哮喘小鼠中髓样抑制细胞及Arg-1、iNOs的表达

目的:探讨哮喘小鼠脾细胞中髓样抑制细胞(MDSCs)两个亚群所占有核细胞比例,以及在小鼠中精氨酸酶-1(Arg-1)和诱导性一氧化氮合酶(iNOs)的表达水平。方法:将6~8周清洁级BALB/c雄性小鼠随机分为对照组(control)和哮喘组(OVA),给予哮喘组OVA致敏和激发,建立哮喘小鼠模型,用PBS代替OVA给予对照组。最后1次激发后24 h内检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数及细胞分类计数;采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定小鼠血清中抗卵清蛋白(OVA)特异性IgE水平;小鼠肺组织HE染色,光镜下观察病理变化;流式细胞术检测小鼠脾细胞中MDSCs两个亚群所占有核细胞比例;用荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测小鼠脾细胞及肺组织中MDSCs产物Arg-1、iNOs mRNA的表达水平;用Western blot方法检测小鼠肺组织中MDSCs产物Arg-1、iNOs蛋白表达。结果:哮喘组小鼠肺部可见明显的炎性细胞浸润,与对照组相比,哮喘组BALF中细胞总数、嗜酸性粒细胞百分比及血清抗OVA特异性IgE明显增高(P<0.05);哮喘组小鼠脾细胞中G-MDSC亚群细胞所占比例明显升高(P<0.001),而M-MDSC亚群无明显变化(P>0.05);哮喘组小鼠脾细胞及肺组织中Arg-1 mRNA表达均增加(P<0.05),而iNOs mRNA表达均减少(P<0.05);哮喘组小鼠肺组织中Arg-1 蛋白表达增加(P<0.05),而iNOs蛋白表达减少(P<0.05)。结论:哮喘组小鼠中的MDSCs,尤其是G-MDSC可能通过产生高水平的Arg-1参与哮喘的发病。