尿素中毒对山羊肾脏氧化应激及铁死亡指标的影响

[目的]本研究旨在探究尿素引起山羊肾脏损伤的病理分子机制。[方法]选择健康无病的简州大耳羊9只,将试验羊随机分为3组:对照组(C组)、5%尿素组(U5组)和10%尿素组(U10组),日粮供给采用粗精料混合饲喂及尿素代替部分豆粕的精料饲喂方式,对照组不加尿素,试验周期为21 d。试验结束后,检测血清血氨含量、肾组织氧化应激指标和铁离子含量,用HE染色和Masson染色观察肾组织病理损伤,透射电镜观察肾小管上皮细胞的超微结构,qPCR检测肾组织铁死亡相关基因mRNA相对转录水平,Western blot检测谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)蛋白表达水平。[结果]与对照组相比,U5组和U10组简州大耳羊丙二醛(MDA)含量极显著上升(P<0.01),谷胱甘肽(GSH)含量和超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性极显著下降(P<0.01),铁离子含量极显著上升(P<0.01),肾小管上皮细胞肿胀、变性、坏死,胶原纤维增生,肾小管上皮细胞线粒体皱缩,膜电子密度增加,膜嵴减少,铁蛋白重链1基因(FTH1)、电压依赖性阴离子通道3基因(VDAC3)、肿瘤抑制基因p53、核受体辅活化子4(NCOA4)基因mRNA表达水平均极显著上升(P<0.01),GPX4 mRNA水平和蛋白表达水平均显著下降(P<0.05)。[结论]添加高剂量尿素导致山羊尿素中毒,NRF2表达受到抑制并启动细胞铁死亡机制,引起肾脏氧化应激和铁离子代谢失衡。

羊源波氏希瓦氏菌的鉴定及其生物学特性

为了探究从川南黑山羊体内分离获得的1株细菌LZS-01的致病性和生物学特性,本试验采用革兰染色、细菌形态观察、生化鉴定、16S rDNA基因序列分析、小鼠致病性试验和药敏试验对其进行研究。结果显示:菌株LZS-01为短杆状革兰阴性菌,16S rDNA基因扩增后得到的DNA片段长度为1 446 bp,与GenBank中波氏希瓦氏菌(Shewanella baltica)的同源性为100%,在系统进化树中与波氏希瓦氏菌(NCTC10737)聚为一支,综上结果推测该菌株为波氏希瓦氏菌;该菌株对小鼠致病性较强,可导致其肺泡壁增厚、肺泡腔狭窄,纤维样物质充满肺泡,肾小管上皮细胞水肿严重、管腔狭窄等;该菌株对环丙沙星、四环素等抗菌药物敏感,对氟苯尼考、青霉素和氧氟沙星等抗菌药物耐药。结果表明,波氏希瓦氏菌对动物具有一定致病性和耐药性。本试验结果为波氏希瓦氏菌感染性疾病的研究和临床防治积累了科学资料。

羊源腐生葡萄球菌的鉴定及生物学特性分析

为鉴定羊源腐生葡萄球菌QJ-01菌株并探讨其生物学特性,进行常规生理生化试验、16 S rDNA基因序列分析、小鼠致病性试验、耐药基因检测以及药敏试验。结果显示,分离菌株QJ-01与腐生葡萄球菌生化特性基本一致,16 S rDNA基因扩增获得长度为1465 bp的片段,与GenBank中腐生葡萄球菌的同源性高达99%,在系统进化树中与腐生葡萄球菌(NR041324)聚为一支,结合生理生化特性和16 S rDNA基因序列分析,鉴定该菌株为腐生葡萄球菌。该菌株对小鼠致病性较强,主要损伤肺、脾等脏器。检测出TEM、aac(6′)-Ⅰb、aac(3)-Ⅱa和Sul2共4种耐药基因;该菌株对头孢唑林、环丙沙星和复方新诺明等12种抗菌药物敏感,对青霉素、克林霉素和多黏菌素E等7种抗菌药物耐药。研究结果为进一步探究该菌的致病性及疫病的防治提供参考依据。

金堂黑山羊传染性脓疱的病理组织学观察和病毒分子检测

为确定四川成都某羊场黑山羊发病的病原并探讨其病理变化特点,本试验观察了患病羊的临床症状及剖检变化,制备了其唇、舌、心脏、肝脏、脾脏、肺脏的病理组织切片,观察其病理变化;并对患病羊的口唇病料样品进行羊传染性脓疱病毒(CEV)F1L基因的PCR检测。剖检结果显示,患病金堂黑山羊口、唇出现大小不等的丘疹、溃疡和脓疱;心包积液、出血;肾脏、脾脏肿大、淤血。病理组织学检查结果显示,病变唇、舌部表皮棘细胞大量增生,棘细胞空泡变性、网状变性、气球样变性,胞浆内可见嗜酸性病毒包涵体;心肌细胞排列紊乱,心肌纤维肿胀,成纤维细胞增多;肝细胞水肿,空泡变性;脾淋巴鞘增厚,血窦扩张、充血;肺泡扩张、破裂,肺泡壁变薄。PCR检测结果显示,患病羊口唇病料样品扩增出大小为230 bp的F1L基因片段;测序后BLAST比对显示,该基因序列与GenBank中登录的羊传染性脓疱病毒F1L基因序列同源性达99%。上述结果表明,该羊场此次发病由CEV感染引起,且CEV主要侵害金堂黑山羊唇、舌部的上皮组织,并且可造成心肌细胞肿胀、肝细胞变性、脾窦充血、肺泡扩张等病理损伤。本试验结果为CEV的诊断与治疗提供了科学依据。

新型冠状病毒肺炎康复门诊建设策略探索

随着当前新型冠状病毒肺炎疫情的防控形势趋于平稳,新型冠状病毒肺炎患者的康复治疗成为当前医疗机构要面临的主要问题之一。湖北省中医院作为全国第一家开设新冠肺炎康复门诊的医院,承担了大量新型冠状病毒肺炎恢复期患者的治疗工作。医院通过设立合理的组织构架,优化诊疗流程,严格落实院感,采取预约就诊制,多学科协作诊疗等措施,为新冠肺炎恢复期患者提供康复治疗服务及健康科普教育,达到促进新型冠状病毒肺炎恢复期患者的身心康复、增加其社会参与度的目的。

土曲霉对小鼠肝氧化损伤及铁死亡相关指标的影响

旨在探究土曲霉引起小鼠肝损伤的机制。将20只昆明小鼠随机分为对照组和试验组,试验组腹腔注射0.3 mL(5×10^(7) CFU·mL^(-1))土曲霉MSF2菌株孢子悬液,试验周期为7 d。采集小鼠肝用丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-PX)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)试剂盒检测肝氧化损伤相关指标;铁检测试剂盒检测肝铁离子含量;制备肝石蜡切片,进行HE染色和普鲁士蓝染色,观察其病理变化及铁沉积;透射电镜观察肝细胞超微结构;qPCR检测肝铁死亡相关基因mRNA相对转录水平。结果表明:土曲霉可引起试验组小鼠肝MDA含量极显著升高(P<0.01),GSH含量、GSH-PX活力和T-SOD活力极显著降低(P<0.01),铁离子含量极显著升高(P<0.01),肝细胞肿胀、坏死,炎性细胞浸润,肝细胞中可见蓝染的铁离子沉积,肝细胞线粒体萎缩、嵴减少和膜密度增加,转铁蛋白1(TFR 1)、二价金属离子转运体1(DMT 1)、铁蛋白重链1(FTH 1)和电压依赖性阴离子通道3(VDAC 3)基因mRNA相对转录水平显著升高(P<0.05),过氧化物酶4(GPX 4)和胱氨酸/谷氨酸转运受体11(SLC 7 A 11)基因mRNA相对转录水平显著降低(P<0.05)。综上表明,土曲霉MSF2菌株致小鼠肝损伤的机制是铁死亡,为深入研究土曲霉的致病机制提供参考资料。

浅析骨质疏松症的中医病名

传统中医学中尚无骨质疏松症(Osteoporosis,OP)的中医病名记载,当代中医对本病病名的认识并无定论。现结合中医与西医对本病的研究及认识浅析骨质疏松症的中医病名,认为骨痿作为OP的病名更有代表性。

微小根毛霉对小鼠的致病性研究

为探究微小根毛霉的致病性,本研究将微小根毛霉孢子悬液以6×107cfu/mL剂量感染昆明小鼠,观察小鼠临床症状和剖检病变,结果显示:感染小鼠出现精神萎靡、弓背、站立不稳等症状,死亡率为20%;剖检发现心肝脾肾肿大、肝脏表面有黄白色结节、肺脏多处出血灶。小鼠感染7 d后眼眶采血分离血清,检测血清生化指标,结果显示:感染小鼠血清中的谷草转氨酶(AST)和碱性磷酸酶(ALP)含量均显著升高(p<0.01),谷丙转氨酶(ALT)含量显著下降(p<0.01),总蛋白(TP)和球蛋白(GLB)含量显著升高(p<0.05),提示感染小鼠肝脏功能受到损伤;尿素(UREA)、尿酸(UA)和肌酐(CREA)含量均显著性增加(p<0.05),提示感染小鼠肾脏生理功能受到损伤。同时剖杀小鼠,制作各脏器的病理切片,光学显微镜下观察,结果显示:感染小鼠心肌中有霉菌侵入,心肌纤维变性;肝细胞肿胀、变性,汇管区有大量炎性细胞聚集;脾组织中可见菌丝和大量的孢子,中性粒细胞增多、淋巴细胞减少;肺泡膈充血、炎性细胞浸润,支气管上皮细胞脱落;肾组织发现少量菌丝,大量肾小管上皮细胞变性、脱落和坏死,肾小球萎缩;小肠组织发现霉菌孢子,黏膜固有层有淋巴细胞浸润。进一步利用透射电镜观察小鼠的肝脏和肾脏的超微组织病理学变化,结果显示:感染小鼠肝细胞肿胀,染色质稀少,线粒体增生、肿胀,胞浆电子密度降低;肾小管上皮细胞体积变小,胞核碎裂,线粒体高度肿胀,嵴断裂且模糊不清,胞浆多处空泡。采用TUNEL染色法染色感染小鼠肝肾组织后于荧光显微镜下观察,结果显示:实验组小鼠大量肝细胞和肾细胞均发生了凋亡。综上所述,微小根毛霉对小鼠具有一定的致病性。本研究首次为阐明微小根毛霉的致病机制提供系统的组织病理学资料。

羊源烟曲霉菌的鉴定及致病性研究

通过形态学和分子生物学鉴定一株源自山羊,疑似烟曲霉(命名为YQM6)的菌株,并研究其致病性和耐药性.PCR扩增其毒力基因,通过小鼠致病性试验和药敏试验探究该分离株特性.试验结果显示,YQM6菌株与GenBank中登录的烟曲霉(MZ150 487)同源性为100%,在系统进化树中与烟曲霉(NR121 481.1)聚为一支.扩增得到601 bp ITS基因片段,检测出小G蛋白(RHO1)、蛋白激酶A调节亚基(PkaR)、过氧化氢酶1(Cat1)、碱性蛋白酶(Alp2)、核糖核酸酶(AspF1)等5个毒力基因.试验小鼠见肝、肾肿大,肺及肠有不同程度的出血,心肌血管充血,肝细胞体积增大、水肿,脾小体淋巴细胞减少,肺毛细血管扩张.该菌株对伊曲康唑、伏立康唑敏感,对卡泊芬净耐药.综上,YQM6菌株被鉴定为烟曲霉,且该菌株具有一定致病性.

羊源绿色气球菌的鉴定及致病性研究

从孕羊流产死胎中分离鉴定菌株AEV001,采用生理生化、16S rDNA基因扩增、动物回归、耐药表型和耐药基因型检测等方法,探究该菌株的生物学特性。结果显示:菌株AEV001为革兰阳性菌,蔗糖、硝酸盐还原和乳糖反应为阳性,木糖苷、蕈糖和蜜二糖等反应为阴性。PCR扩增得到16S rDNA基因片段为1466 bp,系统进化树中菌株AEV001与绿色气球菌聚为一类,从而判断菌株AEV001为绿色气球菌。在该菌株中检出lytA和Fbps 2个毒力基因。试验组小鼠肺脏出现肺泡壁增厚,炎性细胞浸润,肾小管上皮细胞肿胀变性。菌株AEV001检出Sul1、Sul2、aac(6′)-Ⅰb、ant(3″)-Ⅰa和TEM耐药基因,并对诺氟沙星、阿莫西林和氨苄西林等药物敏感,对阿米卡星耐药。研究结果为绿色气球菌感染性疾病的研究积累了科学资料。

初中语文教学中构建情境课堂的方法分享

笔者认为,在落实教学目标方面我们没有“定法”但是却有“适法”。尤其是在我们有了信息技术做支持之后,尤其是在我们有了新的教育理念之后,我们可以发现,课堂中可以发挥教育价值的教育元素越来越多,教师可以快速的生成教学风格,而学生成长的速度也越来越快。在落实初中语文教学目标的过程中,笔者建议,结合学生的实际学情,结合语文学科的优势,我们可以将情境教学法作为“适法”加以运用。而实践证明,它确实在初中语文教学实践中发挥出了极大的优势。本文中笔者就对初中语文教学实践中构建情境课堂的方法进行了分析。

浅谈如何在初中语文教学中培养学生的创新思维

目前,我们所面临的世界是一个科学技术高速发展,充满着竞争与挑战的新时代。还有更多的新领域需要我们去发现、去创造、去发展。所以从某种意义上说:创新就是社会发展的源泉和动力。初中是学生学习能力和学习习惯培养的关键时期,我们只有重视学生创新能力的培养,才会提高他们的综合素养,使他们日后有所突破,有所创新,有所发展。基于此,作为初中语文教师,一定要更新教学理念,创新教学方法,进而提高学生的语文学习能力,实现理想的教学目标。

浅析活血化瘀法在颈型颈椎病治疗当中的应用

探讨颈型颈椎病的病因病机,瘀血阻络是本病的病机关键。内因和外因协同作用,导致瘀血阻滞经络,不通则痛。临床上,围绕活血化瘀法分别采用祛风散寒法、舒筋通络法、补肾填精法能够取得良好的临床疗效。

小议初中语文教学中的问题及解决策略

教师在开展教学活动时,会生成各种教育理想,不过这些理想的实现往往会接受现实的考验。学生在参与学习活动之前也会拥有很多的期待,而这些教育期待会随着教育活动的展开不断地增强或者减弱。在初中语文教学实践中也是如此。即使是有丰富教学经验的专科教师引领学生完成学习任务,教育效果也未必尽如人意。即使学生在其中表现的有序、自律,他们仍然不是主动的学习者。由此可见,在初中语文教学实践中,我们仍然有问题需要发现、解决。本文中笔者就对此进行了分析。

初中语文教学实践中实施德育教育的方法解读

在面对初中学生开展教育教学活动时,笔者认为,语文学科的教育价值最为突出。首先初中学生正处于“心智大开”的时段,他们需要得到教师的支持,需要得到专业化的引领,进而让他们拥有一个积极向上的心态,让他们拥有更为丰富的社会见识。再有,我们需要展现语文学科的魅力,我们需要应用人文性来落实语言性。语文学科对于学生的内外在影响最为深入也最为全面,在优化语文教学时,我们要注意发挥出其“教育价值”。作为初中语文教育者笔者认为,我们要将实施德育教育工作作为主要目标之一。进而让学生拥有大我情怀,拥有社会责任感。本文中笔者就对此进行了分析。

浅谈多媒体下的初中语文作文教学

初中生在学习语文中的作文总是有些困难,觉得作文的学习不像其他学科一样有一定的规律可以遵循。自从出现了多媒体教学手段以后,教师在课堂进行作文教学就容易多了,可以借助多媒体手段观察以往生活中被学生忽略掉的一些细节,也可以通过多媒体动画效果来让学生进行想象,增添学生的写作乐趣,还可以通过多媒体的视频效果来让学生进行观察某一个场面,这种教学方法能够丰富学生的素材,激活学生的思维,调动学生的写作欲望,让学生乐于写作,敢于想象。

运动康复在代谢相关脂肪性肝病中的应用进展

肝脏是人体最大的消化腺,也是最大的腺体,参与人体主要的蛋白质、糖类、脂质的代谢,是体内重要的代谢器官[1]。在命名名称上,肝代谢性疾病,亦或是代谢性肝病这些名称之中,其基本的生理病理和症状并没有显著的差异[2]。在2020年的国际专家共识中代谢相关脂肪性肝病(MAFLD)取代2009年的共识提出的非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)[3],成为影响全球人类健康的慢性肝脏疾病。

关于国有企业内部审计独立性的思考

本文主要对国有企业内部审计工作的独立性进行了研究探讨。文章从保持内部审计工作独立性的意义、影响独立性发挥的主要因素和增强独立性的主要措施三个方面论证了要充分发挥内部审计的职能作用,必须保证内部审计工作的独立性。

分析桥梁预制箱梁临时支座结构设计与施工技术

桥梁的预制箱梁的质量对于桥梁的施工来说非常重要,箱梁在桥梁建设中占有90%的比重,架设方法直接影响了客运专线的建设质量与造价。目前我国中小跨度桥梁的架设方法有四种,本文就移动支架节段拼装法、支架现浇法、整孔预制架设法、移动模架法这四种主要方法进行了一系列的分析比较。利用了江西吉水赣江大桥拱箱梁预制施工技术来分析了桥梁预制箱梁架的简单施工,最后分析了影响预制箱梁质量的主要因素有:施工人员的业务水平以及个人素质、原材料的质量以及施工工艺等。本文也就以上几个影响要素对施工工艺进行了浅略的分析。