25只雄性SD大鼠采用改良Zealonga线栓法制备大鼠大脑中动脉阻塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,术后随机分为模型组、莫诺苷小剂量组、中剂量组、大剂量组,每组5只。造模3 h后按30、90、270 mg/kg剂量每天一次灌胃莫诺苷。免疫印迹法(Western Blotting)和免疫荧光染色法(Immunofluorencent staining)分析莫诺苷对脑缺血再灌注7 d大鼠患侧皮层TIMP表达的影响。结果脑缺血再灌注7 d后,与假手术组相比,模型组TIMP蛋白表达显著升高(P<0.01);同模型组相比,莫诺苷中剂量组(90 mg/kg)和大剂量组(270 mg/kg)TIMP蛋白表达均明显升高(P<0.05;P<0.01)。结论莫诺苷可以上调TIMP在大脑皮层内的表达,有助于脑卒中后血脑屏障的保护及修复。

莫诺苷对局灶性脑缺血再灌注大鼠皮层CD_34表达的影响

目的观察莫诺苷对局灶性脑缺血再灌注大鼠皮层CD_(34)表达的影响。方法 45只健康成年雄性Sprague-Dawley大鼠分为假手术组,模型组,莫诺苷小、中、大剂量组,每组9只。线栓法制备大鼠大脑中动脉阻塞30 min后再灌注模型。术后莫诺苷小、中、大剂量组予莫诺苷30 mg/kg、90 mg/kg、270 mg/kg每天灌胃1次。7 d后采用免疫组化(n=6)及Western blotting法(n=3)观察缺血侧皮层CD_(34)表达。结果模型组大鼠患侧皮层CD_(34)表达显著升高,莫诺苷大剂量组较模型组显著升高(F>14.865,P<0.001)。结论莫诺苷可能通过上调局灶性脑缺血再灌注大鼠皮层CD_(34)的表达,促进血管新生。

NP-9莫诺苷促进脑卒中后微循环网络重构作用

目的:脑卒中具有高发病率、高致残率、高死亡率的特点,是严重危害人类生命健康一大疾病,虽然一直以来是临床及基础研究的热点,但目前除溶栓外仍缺乏有效的神经保护治疗手段。脑卒中后梗死周边区域微血管的数目的增多能有效改善区域微循环,改善患者神经功能。寻找促进梗死周边微循环网络重构的有效手段对脑卒中再生修复治疗有重大的意义。莫诺苷是我们课题组从中药山茱萸中提取的中药单体化合物,前期研究表明其具有抗炎、抗氧化、神经营养等特性,能够缩小脑梗死体积,改善神经功能,对于局灶性脑缺血大鼠预后有着积极的影响。本研究拟从多个水平系统评估莫诺苷对血脑屏障重构和微血管功能完整性的作用,并探讨微循环网络重构的可能机制。方法:选取体重在(260~280)g之间的SD雄性大鼠,线栓法制作大鼠大脑中动脉阻塞(Middle cerebral artery occlusion,MCAO)局灶性脑缺血再灌注模型。造模成功者随机分为假手术组、模型组、莫诺苷低剂量组(30 mg·kg-1)、莫诺苷中剂量组(90 mg·kg-1)和莫诺苷高剂量组(270 mg·kg-1)。激光散斑(PSI)进行皮层血流量监测。乳胶灌注取材检测血管数量。给药3天、7天、14天、28天后分别用灌注取脑和新鲜取脑的方式,收集实验标本,运用免疫组织化学法、免疫荧光法以及免疫印迹法检测血脑屏障通透性和血管新生相关指标。结果:①MCAO造模72 h后,大鼠患侧大脑EB染液渗透量增加,表明血脑屏障被破坏。而给予莫诺苷可通过下调梗死半暗带皮层MMP-9和MMP-2的表达,降低患侧皮层IL-1β的水平,进而抑制脑缺血早期血管的通透性。激光散斑仪对大鼠全脑皮层血流量监测结果表明:在缺血水平一致的情况下,莫诺苷给药显著促进大鼠缺血侧大脑血流恢复。乳胶灌注方法检测结果显示,莫诺苷给药能增加梗死侧大脑提供血供的血管数目,尤其有利于末端血管或小血管的生长。②MCAO造模7天后,大脑梗死周边区域,内皮祖细胞激活,血管芽生,特异性表达于芽生血管伪足上的p-FAK表达增加;同时脑缺血刺激引起促血管新生因子Ang-1及其受体Tie-2,以及NRP-1、FGF-2、VEGF等蛋白的表达升高。莫诺苷能进一步激活内皮祖细胞增殖,提高促血管生成因子的表达水平,增加皮层梗死半暗带血管数量,并将血管新生维持到28天。结论:以上结果表明,莫诺苷能减轻脑缺血早期血脑屏障损伤程度,并能够促进后期血管新生及微血管完整性修复,增加皮层梗死区域周边新生血管数量,改善脑卒中后微循环,为脑血管病的再生修复治疗提供基础。

缬芎滴丸对大鼠脑缺血再灌注损伤后血管新生的影响

探讨中药复方缬芎滴丸对大鼠脑缺血再灌注损伤的作用及其在血管新生方面的机制。60只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、缬芎滴丸低剂量(30 mg·kg-1)组、缬芎滴丸高剂量(50 mg·kg^(-1))组和尼莫地平(10mg·kg^(-1))组,线栓法制作大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,缺血30 min再灌注,假手术组大鼠只结扎颈总动脉,不插栓。大鼠清醒后进行第1次神经功能评分,然后对缬芎滴丸低、高剂量组和尼莫地平组大鼠灌胃给药,每次2 m L/只,每天1次,共7天,每次均在同一时间点,同时假手术组和模型组给予等量的蒸馏水。给药7天后对大鼠进行第2次神经功能评分,处死后检测各组大鼠脑梗死体积、梗死周边血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)表达及新生血管数量的情况。结果显示,缬芎滴丸能显著改善大鼠脑缺血再灌注损伤后神经功能,减小脑梗死体积,促进脑梗死周边组织VEGFR2表达和新生血管形成。结果表明,缬芎滴丸对大鼠脑缺血再灌注损伤具有保护作用,其机制可能与促进血管新生有关。