减压性气泡多普勒评级

超声气泡探测法在预测减压病发生风险和减压程序效率及安全性评估中得到广泛应用。目前运用较为广泛的SPENCER气泡评级通过使用多普勒超声监测被检测者心前区气泡信号进行评级;KM评级是基于多普勒超声的适用于计算机处理的评级系统,该评级分数可转化为SPENCER气泡评级的分数,对气泡的分级更精细且适用于运动状态。在上述两种方法的基础上建立的KISMAN综合严重度分值、扩展SPENCER气泡评级和多普勒气泡简化评级系统,不仅将多普勒超声气泡探测结果与其他减压病风险因素协同分析,还便于利用计算机对探测结果进行处理。随着傅里叶技术、经验模式分解等在多普勒音频气泡信号检测中的深入应用,三参量模糊分析和能量算子法等方法在气泡自动分析中仍发挥重要作用。优化检测技术、提高自动分析灵敏度和准确性仍是减压性气泡多普勒评级技术领域发展的重要方向。

功能胰腺β细胞获取与应用的研究进展

胰腺β细胞生成和分泌的胰岛素对维持人体正常血糖起到关键作用,胰岛素分泌不足或利用缺陷将会导致糖尿病(diabetes mellitus,DM)的发生。经典的DM治疗方法包括药物治疗和胰岛移植,新兴的胰腺β细胞替代疗法可以使患者摆脱对药物的依赖并且可以缓解胰岛移植供体缺乏的难题。通过重编程技术或者定向诱导干细胞分化等方法可以获得胰腺β样细胞,相关功能已经在体外细胞和动物体内水平得以验证。有些医院已开展了β细胞替代疗法的临床试验。体外获取具有功能的胰腺β样细胞有望成为临床DM细胞治疗的可靠来源。文中总结了胰腺β细胞主要获取方式,讨论了现有方法存在的问题,为将来获取和应用功能胰腺β细胞提供了思路。

下调SIRT6对肝癌干细胞干性维持的抑制作用

[目的]探讨抑制SIRT6表达在肝癌干细胞干性维持中的作用及潜在机制。[方法]在不同肝癌细胞系中构建肝癌干细胞模型(Lv-Pnanog-GFP),利用流式细胞术分选出不同来源的肝癌干细胞,采用蛋白免疫印迹(Western blot,WB)和免疫细胞化学(immunocytochemistry,ICC)技术检测SIRT6蛋白在肝癌干细胞中的表达水平;构建SIRT6慢病毒短发卡RNA感染载体(shSIRT6)感染肝癌干细胞,采用WB技术检测shSIRT6的干扰效率;采用实时定量反转录聚合酶链反应(real-time PCR)检测抑制SIRT6后肝癌干细胞的干性基因(Nanog、OCT4、CD13、SOX2、EpCAM、CD44)mRNA的表达水平,ICC方法检测EpCAM蛋白的表达水平;采用5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(EdU)试剂盒和细胞增殖活力(CCK8)试剂盒检测抑制SIRT6表达后肝癌干细胞的增殖能力;采用克隆形成和成球实验检测抑制SIRT6后肝癌干细胞的自我更新能力;利用衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)试剂盒检测抑制SIRT6后肝癌干细胞的衰老水平。[结果]WB和ICC检测结果显示,Nanog阳性肝癌干细胞中SIRT6表达水平明显高于Nanog阴性肝癌细胞;real-time PCR检测结果显示,抑制SIRT6后,肝癌干细胞的干性基因(Nanog、OCT4、CD13、SOX2、EpCAM、CD44)mRNA表达水平降低。与real-time PCR结果一致,ICC结果也表明,抑制SIRT6后,干性标志物EpCAM的蛋白表达水平降低(P<0.01)。细胞增殖检测结果进一步显示,抑制SIRT6,肝癌干细胞的增殖水平降低(P<0.05)。克隆形成实验和细胞成球实验结果显示,抑制SIRT6导致肝癌干细胞的克隆形成能力和成球能力一致性降低(P<0.01)。SA-β-Gal活性检测结果显示,抑制SIRT6后,肝癌干细胞的SA-β-Gal活性显著性提高(P<0.01)。[结论]肝癌干细胞高表达SIRT6,通过抑制SIRT6表达可诱导肝癌干细胞发生衰老,导致其干性标志物表达水平下降,增殖能力降低,肝癌干细胞克隆形成和成球能力下降。