五味子乙素通过Wnt/β-catenin信号通路抑制膀胱癌增殖、迁移和侵袭

目的:探讨五味子乙素(schisandra B,SchB)对膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及分子机制。方法:采用不同浓度的五味子乙素溶液(0、20、40、80μmol/L)处理膀胱癌细胞,CCK-8法检测五味子乙素对膀胱癌细胞增殖的影响;Transwell迁移实验和细胞划痕实验检测五味子乙素对膀胱癌细胞迁移的影响;Transwell侵袭实验检测五味子乙素对膀胱癌细胞侵袭能力的影响;Western blot检测细胞内β-catenin、c-myc蛋白表达水平的变化。结果:五味子乙素呈时间和剂量依赖性抑制T24和UM-UC-3细胞的增殖能力(P<0.05)。细胞划痕愈合率、迁移和侵袭细胞数随着五味子乙素浓度增加而降低(P<0.05)。五味子乙素能够下调膀胱癌细胞内β-catenin和c-myc蛋白的表达(P<0.05)。结论:五味子乙素可抑制人膀胱癌T24和UM-UC-3细胞的增殖、迁移和侵袭,抑制Wnt/β-catenin信号通路的激活可能是其发挥抑癌作用的主要机制。

miR-338-5p通过靶向TSHZ3促进膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭

目的探讨miR-338-5p通过靶向TSHZ3调控膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭的机制。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-338-5p在33例膀胱癌组织和癌旁组织中的表达;在膀胱癌T24和UM-UC-3细胞中分别转染mimics-NC、miR-338-5p mimics、inhibitor-NC和miR-338-5p inhibitor,qRT-PCR检测转染效率;采用CCK-8实验检测过表达或者敲低miR-338-5p对膀胱癌细胞增殖能力的影响;Transwell实验检测miR-338-5p对膀胱癌细胞迁移和侵袭能力的影响;TargetScan、miRDB和Targetminer数据库预测miR-338-5p潜在的靶基因,选定靶基因TSHZ3;双萤光素酶报告基因实验和Western blot验证miR-338-5p和TSHZ3的靶向关系;在膀胱癌细胞中共转染miR-338-5p mimics和TSHZ3过表达质粒,通过CCK-8和Transwell实验检测细胞的增殖、迁移和侵袭能力;Western blot检测过表达miR-338-5p或者TSHZ3对Wnt/β-catenin信号通路的影响。结果miR-338-5p在膀胱癌中表达上调(P<0.05);过表达miR-338-5p提高了膀胱癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力(P<0.05),转染miR-338-5p inhibitor则降低了膀胱癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力(P<0.05);生物信息学分析和双萤光素酶报告基因实验表明,miR-338-5p和TSHZ3存在靶向关系;挽救实验表明,同时过表达miR-338-5p和TSHZ3部分消除了过表达miR-338-5p对膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的促进作用(P<0.05);Western blot结果显示,与mimics-NC组比较,过表达miR-338-5p降低了TSHZ3蛋白表达水平,提高了Wnt3a和β-catenin蛋白表达水平(P<0.05);过表达TSHZ3降低了Wnt3a和β-catenin蛋白表达水平(P<0.05)。结论miR-338-5p在膀胱癌中表达上调,通过靶向抑制TSHZ3的表达促进膀胱癌的增殖、迁移和侵袭,该机制可能与激活Wnt/β-catenin信号通路有关。

计算机辅助药物设计和实验验证探讨柴胡皂苷D诱导膀胱癌细胞凋亡的分子机制

目的:通过计算机辅助药物设计及实验验证探讨柴胡皂苷D(SSD)靶向信号转导和转录激活因子3(STAT3)诱导膀胱癌细胞凋亡的作用。方法:通过贝叶斯分类器模型探究SSD的可药性和生物毒性,通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)检索柴胡有效成分SSD的相关信息,通过有机小分子生物活性数据(PubChem)、TCMSP、中药分子机理的生物信息学分析工具(BATMAN-TCM)、Coremine、中医药百科全书(ETCM)和SwissTargetPrediction数据库预测SSD的作用靶点,利用GeneCards、药物靶标数据库(TTD)和在线人类孟德尔遗传(OMIM)数据库预测膀胱癌的潜在治疗靶点,将两者取交集进行基因本体论(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。通过分子对接探究SSD与靶点蛋白结合能力和结构稳定性。使用Cytoscape 3.9.1软件构建STAT3-药物调控网络和STAT3-凋亡调控网络。分别用0、5、10、15μmol·L^(-1)的SSD处理UM-UC-3细胞24 h,采用流式细胞术检测SSD对膀胱癌细胞凋亡的影响,通过蛋白免疫印迹法(Western blot)检测B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、Bcl-2关联死亡启动子(Bad)、STAT3和磷酸化(p)-STAT3蛋白表达水平。结果:贝叶斯分类器模型和分子对接表明,SSD具有较低生物毒性且能与靶点蛋白STAT3良好结合形成稳定蛋白-配体复合物。膀胱癌与SSD之间共有282个交集靶点,其中STAT3为最核心的靶点。GO富集分析结果显示,潜在核心治疗靶点涉及生物学过程3036个、细胞组分82个、分子功能171个。KEGG富集分析结果显示,潜在核心靶点主要与C型凝集素受体信号通路、Toll样受体信号传导途径和细胞凋亡通路有关。STAT3-药物和STAT3-凋亡调控互作网络显示,29种药物与STAT3存在相互作用关系,27个凋亡相关基因与STAT3具有强相关性。流式细胞术显示,与空白组比较,细胞凋亡率随着SSD浓度的增加而增大(P<0.05)。Western blot结果显示,与空白组比较,SSD呈浓度依赖性下调p-STAT3、Bcl-2蛋白水平,明显上调Bax、Bad蛋白水平(P<0.05)。结论:SSD具有良好的可药性和较低的生物学毒性,其可能通过靶向调控STAT3促进膀胱癌细胞凋亡。

医学生医学信息素养现状调查研究

目的了解医学生获取医学专业信息及需求现状,为医学信息素养教育提供参考。方法于2019年7月15日-21日对在校医学生进行网络问卷调查,分析调查对象的基本特征、获取医学信息途径、获取信息能力、对相关教学满意度和培训需求。结果共回收问卷409份,有效问卷409份。调查对象平均年龄为(21±3)岁,女性居多[279例(68.2%)],在读学习阶段以本科为主[290例(70.9%)],专业以临床医学专业居多[187例(45.7%)]。调查对象获取医学信息最常用的途径为教科书(87.8%)和搜索引擎(84.4%)。中文文献数据库中,最常用的是中国知网(67.7%),其次是万方(54.3%);英文文献数据库中,最常用的是PubMed(66.0%),选择使用其他英文数据库的比例均不足1/4。84.8%的调查对象表示在获取信息时访问权限限制是主要问题。在获取医学信息能力自评中,搜索引擎得分最高[(3.21±1.00)分,5分制]。在培训需求方面,文献真实性和准确性评价的需求最高[(4.05±1.07)分,5分制];培训以入学第1~2年间开展为佳(83.9%);专业课程是选择最多的培训形式(86.8%),慕课次之(51.3%)。超过50%的调查对象对4门不同培训课程均表示满意。结论医学生在获取医学专业信息的能力及对课程满意度方面仍有较大的改善空间。