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题名食品中沙门氏菌分子检测靶点的筛选与评价
被引量:15
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作者
向雪菲
刘斌
张利达
史贤明
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机构
上海交通大学农业与生物学院食品科学系
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出处
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第7期941-946,共6页
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基金
自然科学基金(30771792)
国家“十一五”科技支撑计划课题(2006BAK02A14)~~
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文摘
【目的】发掘新的沙门氏菌分子检测靶点,筛选检测性能优秀的引物。【方法】利用BLAST程序比较沙门氏菌属内基因组DNA序列的同源性以及沙门氏菌与非沙门氏菌基因组DNA序列之间的特异性,发掘出100多个检测沙门氏菌属的特异性片段,并从中随机挑选出15个片段作为候选靶点,一共设计了27对引物(FS1~FS27),对它们的特异性、灵敏度加以评价,从中筛选检测性能最好的引物。【结果】在27对引物中,检测性能最优的引物为FS23,采用该引物对供试菌株的相应检测靶点进行PCR扩增,44株沙门氏菌都能扩增到一条492bp特异性片段,而22株非沙门氏菌则不能扩增出这一特异性片段。以FS23为引物建立PCR方法检测猪霍乱沙门氏菌基因组DNA的灵敏度为11.9fg/μL,细菌纯培养物灵敏度为4.9×102cfu/mL;用猪霍乱沙门氏菌人工污染牛奶样品,如果接种起始菌量为100cfu/25mL时,只需要增菌5h,采用上述方法即能检测出沙门氏菌。【结论】引物FS23对应的基因序列是一个性能优良的新分子检测靶点,具备很高的特异性和灵敏性,能够广泛应用于食品中沙门氏菌的快速检测。
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关键词
沙门氏菌
PCR
靶点
筛选
评价
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Keywords
Salmonella
PCR
molecular target
primer
screening
evaluation
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分类号
TS207
[轻工技术与工程—食品科学]
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