2%辣椒素纳米型水乳剂的研制及其抗虫效果分析

旨在开发一款绿色防控中药材种植中易发的红叶螨的生物农药,以辣椒提取物为原料,通过对6种乳化剂、消泡剂、防冻剂等种类的筛选和用量试验以及考察转相剪切转速,确定辣椒提取物纳米型水乳剂生物农药配方及制备工艺;同时以1.8%阿维菌素为阳性对照评估其抗虫效果。结果表明,单一乳化剂均不能形成稳定水乳剂,EL-40和S-20的乳化效果优于其他乳剂,且二者复配比例为9∶1时,乳化效果最佳,无析水、有少量析油;剪切转速考察发现,转速大于8 000 r/min时,不再析油;Zeta电位及纳米粒径分析仪显示,当剪切转速为9 000 r/min时,水乳剂粒径跨度值最小,为1.48;0.1%的消泡剂和2%的乙二醇可达到理想的消泡和防冻效果。杀虫效果显示,当该产品稀释100倍(6.3μg/mL)时,第4天累计趋避杀灭率达94.9%,显著高于其他稀释组和阳性对照,500倍液与阳性对照效果相当。综上,当生物农药的制备工艺为2%辣椒素稀释液、8%冬青油、2%乙二醇、0.1%消泡剂、10%复配乳化剂(EL-40∶S-20=9∶1)、80%蒸馏水,剪切转速为9 000 r/min时,该产品具有良好的杀灭红叶螨效果。

海拔及采收期对天麻品质的影响

为探究海拔及采收期对天麻品质的影响,本文将天麻种植区分为3个海拔级别(高:1800~2000 m、中:1500~1700 m;低:1200~1300 m),按两批采收,以天麻素、对羟基苯甲醇含量等为评价指标。结果表明,次年1月采收的天麻品质优于当年10月的,且天麻素、游离氨基酸和浸出物含量随海拔增高而显著增加。品质指标间相关性分析表明,天麻素含量与游离氨基酸、浸出物含量呈显著正相关,与总酚含量显著负相关;对羟基苯甲醇含量与总酚含量显著正相关,与浸出物含量显著负相关;浸出物含量与游离氨基酸含量显著正相关。海拔与品质指标间相关性分析表明,海拔与天麻素、游离氨基酸、浸出物含量显著正相关,与对羟基苯甲醇和总酚含量显著负相关。主成分分析显示,所选品质成分可作为天麻品质评价指标,且它们之间存在相关性,适用因子分析法;综合评价得分为高海拔>中海拔>低海拔。综上分析,海拔及采收期对天麻品质有一定的影响,且高海拔种植的天麻品质最佳,为天麻高质高效栽培提供理论支撑。

淫羊藿苷调节成骨细胞骨形成和破骨细胞骨吸收的机制

目的探讨淫羊藿苷(ICA)调节骨形成和骨吸收的机制。方法原代培养大鼠颅骨成骨细胞,茜素红钙化结节染色,加入10-5mol/LICA12、24、36、48h后,用real-time RT-PCR检测骨源性分化的调节基因OSX、Runt相关基因2(Runx-2)、碱性磷酸酶(ALP)、Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)、骨保护素(OPG)和核因子κB受体活化因子配体(RANKL)基因表达,Westernblotting检测OPG、RANKL和Ⅰ型胶原蛋白表达。加入10-5mol/LICA作用10～90min,流式细胞仪测定细胞内钙离子浓度。结果与对照组相比,ICA能明显促进骨形成,表现为OSX、Runx-2、ALP和Collagen Ⅰ基因表达量及Collagen Ⅰ蛋白表达量明显增加(P均<0.01),同时提高细胞内钙离子浓度。ICA也能明显抑制骨吸收,表现为提高OPG及OPG/RANKL基因和蛋白水平的表达量。结论 ICA可能是通过促进OSX、Runx-2、ALP和Collagen Ⅰ基因表达,提高CollagenⅠ蛋白表达量及细胞内钙离子浓度来促进成骨细胞骨形成;并通过促进OPG及OPG、RANKL基因和蛋白水平的表达量来抑制破骨细胞骨吸收。

淫羊藿苷通过OPG/RANKL信号途径调节骨吸收的机理研究

目的探讨淫羊藿苷抑制骨吸收的机理。方法贴壁分离法培养大鼠骨髓基质干细胞,流式检测细胞纯度。加入10-5M淫羊藿苷12 h、24 h、36 h、48 h后用Real-time-RT-PCR检测OPG和RANKL基因表达,Western blotting检测蛋白表达。结果第2代培养细胞的纯度达到95%以上。OPG基因和蛋白表达水平在24 h时明显升高,与对照相比有显著差异。OPG和RANKL的比值显著高于对照组。结论淫羊藿苷主要通过提高OPG及OPG和RANKL的比值来发挥抑制骨吸收的作用。

杜鹃兰假鳞茎发育中内源激素的含量变化

采用ELISA法测定了杜鹃兰新生假鳞茎发育过程中早期新老假鳞茎的4种内源激素(IAA、CTK、GA3和ABA)含量的动态变化。结果表明:在杜鹃兰新生假鳞茎发育过程中新老假鳞茎内源激素含量及比例呈现规律性的变化。新老假鳞茎中IAA含量变化较为复杂,一年生假鳞茎呈先急剧下降后上升再小幅下降的变化,二年生假鳞茎表现出两个峰顶和三个峰谷的变化,三年生假鳞茎则呈先升后降再升再降的变化;CTK含量的变化是一年生假鳞茎呈先急剧下降后小幅上升再下降,二年生和三年生假鳞茎均呈双峰曲线;GA3含量变化表现出一年生假鳞茎先升后降再升再降最后急剧上升,二年生假鳞茎先升后降再升,三年生假鳞茎先降后升再降再升的变化趋势;ABA含量整体呈先升后降的变化;IAA/CTK和IAA/ABA比值的变化几乎都是先下降后呈双峰曲线。

基质类型、插穗部位与植物生长调节剂对景天三七扦插繁殖的影响

【目的】探明基质类型、插穗部位与植物生长调节剂对景天三七扦插繁殖的影响,为景天三七规模化种植提供参考。【方法】采用单因素及正交试验,研究不同扦插基质(纯育苗基质、育苗基质∶蛭石=1∶1和育苗基质∶蛭石∶黄土=1∶1∶1)、插穗部位(上部茎段、中部茎段和下部茎段)、植物生长调节剂种类(吲哚乙酸、萘乙酸和吲哚丁酸)、处理浓度(100 mg/L、200 mg/L和300 mg/L)与浸泡时间(0.5 h、1.5 h和2.5 h)对景天三七扦插繁殖的影响。【结果】景天三七扦插繁殖以下部茎段作插穗最优,其扦插成活率最高,为68.75%,显著高于上部茎段(27.08%),但与中部茎段(54.17%)无显著差异;下部茎段插穗在纯育苗基质上的成活率、株高、茎粗和总生物量最高,分别为68.75%、11.03 cm、5.51 mm和8.27 g,且总生物量较其余2种基质(育苗基质∶蛭石=1∶1和育苗基质∶蛭石∶黄土=1∶1∶1)分别显著提高1.48 g和5.03 g;下部茎段插穗在200 mg/L吲哚乙酸(IAA)浸泡1.5 h后扦插于纯育苗基质中,102 d后其扦插苗存活率最高,为96.50%。【结论】景天三七的最佳扦插繁殖方式为下部茎段用200 mg/L吲哚乙酸(IAA)浸泡1.5 h后扦插至纯育苗基质。

响应曲面法优化钩藤叶中钩藤碱和异钩藤碱的提取条件

以钩藤叶为材料,在干燥温度、提取时间和提取剂浓度3个单因素试验的基础上,采用Box-Behnken中心组合进行3因素3水平试验设计,建立回归方程,优化出钩藤叶中钩藤碱和异钩藤碱的最佳提取条件。模拟得到钩藤叶干燥温度为54.95℃时,钩藤碱和异钩藤碱的最优提取条件为超声时间60 min、甲醇浓度73.35%。在此条件下,钩藤碱的最高提取率为133.342μg·g^(-1),异钩藤碱的最高提取率为429.746μg·g^(-1)。为了方便实际操作,校正条件为干燥温度55℃、超声提取60 min、甲醇浓度73%。通过验证试验得到钩藤碱平均提取率为130.8μg·g^(-1),异钩藤碱平均提取率为425.6μg·g^(-1),与模型预测值较为接近。因此响应曲面法可以对钩藤叶中钩藤碱和异钩藤碱的提取条件进行优化。

人工授粉对杜鹃兰结实率及果实生长的影响

在自然条件下,杜鹃兰(Cremastra appendiculata(D. Don)Makino)结实率低,种子几乎不能萌发,人工辅助授粉是否可以改善杜鹃兰种子质量尚不清楚。为获得优质的杜鹃兰种子,通过疏花程度、授粉时期和授粉方式处理,采用形态学和生理学的比较,探讨了人工辅助授粉对杜鹃兰结实率和种子质量的影响。结果表明:疏花和花朵盛开期进行人工异株异花授粉显著提高结实率,达97.78%;异株异花授粉的种子饱满,有胚率、胚活力及萌发率最高,分别达到93.95%、82.40%和54.95%,且蒴果生长速度快,纵、横径于授粉70 d左右达到峰值;各授粉方式的蒴果体积在授粉120 d左右趋于稳定。因此,适当疏花处理(10~15朵花/株)后于花朵盛开期异株异花授粉可显著提高杜鹃兰结实率和种子质量。

兰科药用植物杜鹃兰的研究进展

杜鹃兰为兰科珍稀药用植物,具有清热解毒、润肺止咳、活血止痛、消肿散结等功效。为杜鹃兰药用植物资源的保护及开发利用提供参考,从物种特性、繁殖方式、化学成分和药理作用等方面对杜鹃兰的研究进展进行归纳总结,对其今后研究方向进行展望。

刺梨风味酸奶的研制及抗氧化活性评价

以黔产刺梨原汁、鲜牛乳为主要原料研制刺梨酸奶,考察刺梨原汁添加量、蔗糖添加量、复合菌添加量及发酵时长对刺梨酸奶感官品质的影响。在单因素试验的基础上,采用正交试验优化刺梨酸奶研制工艺。以优化后的工艺参数制备酸奶,对比发酵前后标志性成分的变化,比较分析刺梨酸奶与原味酸奶(未添加刺梨原汁)的抗氧化活性。结果表明,刺梨酸奶研制的最佳工艺为刺梨原汁添加量7.5%、蔗糖添加量70 mg/mL、发酵时长8 h、复合菌添加量1.0 mg/mL,此工艺制备的刺梨酸奶感官得分为90.67。标志性成分分析表明发酵前后维生素C含量无明显变化(P>0.05),单宁含量降低了68.99%。总抗氧化能力和自由基清除率分析表明,添加7.5%的刺梨原汁能极显著提高原味酸奶的抗氧化作用(P<0.01),说明刺梨风味酸奶具有一定的抗氧化功效。

光照强度对狐臭柴叶片形态与结构的影响

为狐臭柴人工种植技术的构建与开发利用提供依据,采用人工设施栽培方法,研究不同光照条件下狐臭柴叶片的形态和解剖结构。结果表明:在一定光照强度范围内,随着光照强度的增加,叶面积逐渐减小,叶片颜色变浅,叶片上表皮细胞密度和叶脉直径均显著增大;遮光处理下叶片的叶形、叶缘、叶尖、叶质、上表皮细胞形态等指标变化与对照差异明显;遮光处理下叶片总厚度、上表皮厚度、栅栏组织厚度和海绵组织厚度较对照存在极显著差异。叶片下表皮厚度、下表皮细胞形态和下表皮细胞密度受光照强度的影响不大。

钩藤生物碱的组织化学定位研究

利用石蜡切片、组织化学定位及生物碱含量测定技术,研究了钩藤营养器官的组织结构、总生物碱分布及含量。结果表明,钩藤根的次生结构发达,韧皮射线呈明显的喇叭口状;茎中维管射线排列整齐;叶片叶肉细胞分化为栅栏组织和海绵组织,叶脉次生结构不发达;钩是由枝变态发育而来,解剖结构与茎相同。钩藤生物碱的组织化学定位显示,钩藤全株均有生物碱分布,根中主要分布在次生韧皮部及次生木质部,茎和钩中主要分布在韧皮部和木质部及皮层薄壁细胞,叶中主要分布在韧皮部和木质部及叶肉细胞。钩藤生物碱含量以茎最高,根、叶片及钩次之。钩藤营养器官总生物碱的组织化学定位研究,可为该资源的充分开发利用总生物碱奠定理论和技术基础。

金铁锁愈伤组织色素提取条件研究

金铁锁是我国特有的珍稀濒危药用植物,常用于治疗风湿、外伤出血、跌打损伤和胃脘冷痛等。本试验以金铁锁紫红色的愈伤组织为实验材料,先采用单因素试验,分别考查不同提取条件(提取剂、体积分数、时间、温度、p H和料液比)对色素提取效果的影响,再设计正交试验对色素提取的四个条件(体积分数、料液比、时间和温度)进行优化;并且使用紫外-可见分光光度法和高效液相色谱法,通过比较标准品(矢车菊-3-O-葡萄糖苷)及色素提取液的吸收峰及出峰时间,对提取的金铁锁色素进行初步鉴定。结果表明,影响色素提取的因素次序是:料液比>时间>温度>体积分数。金铁锁色素的适宜提取条件为提取剂料液比1∶10(g∶m L)、提取时间20 h、提取温度30℃和2%盐酸-甲醇。并初步鉴定了金铁锁愈伤组织色素的主要色素成分为矢车菊素。

半夏两种愈伤组织结构及细胞壁成分比较

以半夏叶柄为外植体,通过调节植物生长调节物质的配比,诱导获得两种愈伤组织(疏松愈伤组织和致密愈伤组织),结合显微结构观察、化学成分定位和组分含量测定等方法,比较两种愈伤组织的特点。结果表明,2,4-D与6-BA的配比对决定半夏愈伤组织类型起着重要作用。与致密愈伤组织相比,半夏疏松愈伤组织的结构较松散,细胞及胞间间隙较大,细胞壁较薄;疏松愈伤组织中胶层果胶(果胶质的水解产物)含量显著高于致密愈伤组织,致密愈伤组织细胞壁纤维素含量显著高于疏松愈伤组织,且成分定位与含量分析结果一致。

不同叶面肥对狐臭柴叶片生物量和主要生化指标的影响

以三年生狐臭柴为实验材料,设置自然光和遮光两种光照条件,用三种叶面肥进行喷施,分析不同肥料对狐臭柴叶片生物量和主要生化指标的影响。结果表明:喷施氮肥能显著提高狐臭柴叶片生物量,自然光及遮光下分别增加37.30%和15.02%,但果胶的积累减少,分别降低19.78%和17.35%;磷肥能显著提升叶片果胶的含量,分别增加158.08%和239.96%,但叶片生物量显著低于对照,分别降低55.83%和47.40%;复合肥对叶片生物量无明显影响,果胶含量轻微降低。各肥料均使可溶性糖含量降低,且在遮光条件下使叶片内可溶性蛋白含量增加,自然光下使可溶性蛋白含量降低。

朱砂根种胚繁育技术研究

为探明朱砂根种胚离体快繁的适宜培养条件,以不同胚龄朱砂根种子为试验材料,开展朱砂根种胚离体快繁生长成苗调控技术研究。结果表明,朱砂根种胚在1/2 MS培养基中萌发快,培养5 d萌发率达100%,显著高于MS和WPM培养基(p<0.05);种胚萌发率随胚龄增加先升后降;大量元素水平适当减少有利于幼苗生长,于1/4 MS培养基中生长的长势最佳;相关性分析表明,移栽存活率与幼苗根条数呈显著正相关(p<0.05),与幼苗茎粗呈极显著负相关(p<0.01);正交试验结果表明,适宜的蔗糖浓度、基本培养基、植物激素配比,可获得根条数多,且根粗和茎粗适中的朱砂根理想株型,提高移栽成活率。因此,朱砂根种胚繁育技术为:47 d胚龄种胚,接种于1/2 MS培养基中萌发,继代于1/4 MS培养基中生长,于1/2 MS+0.5 mg/L 6-BA+2.5 mg/L NAA+20 g/L蔗糖(pH=5.8)培养基质中壮苗,移栽于质量比为1∶1(育苗基质∶腐殖土)的基质中。

藏药材臭蚤草的生药学研究

目的:对藏药材臭蚤草进行生药学研究,寻找具有鉴别意义的特征。方法:采用性状鉴定、显微鉴定、薄层鉴别和HPLC测定方法,筛选出各类鉴别特征。结果:分别在臭蚤草的基原植物形态、药材性状、显微组织构造和粉末特征以及主要化学成分的定性、定量分析方面获得众多有价值的信息。结论:该研究为臭蚤草基原真实性鉴定和药材质量标准的制订提供了参考依据。

黔产民族药肺筋草的化学成分预试验研究

目的:采用系统预试验法对黔产民族药肺筋草可能含有的化学成分进行初步分析研究。方法:采用化学反应法、色谱法等,对肺筋草水、乙醇、石油醚提取物进行研究,初步判断含有的化学成分类型。结果:黔产民族药肺筋草中可能含有糖及苷类、生物碱类、挥发油类、甾体类、黄酮类、有机酸类、内酯及香豆素类成分。结论:可为肺筋草的化学成分及生物活性研究提供依据。

8-异戊烯基柑橘素抑制骨髓细胞向破骨细胞分化及骨吸收活性

研究8-异戊烯基柑橘素(8-prenylnaringenin,8-PNG)对骨髓细胞向破骨细胞分化及骨吸收活性的影响。从出生24 h内的青紫兰兔四肢骨髓中分离培养破骨细胞,加入8-PNG(1×10 7、1×10 6和1×10 5mol.L 1),以1×10 7mol.L 117β-雌二醇(17β-estradiol,E2)作为阳性对照。培养5天后进行TRAP染色和TRAP活性检测,7天后进行甲苯胺蓝染色和骨吸收陷窝数量与面积的分析。分别于加药后2、4、8、12、24、36及48 h进行AnnexinV染色,观察破骨细胞凋亡情况;于12、24和36 h提取总RNA,用real-time RT-PCR法检测TRAP(tartrate-resistant acid phosphatase)和CTSK(cathepsin K)的基因表达水平。结果显示,8-PNG(1×10 6和1×10 5mol.L 1)组的TRAP染色阳性细胞即破骨细胞数量明显低于空白对照组(P<0.01),但只有8-PNG(1×10 5mol.L 1)组显著低于E2组(P<0.05);TRAP活性的变化呈相同趋势;骨陷窝数和面积的计量结果亦呈相似变化趋势;E2组使破骨细胞的凋亡高峰大大提前,且凋亡数量最多,其次为8-PNG(1×10 5mol.L 1)组,8-PNG(1×10 7mol.L 1)组与空白对照组比较无差异。8-PNG(1×10 7、1×10 6和1×10 5mol.L 1)可显著抑制TRAP和CTSK的基因表达,且呈剂量依赖性。结果表明,8-PNG能抑制骨髓细胞向破骨细胞分化,并能抑制破骨细胞的骨吸收活性,其机制与诱导破骨细胞凋亡和抑制骨吸收关键酶的基因表达与活性有关。

8-异戊烯基柑橘素与柑桔素对体外培养破骨细胞活性影响的比较研究

目的:研究8-异戊烯基柑橘素(8-prenylnaringenin,PNG)和柑桔素(naringenin,NG)影响体外培养破骨细胞活性和凋亡的差异,探讨8-异戊烯基团的生理活性。方法:从青紫兰乳兔四肢长骨中分离出破骨细胞,培养于含10%FBS的α-MEM培养液中,分别加入浓度为1×10-5mol.L-1的PNG和NG。药物干预4 d后进行TRAP染色和TRAP酶活性测定,7 d后进行甲苯胺蓝染色。于加药后48 h内多个时间点进行Annexin V-FITC染色,观察破骨细胞凋亡情况,并提取总RNA,用Real-time RT-PCR法检测TRAP及Cathepsin K(CTSK)的基因表达情况。结果:与对照组相比,PNG和NG组的TRAP阳性细胞即破骨细胞数均显著减少,TRAP酶活性显著降低,形成骨吸收陷窝的数量和面积明显减少,TRAP和CTSK的基因表达水平明显降低。PNG组与NG组相比,以上所有指标均是前者显著低于后者。此外,PNG组的破骨细胞凋亡高峰于加药后12 h到达,而NG组是24 h后到达,且前者的凋亡总数显著高于后者。结论:PNG抑制破骨细胞骨吸收和诱导破骨细胞凋亡的活性明显高于NG。由于两者分子结构的唯一差别在于8-异戊烯基团,因此,8-异戊烯基团可提高黄酮母核的抗骨吸收活性。