大剂量胸腺肽治疗慢性乙型肝炎的病理及免疫病理观察

探讨大剂量胸腺肽治疗慢性乙型肝炎的组织病理及免疫病理的变化，为胸腺肽临床治疗提供实验依据。将８ 例治疗前后肝穿组织石蜡包埋连续切片进行ＨＥ染色，ＨＢｓＡｇ，ＨＢｃＡｇ，Ｆａｓ 抗原及ＨＢＶＤＮＡ检测。结果：３ 例炎症活动度有较明显减轻，２ 例炎症活动度部分减轻，组织学改变与临床ＨＢｅＡｇ 阴转，ＨＢＶＤＮＡ阴转一致。提示大剂量胸腺肽治疗慢性乙型肝炎有确切疗效。

PCR和原位杂交检测食管癌组织中人乳头状瘤病毒

目的：探索汕头高发区食管癌的发病是否与HPV感染有关。方法：用L1区共用引物PCR和HPV18DNA探针原位杂交技术对55例新鲜食管瘤标本进行检测。结果：PCR和原位杂交的HPV阳性检出率分别为92．72％和81．80%，癌旁粘膜HPV检出率高于癌组织（P＜0．05）。而且原位杂交提示不同病变杂交信号分布特征不同：癌旁“正常”和单纯增生上皮呈层状分布，原位癌层状分布特征消失，阳性细胞弥散全层，浸润癌呈区域性阳性。结论：HPV感染可能是食管癌的病因之一。

人多聚免疫球蛋白受体转基因鼠的建立

目的构建携带有多聚免疫球蛋白受体(pIgR)的转基因鼠,使其能以近乎自然的状态感染EBV,观察EBV在鼻咽部病变过程中的作用。方法采用角质上皮特异性启动子ED-L2调控的pIgR基因,用显微注射方法将其导入受精卵中,使该基因能在F0代转基因鼠鼻咽部特异性表达。结果PCR检测F0代pIgR基因阳性率达37.5%(6/16),Southern杂交F0代pIgR基因阳性率为12.5%(2/16)。结论表达多聚免疫球蛋白受体的转基因动物有望成为研究EBV病毒致病机制的一种新的动物模型。

高低发区食管癌组织人乳头状瘤病毒的PCR检测

目的：为明确食管癌与ＨＰＶ感染是否有关，我们对比研究了高低发区食管癌组织人乳头状瘤病毒感染情况。方法：采用ＰＣＲ方法，对４３例汕头高发区和４１例广州低发区石蜡包埋食管癌标本进行检测。结果：汕头高发区阳性率为６９．７７％（３０／４３例），而广州低发区仅为２９．２７（１２／４１例），两地区食管癌组织ＨＰＶ感染率明显不同（Ｐ＜０．０５）。结论：ＨＰＶ可能为食管癌的病因之一。

Fas与FasL的相互作用:器官特异性自身免疫病的共同致病机制

器官特异性自身免疫性疾病的特征是特殊类型的细胞加速死亡 ,从而导致特定组织的损伤。虽然引起此反应的各种环境和遗传因素尚不清楚 ,但最近的研究提示 :在器官自身免疫病的组织破坏阶段 ,Fas/FasL的相互作用可能是共同的致病机制。

大剂量胸腺肽治疗慢性乙型肝炎的组织病理及免疫病理观察

目的:探讨用大剂量胸腺肽治疗慢性乙型肝炎的组织病理及免疫病理的变化,为胸腺肽临床治疗提供实用依据。方法:8例治疗前后肝穿组织石蜡包埋连续切片进行HE染色,HBsAg,HBcAg,Fas抗原及HBVDNA检测。结果:3/8例炎症活动度有较明显减轻,2/8例炎症活动度部分减轻,组织学改变与临床HBeAg阴转HBVDAN阴转相一致。结论:大剂量胸腺肽治疗慢性乙型肝炎有确切疗效。

大剂量胸腺肽对乙型病毒性肝炎的治疗作用

本研究选择慢性乙型肝炎（ＣＨＢ）１１０例，分大剂量胸腺肽、干扰素和一般护肝治疗三组。结果表明，大剂量胸腺肽可以促使ＡＬＴ复常，降低血中ＨＢＶＤＮＡ水平，促使ＨＢｅＡｇ和ＨＢＶＤＮＡ阴转，其疗效与干扰素相似，优于一般护肝组，且使用安全，大剂量胸腺肽疗法可作为阻断或抑制ＨＢＶ复制一种新方法。

汕头地区食管癌人乳头状瘤病毒的原位杂交检测

５５例新鲜食管癌冰冻切片用ＩＳＨ检测ＨＰＶ感染状况，４５例阳性，阳性率８１．８％。不同病变ＨＰＶ感染率不同，正常（８７．５０％）和单纯增生（８１．４０％）感染率明显高于原位癌（３８．３９％）和浸润癌（２７．２７％），不典型增生居中（６４．７０％）；而且不同病变ＩＳＨ阳性信号分布特征不同，在正常和单纯增生上皮呈层状分布，表层阳性细胞数多，信号强；原位癌层状分布特征消失，较弥散，浸润癌呈区域性阳性。本实验表明汕头食管癌组织ＨＰＶ感染率高，ＨＰＶ１８可能在该地区食管癌的发病过程中起重要作用。

多聚免疫球蛋白受体与EBV感染上皮细胞

病毒受体决定了病毒对细胞、动物的易感性。EB病毒与鼻咽癌发病关系密切,但EBV进入上皮细胞的机制至今不明。本文对多聚免疫球蛋白受体的结构、功能及其与EBV感染上皮细胞的关系作一综述。

人乳头状瘤病毒感染与食管癌的分子病理学进展

人乳头状瘤病毒感染与食管癌的分子病理学进展汕头大学医学院病理教研室吕丽春，沈忠英人乳头状瘤病毒（ＨｕｍａｎＰａｐｉｌｌｏｍａＶｉｒｕｓ，ＨＰＶ）自１９０７年Ｃｉｕｆｆｏ提出为人类疣的致病因子，几乎整个世纪都有大量的报道。近十余年来的研究表明，ＨＰＶ不...

SPLUNC1基因在人体组织中的表达分布特征

目的探讨人SPLUNC1基因在人体组织中的表达分布特征。方法采用原位杂交方法检测人体37种组织中SPLUNC1基因的细胞学定位。结果原位杂交结果显示:SPLUNC1在上腭、表皮、食管及食管-贲门部的鳞状上皮,鼻咽部、气管、宫颈部化生的鳞状上皮及食管和肺的鳞状细胞癌中均不表达;在胃粘膜、胆囊、空肠、结肠、子宫内膜及腺体和宫颈部的单层柱状上皮细胞中也不表达;主要表达在鼻咽、气管和支气管的假复层纤毛柱状上皮中,且沿呼吸道从上至下,该基因表达逐渐减弱,在肺组织中检测不到其表达。在腮腺、下颌下腺的导管和浆液腺细胞、鼻咽和肺等部位的粘膜下浆液腺细胞、胃粘膜固有层壁细胞及乳腺小叶和导管上皮中表达SPLUNC1,但粘液性腺上皮细胞中不表达。此外,在肺、胃、结肠、乳腺、子宫内膜和宫颈等部位的腺癌组织中,SPLUNC1基因均呈强阳性表达。结论 SPLUNC1基因的表达具有明显的细胞特异性,其表达分布特征可能与细胞功能有关。

转录因子Snail及黏附分子E-cadherin在鼻咽癌中的表达

目的探讨转录因子Snail及黏附分子E-cadherin在鼻咽癌中的表达及意义。方法采用免疫组化SP法并结合组织阵列检测正常鼻咽黏膜、鼻咽癌和鼻咽癌淋巴结转移癌石蜡组织中Snail和E-cadherin的表达,并分析两者与临床病理参数间的关系。结果鼻咽癌组织中E-cadherin表达的阳性率(37.84%)显著低于正常鼻咽黏膜组织(100%)(P<0.001),高于淋巴结转移癌组(0/12)(P<0.05);E-cadherin的表达与鼻咽癌患者临床分期、是否具有远处器官转移密切相关(P<0.05)。鼻咽癌组织中Snail表达阳性率(59.50%)显著高于正常鼻咽组织(36.67%)(P<0.05),低于淋巴结转移癌组(91.67%)(P<0.05),Snail的表达与鼻咽癌患者临床分期、是否具有远处器官转移密切相关(P<0.05)。鼻咽癌组织中Snail和E-cadherin的表达呈负相关(P<0.05)。结论Snail和E-cadherin的异常表达参与了鼻咽癌的发生发展以及侵袭转移过程中。联合检测Snail和E-cadherin对预测鼻咽癌的恶性程度和浸润转移有重要意义。

鼻咽癌来源潜伏膜蛋白1的表达诱发转基因小鼠鼻咽不典型增生

为建立鼻咽癌来源潜伏膜蛋白 1 ( N-L MP1 )转基因小鼠模型 ,从整体的角度研究 N-L MP1的功能 ,进一步阐明 EB病毒在鼻咽癌变过程中的作用 ,应用 DNA重组技术将角质细胞特异性启动子 EDL2与 N-L MP1连接 ,构建转基因 EDL2 -N-L MP1 ;并用显微注射技术 ,将转基因 EDL2 -N-L MP1注射入小鼠受精卵前核 ,再将注射后的受精卵植入假孕母鼠 ,获得转基因鼠 ,然后观察目的基因在鼻咽部的表达和病理变化。本实验共获得 53只转基因鼠 ,PCR法证明其中 6只小鼠有 N-L MP1基因扩增带 ,Southern杂交显示 PCR阳性小鼠有特异的杂交信号 ,整合率为 1 1 .3 % ;1只 4月龄的转基因鼠出现了鼻咽部不典型增生。说明 N-L MP1单独就能诱发小鼠鼻咽部发生癌前病变 ,为 EB病毒可能是鼻咽癌的主要病因提供了有力的证据。

细胞间接触是EB病毒自发感染人类上皮细胞的有效途径

选用产EB病毒的绒猴淋巴细胞B95-8系和补体受体2型(complementreceptor2,CR2)与多聚免疫球蛋白受体(polymericimmunoglobulinreceptor,pIgR)表达阴性的人永生化上皮细胞Hacat系共培养,进行细胞接触感染实验。一周后去除B95-8细胞,仅留Hacat细胞,并以自行改进的方法鉴定前者是否得以彻底去除。在证实没有B95-8残留后,PCR和原位杂交分别检验剩余Hacat细胞中EB病毒的感染结果。实验结果表明:改进的方法能够灵敏和简便地判断B95-8细胞的污染与否,并且与B95-8细胞接触共培养的Hacat细胞能被EB病毒有效地感染,后者暗示了EB病毒对上皮细胞可能存在细胞融合和CR2或pIgR介导之外新的感染途径。本研究在一定程度上简化了前人的细胞接触感染方法,也为建立天然的EB病毒自发有效地感染上皮细胞的模型奠定了基础。

鼻咽癌来源LMP1转基因小鼠的制备

本试验利用显微注射技术，制备鼻咽癌来源ＬＭＰ１基因（Ｎ－ＬＭＰ１）的转基因小鼠。共获得１５只首建鼠，经小鼠尾部组织ＤＮＡ分析，ＰＣＲ法证明其中两只小鼠有Ｎ－ＬＭＰ１基因扩增带，Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交显示ＰＣＲ阳性小鼠有特异的杂交信号，整合率为１３．３％。Ｎ－ＬＭＰ１转基因小鼠的建立为研究Ｎ－ＬＭＰ１在鼻咽癌变过程中的作用机制奠定了基础。

趋化因子受体CXCR4在鼻咽癌中的表达及意义

目的探讨趋化因子受体CXCR4在人鼻咽癌中的表达及临床意义。方法采用Real-time RT-PCR法检测鼻咽癌细胞株中CXCR4mRNA的表达,应用免疫组织化学法并结合组织阵列检测正常鼻咽组织、鼻咽癌和鼻咽癌淋巴结转移石蜡组织标本中CXCR4蛋白的表达情况。结果在7种鼻咽癌细胞株中,CXCR4基因在高成瘤、高转移潜能的5-8F细胞中表达水平最高,在无转移能力的610B细胞中表达最低。CXCR4蛋白在正常鼻咽组织、鼻咽癌和鼻咽癌淋巴结转移组织中表达差异具有统计学意义(P=0.002);鼻咽癌组织中CXCR4表达高于正常鼻咽组(P=0.029);伴发转移的鼻咽癌组织比未发生转移的鼻咽癌组织CXCR4表达增强,差异具有统计学意义(P=0.008);淋巴结转移癌组织CX-CR4表达比鼻咽癌组织高(P=0.013)。结论本研究提示CXCR4表达与鼻咽癌转移存在密切关系,CXCR4表达可作为鼻咽癌转移过程中一个有价值的指标。

转染人pIgR的小鼠鼻咽上皮细胞在EBV感染前后基因表达谱差异

目的应用cDNA阵列技术研究转染人多聚免疫球蛋白受体(hpIgR)的二亚硝基哌嗪(n, n'-dinitrosoperazine, DNP)转化的小鼠鼻咽上皮(TMNE)细胞系在EBV感染前后基因表达谱差异,探索EBV在鼻咽癌发病过程中的作用及鼻咽癌的发病机制。方法提取转染hpIgR 的TMNE细胞在EBV感染前后的总RNA,逆转录成α-32P-dATP标记的cDNA探针,与AtlasTM mouse cancer array 1.2 阵列膜进行杂交。利用AtlasImageTM 软件分析基因表达差异。结果共有25个基因表达水平发生了改变,有23个基因表达上调,2个基因表达下调。结论EBV感染可使转染细胞的多个基因表达发生改变,这些基因可能与鼻咽癌的发生、发展有关。

人鼻咽癌组织中转录因子相关基因的差异表达分析

目的用cDNA微阵列膜比较鼻咽癌组织及正常组织的基因表达谱,研究鼻咽癌组织中转录因子相关基因的差异表达,为进一步探讨差异表达基因的调控机制奠定基础。方法24例鼻咽癌组织总RNA和正常对照总RNA(24例正常鼻咽组织RNA等质量混合)分别经逆转录探针标记与微阵列膜杂交。然后用Pathway4.0软件分析杂交结果,并用RT-PCR反应验证微阵列杂交结果。结果在1625个鼻咽癌差异表达基因中,共有转录因子相关基因35个,12个基因表达上调,23个基因表达下调。结论在鼻咽癌组织中,多个转录因子相关基因的表达水平发生了变化,这些转录因子在鼻咽癌组织的基因表达调控中发挥重要作用。

食管癌癌旁粘膜微乳头状瘤病的研究

Plowight(1895)报告肯尼西部山谷中牛前胃鳞状细胞癌,并发现有食管多发性乳头状瘤病流行,认为乳头状瘤和鳞状上皮癌有关.国内20世纪70年代发现在食管癌高发区家禽和家畜咽或前胃乳头状瘤明显高于低发区,被认为乳头状瘤的发生率和食管癌有关.人外阴,阴道,呼吸道。

HBsAg特异性CTL诱发HBV转基因小鼠肝损伤的实验研究

用ＨＢｓＡｇ特异性细胞毒性Ｔ淋巴细胞（ＣＴＬ）给ＨＢＶ转基因ＩＣＲ小鼠过继性输注，通过肝组织病理学和免疫组化观察，发现其能诱发类似急性肝炎病变，提示抗原特异性ＣＴＬ在ＨＢＶ抗原所引起的宿主细胞免疫应答而导致肝细胞损伤的过程中有作用。