基于3R原则探讨动物实验中人道终点的判定与应用

实验动物人道终点作为3R原则中优化原则的主要体现和应用,已被国际社会所认可并形成了完善的法律法规体系,伴随着我国在实验动物福利伦理方面所取得的巨大进步,实验动物人道终点的实践也得到了较大的应用和发展。通过对动物人道终点的判定原则和方法进行探讨,在最大程度保障动物福利的前提下,有效保证了动物实验数据的真实性、准确性和完整性,为从事动物实验的研究人员提供了一定的参考。

灵芝抗辐射功能的研究

目的 探讨灵芝的抗辐射作用。方法 以 0 2 5 ,0 5 0 ,1 5 0 g/kg体重的灵芝精粉混悬液连续给小鼠灌胃 6 0天 ,在第 30天以射线照射小鼠 ,观察小鼠的白细胞总数、30天存活率、平均存活时间。结果 灵芝精粉能使辐射后小鼠 30天存活率明显增高、平均存活时间延长、白细胞总数明显增加。

济南市青少年日常饮食和体力活动状况

目的了解山东省城市不同类型学校学生日常饮食行为、体力活动及对体重所持的态度,为卫生和教育部门制定青少年健康教育政策提供依据。方法采用中国疾病预防控制中心学校卫生中心制定的学生健康危险行为调查问卷,对山东省不同类型学校3 235名学生进行不记名问卷调查。结果吃早餐的学生不到总体的50%,膳食中油炸食品所占比例较大;甜食摄入女生多于男生,初中生饮用甜饮料多于大学生;能坚持体育锻炼的初中、高中和职专学校学生多于大学和大专学生,男生多于女生;课外学习负担以初中生最为严重;对自己是否肥胖的关注度均为女生明显多于男生,为减肥而控制体重的职专和高中生所占比例较高。结论应尽快建立儿童青少年健康危险行为监测网络,统一指标和评价标准,以便及时发现问题。

山东省居民膳食营养状况调查

目的了解山东省居民膳食营养状况。方法整群随机抽样,用称重法和24h回顾法进行连续3d膳食摄入调查。结果谷类摄入量城市比农村少68.6g,动物性食物摄入量城市比农村多19.7g。能量、蛋白质、脂肪、糖类、维生素C和钠的摄入量城市低于农村,城市和农村比较分别少273.2kcal、3.1g、1.9g、60g、8.1mg、463.6mg。膳食结构仍以谷类食物为主。结论山东省居民膳食营养存在不平衡现象,需要加强营养教育,引导居民合理膳食。

应用于保健食品功能学评价的糖尿病动物模型研究

以不同剂量的四氧嘧啶 (AlloxanAlx)给予不同体重的小鼠尾静脉注射 ,诱发糖尿病动物模型 ,以期筛选一个Alx的最佳剂量及小鼠的最佳体重 ,应用于保健食品功能学评价中。取 2 5 - 2 9g的小鼠 80只 ,禁食 2 4h后分别行、四氧嘧啶尾静脉注射 ,分别于 7d、14d、2 8d禁食 5h后取尾血测血糖值。给予体重 2 5 - 2 9g的小鼠尾静脉注射Al× 4 5mg/kg体重时 ,造模成功率和功物存活率高 ,血糖水平较为稳定。此剂量所诱发的糖尿病动物模型可应用于保健食品的调节血糖功能学实验中。

银耳多糖的急性毒性、遗传毒性和亚慢性毒性研究

目的研究银耳多糖的急性毒性、遗传毒性及亚慢性毒性,为银耳多糖开发利用提供科学数据。方法依据食品安全国家标准,对银耳多糖进行急性经口毒性试验、三项遗传毒性试验和90 d经口毒性试验。结果小鼠急性经口LD50>12.0 g/(kg·bw),属实际无毒级;三项遗传毒性试验结果均为阴性;大鼠90 d经口毒性实验中,各剂量组动物生长发育良好,体重、增重、进食量、食物利用率、血液学、血生化、尿常规、脏器湿重及脏/体比等指标与阴性对照组比较均无显著性差异(P>0.05),组织病理学观察未见与试验因素有关的变化,确定该银耳多糖最大未观察到有害作用剂量(NOAEL)为:雄性动物为7.21 g/(kg·bw),雌性动物为8.18 g/(kg·bw)。结论在本次条件下,银耳多糖未见急性毒性、遗传毒性及亚慢性毒性。

2006年山东省农村垃圾和污水处理状况调查

[目的]了解山东省农村垃圾、污水治理情况,为制定农村垃圾污水治理策略提供依据。[方法]依照按比例分层随机抽样方法,选取29个县(市、区)为调查对象,每个县10个村,每村随机选取10户进行调查。[结果]生活性垃圾的收集堆放的比例远远低于生产性垃圾,生活性污水以随意排放为主,主要排进了河流;生产污水以管道排放为主占62.70%,但排放到处理厂比列仅0.90%。[结论]要改造农村环境卫生,降低传染病的发生,必须建立环境卫生的长效管理机制,注重环境卫生的整体改造建设,各类垃圾的收集与无害化处理以及各类污水的排放与处理等问题都应该引起高度重视。

山东省农村饮水中溶解性总固体变化规律及地理分布特点

目的研究山东省农村饮水中溶解性总固体变化规律及地理分布特点。方法对2014年山东省农村4 838份饮水样品的溶解性总固体变化规律进行相关性分析,对以地下水为水源的4 402份饮用水样品中溶解性总固体含量进行趋势面分析并绘制趋势面等值图。结果溶解性总固体的浓度范围为68～3 216 mg/L,以地下水为水源的饮用水中溶解性总固体超标率高于以地面水为水源的饮用水(χ~2=43.461,P<0.001);东部、中部和西部地区以地下水为水源的饮用水中溶解性总固体含量差异有统计学意义(χ~2=436.53,P<0.001),西部地区高于东部(χ~2=259.74,P<0.001)和中部(χ~2=374.07,P<0.001)地区,东、中部地区间差异无统计学意义(χ~2=6.92,P=0.031);根据三阶趋势面函数绘制的趋势面等值图显示山东省以地下水为水源的饮用水中溶解性总固体含量自西北向东南地区逐步下降。结论山东省农村以地下水为水源的饮用水中溶解性总固体含量分布有明显的地理趋势性。

均衡补充微量元素对高糖饮食大鼠的影响

目的探讨均衡补充微量元素对高糖饮食大鼠的影响,为改善高糖饮食人群身体健康和开发探索安全有效的微量元素补充剂组合提供理论依据。方法选择雄性SPF级Wistar大鼠40只,随机分成空白(Blank)组、微量元素(TE)组、高糖饮食(HSD)组和高糖饮食+微量元素(HSD+TE)组,每组10只。Blank组和TE组给予普通饲料,HSD组和HSD+TE组给予高糖饲料,TE组和HSD+TE组通过灌胃方式给予微量元素混合溶液2mL/(kg·bw),Blank组和HSD组给予生理盐水2mL/(kg·bw),1次/d,连续12周,每周记录大鼠体质量。实验结束后测定大鼠血清微量元素、脾脏T淋巴细胞亚群、血清葡萄糖(GLU)、氧化应激和炎症因子水平。结果与Blank组相比,TE组大鼠血清硼(B)、钒(V)、钴(Co)、锌(Zn)、硒(Se)、锶(Sr)和钼(Mo)元素含量升高(P<0.05),HSD组大鼠体质量升高(P<0.05),血清B、V、铬(Cr)、铁(Fe)、铜(Cu)、Zn和Se元素含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和CD3^(+)CD4^(+)比例降低(P<0.05),血清GLU、丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)含量增加(P<0.05);与HSD组相比,HSD+TE组大鼠体质量降低(P<0.05),血清B、V、Cr、Fe、Cu、Zn、Se、Sr、Mo元素含量和GSH-Px活性提高(P<0.05),血清GLU、MDA、TNF-α、IL-6含量下降(P<0.05)。结论均衡补充微量元素能够有效提高高糖饮食大鼠血清中部分微量元素的含量,缓解氧化应激和炎症反应。

2015年山东省农村饮用水中毒理学指标的暴露水平及地理分布趋势分析

目的 分析山东省农村饮用水中毒理学指标的暴露水平及地理分布趋势.方法 2015年在山东省17市137个县（市、区）中,采取抽签法,每个县随机选取不少于60％乡镇,每个乡镇根据集中式供水单位的情况,选取1～3个集中式供水单位作为调查点,合计选取735个乡镇,农村集中式供水单位1473个,采集出厂水1473份.调查供水单位的水处理工艺、供水人口等数据,进行水质检测,比较不同区域饮用水中毒理学指标含量,绘制超标毒理学指标的趋势面等值图.结果 1473份水样中,毒理学指标的合格率为83.64％（1232份）.影响毒理学指标合格率的是硝酸盐（以N计）和氟化物,氟化物的超标率为5.70％（84份）,暴露人口为1736709名（占4.22％）,硝酸盐（以N计）的水样超标率为12.29％（181份）,暴露人口为1393612名（占3.39％）.东、中、西部3个区域水样中氟化物含量P50分别为0.24、0.29、0.59 mg/L,西部高于东部和中部（P＆lt;0.05）,东、中部间差异无统计学意义（P〉0.05）;东、中、西部3个区域水样中硝酸盐（以N计）含量P50分别为8.00、7.48、2.00 mg/L,东部和中部高于西部（P〈0.05）,东、中部间差异无统计学意义（P〉0.05）.水样硝酸盐（以N计）、氟化物含量趋势面等值图显示,东部地区农村饮用水中硝酸盐（以N计）的含量明显高于西部地区,特别是在东北部地区有一个高峰值区域,且这种高含量的分布沿着对角线向中部地区扩展,而其他区域都处于一个相对较低的范围;西部地区农村饮用水中氟化物的含量明显高于东部地区,在西南、西北地区,均有高峰值出现,其他区域都处于一个相对较低的范围.结论 山东省农村饮用水中的高暴露毒理学指标是硝酸盐（以N计）、氟化物,分布具有明显的地理趋势性.

山东省农村环境卫生与疾病分布区域性分析

目的分析山东省不同农村地区的环境卫生与疾病的现状及区域变化特点,为制定相应的干预和控制措施提供依据。方法2015—2017年,结合山东省地理位置,按东部、中部、西部进行分层,共选取25个县(市),采用抽签的方法在每县随机抽取20个自然村,每自然村随机抽取5户家庭,共500个村2500户,采用统一调查表,通过查阅资料、现场调查、访谈、土壤样品采集、实验室检测等方式收集相关信息。结果调查县无害化卫生厕所普及率为53.34%,东、中、西部的差异有统计学意义(P<0.05),无害化卫生厕所普及率与区域的人均年纯收入呈正相关(r=0.997,P<0.05)。500个村粗死亡率为563/10万,心脏病、恶性肿瘤、脑血管病是死亡的主要原因。垃圾、污水处理厂人口覆盖率平均为58.50%和40.80%,东、中、西部差异有统计学意义(P<0.05)。农村土壤中蛔虫卵检出率为17.20%,东、中、西部差异无统计学意义(P=0.31),活蛔虫卵检出率为5.20%,东、中、西部差异有统计学意义(P<0.05);东、中、西部的蛔虫卵检出率与人均年纯收入呈显著负相关(r=–0.998,P=0.04)。土壤重金属合格率为87.40%,东、中、西部差异有统计学意义(P<0.05),土壤中镉合格率为89.00%,东、中、西部差异有统计学意义(P<0.05)。结论山东省不同地域的农村环境因素和疾病间明显相关,西部地区土壤中活蛔虫卵检出率偏高;东部地区土壤污染的主要因素是镉;应针对不同地域特点采取相应的干预和控制措施。

山东省农村土壤卫生及影响因素调查

目的调查山东省农村土壤卫生现状,分析不同地域农村土壤卫生的特点,提出相应的干预和控制措施。方法于2015年,结合山东省地理位置,按东部、中部、西部进行分层,共选取25个县(市),采用随机方式抽取125个乡镇500个村2 500户,采用统一调查表,开展农村土壤卫生及影响因素调查。结果山东省农村土壤中蛔虫卵的检出率为17.2%;活蛔虫卵的检出率为5.20%,东、中、西部地区分别为4.38%、2.50%、8.33%;活蛔虫卵检出率与其年人均纯收入呈显著线性负相关(P<0.05)。土壤中重金属的合格率为87.40%。有63份土壤样品超过《土壤环境质量标准》(GB 15618—1995)中二级标准,其中,土壤中的铅含量全部达到二级标准,镉含量有55份超出二级标准;铬含量有8份超出二级标准。东部地区土壤重金属含量的内梅罗指数为3.40,呈重污染状态;西部地区土壤重金属含量的内梅罗指数为1.57,呈轻污染状态;中部地区土壤重金属含量的内梅罗指数为0.97,呈尚清洁状态。结论山东省不同地域的农村土壤卫生状况有显著性差异,西部地区土壤中活蛔虫卵检出率明显偏高;应重点治理土壤镉污染。

间歇式供水卫生风险及对农村家庭卫生行为影响的初步研究

目的了解我国农村地区间歇式供水现状及潜在的卫生风险,评价间歇式供水对农村居民家庭饮水和卫生相关行为的影响。方法于2017年8—11月,在山东省和湖北省各选取1个间歇式供水村庄作为研究现场,以临近的社会经济条件类似的2个连续式供水村庄为对照,在每个调查村内随机抽取100户(共计600户)进行入户调查,调查内容包括家庭基本状况、家庭水和环境基础设施、家庭饮水与环境卫生行为等情况。同时收集间歇式供水组和连续供水组的供水单位基本信息、水厂运营情况等信息。结果减少用电量,降低水厂运营成本是农村间歇式供水的主要原因;多数间歇式供水每日供水1~3次,供水时长4~15 h,供水时段多为早中晚等用水高峰期。间歇式供水家庭储水的比例[97.00%(194/200)]高于连续供水组[47.00%(188/400)];间歇式供水家庭在个人卫生、室内卫生和庭院卫生方面低于连续供水组家庭,差异均有统计学意义(P<0.01)。间歇式供水家庭储水设施以屋顶水箱、水桶和水缸为主,其中,有44.64%的家庭屋顶水箱无厂商合格标志,41.53%的家庭储水容器(水桶、水缸)无涉水产品行政许可批件,屋顶水箱和容器洁净的比例较低,分别为17.86%和29.66%。结论农村间歇式供水会引起居民水和卫生相关行为的改变,其中不安全的家庭储水问题最为突出,间歇式供水条件下农村居民的用水安全保障需要引起关注。

2015年山东省农村土壤中蛔虫卵状况调查

目的了解山东省农村土壤中蛔虫卵的现状及相关因素、不同地域的特点,提出相应的干预和控制措施。方法根据课题设计的要求,2015年,结合山东省地理位置,按东部、中部、西南(北)部进行分层,共选取25个县(市),125个乡镇,采用随机方式抽样,500个村,2 500户;采用统一调查表,通过查阅资料、现场调查、访谈、土壤样品采集和实验室检测等收集相关资料。结果山东省农村土壤中蛔虫卵的检出率为17.20%,活蛔虫卵的检出率为5.20%,西南(北)部活蛔虫卵的检出率(8.33%)高于东部(4.38%)和中部(2.50%)(P<0.05);农村集中式供水人口覆盖率为89.46%;未经处理直接供水的占66.94%,西南(北)部未处理的集中式供水比例(71.32%)高于东部(62.15%)和中部(64.63%)(P<0.01)。东部地区的饮用桶装水家庭的比例(13.12%)高于中部(3.88%)、西南(北)地区(0.56%)(P<0.01)。卫生厕所普及率为53.34%,其中东部地区为68.69%,中部为49.94%,西南(北)地区的42.71%(P<0.01);污水处理厂的人口覆盖率为41.43%,其中东部为55.48%,中部为44.24%,西南(北)地区28.54%(P<0.01)。结论山东省农村仍存在引发蛔虫病的潜在风险,未处理的集中式供水比例、饮用桶装水家庭的比例、卫生厕所普及率以及污水处理厂的人口覆盖率可能与山东省农村土壤中蛔虫卵检出率有关。

银耳多糖对SD大鼠的致畸作用

目的探讨银耳多糖(TFP)对SD大鼠是否存在致畸作用,为TFP的安全评价和开发利用提供实验依据。方法制备TFP,按2.5%、5.0%、10.0%(质量分数)掺入基础饲料,确定实际染毒剂量2.03、4.06、8.43 g/kg三个水平。选择成熟SD大鼠300只,其中雄性100只、雌性200只,受孕后将孕鼠分为阴性对照组、15 mg/kg环磷酰胺(CP)阳性对照组、2.03 g/kg TFP组、4.06 g/kg TFP组、8.43 g/kg TFP组,阴性对照组于孕第6~15 d分别给予基础饲料,各剂量组于孕第6~15 d给予相应饲料,CP组于孕第12 d腹腔注射1次15 mg/kg CP。观察孕鼠生长状况,测量受孕第0、6、9、12、15、20 d的体重、增重、子宫连胎重和净增重。于孕第20 d处死孕鼠,剖腹检查母体受孕情况,记录黄体、着床、吸收胎、活胎、死胎数目等。观察胎仔外观、骨骼、内脏畸形情况,计算畸形率。结果TFP各剂量组的孕鼠行为正常,体重稳步增长,未观察到异常表现和流产情况。与阴性对照组比较,TFP各剂量组孕鼠的体重增重等一般指标差异均无统计学意义(P均>0.05);卵巢黄体数、胎仔的着床数和吸收胎、死胎、活胎分布差异均无统计学意义(P均>0.05);胎仔的一般发育情况、各单项的畸胎率、总畸胎率和畸形窝百分率的差异均无统计学意义(P均>0.05)。TFP的未观察到有害作用剂量(NOAEL)为8.43 g/(kg·bw)。结论根据《食品安全国家标准致畸试验》判定,本次研究未观察到TFP对孕鼠的母体毒性、胚胎发育毒性和致畸性。

2,5-己二酮染毒对大鼠坐骨神经睫状神经生长因子表达的影响

目的初步观察2,5-己二酮(HD)染毒大鼠中毒性周围神经病变时坐骨神经中神经细胞粘附因子(CNTF)蛋白与mRNA表达变化,为HD导致的感觉运动型周围神经病变的发生、发展、控制提供理论依据。方法9周龄(体重280~310g)SPF级Wistar雄性大鼠,分为3组,每组23只,经腹腔注射染毒给予HD,低剂量和高剂量组剂量分别为100和300mg/(kg·d),连续8w,每周5次;对照组给予等体积生理盐水。处死各组10只动物并分离坐骨神经,采用免疫组化方法检测CNTF蛋白表达和实时定量PCR方法观察mRNA表达,另取3只分离坐骨神经用于电镜观察。其余30只动物停止染毒、自然恢复8w后取材。结果染毒后高剂量组动物第4w起后肢热痛觉阈值升高,8w后后肢全部瘫痪;低剂量组动物步态异常。电镜观察染毒组动物坐骨神经髓鞘厚薄不均等形态异常。染毒8w时300mg/(kg·d)剂量组中CNTF表达量下降至对照组62.6%(P<0.01);染毒终止、恢复8w后100mg/(kg·d)剂量组升高至176.8%(P<0.01),300mg/(kg·d)剂量组恢复至98.7%(P>0.05)。染毒8w时,300mg/(kg·d)剂量组RNA表达水平降低为0.54倍(P<0.05);恢复8w后100mg/(kg·d)剂量组升高至1.94倍(P<0.05),300mg/(kg·d)恢复至0.95(P>0.05)。结论HD染毒大鼠中毒性周围神经病变时坐骨神经CNTF蛋白和mRNA表达发生变化,CNTF参与了正己烷中毒性周围神经病变发生。

山东某农村间歇式供水系统微生物健康风险评价

[背景]我国农村间歇式供水系统应用普遍,但研究表明间歇式供水会增加水质微生物污染,增加供水覆盖人群健康风险。[目的]了解我国某农村间歇式供水系统微生物污染现状,定量评估该村间歇式供水微生物健康风险。[方法]以山东省淄博市某农村地区一典型间歇式供水系统作为研究对象,选择水源类型和水处理工艺相似的连续供水系统作为对照,分别采集出厂水(各1份)、末梢水(各20个采样点,间歇式供水系统分别在供水瞬间、恢复供水5 min后和恢复供水30 min后采集1份水样,连续供水系统分别在打开水龙头瞬间和放水5 min后采集1份水样)及间歇式供水家庭储水(10个采样点,各采样1份)水样进行微生物指标检测,参照GB 5749—2006《生活饮用水卫生标准》分析水样中微生物超标情况,并对两种不同供水系统的不同类型水样中微生物含量的差异性进行比较。以总大肠菌群为致病微生物的指示菌,采用微生物定量风险评价方法评价个体不同暴露情况下的饮水致病微生物年感染风险概率,并采用蒙特卡罗模拟法进行不确定性分析。[结果]两种供水系统出厂水水样中微生物指标均合格。间歇式供水末梢水水样中菌落总数超标率为48.3%(29/60),总大肠菌群超标率为23.3%(14/60),家庭储水水样中两种微生物超标率分别为80.0%(8/10)和50.0%(5/10);连续供水末梢水水样中两种微生物的超标率分别为40.0%(16/40)和20.0%(8/40)。间歇式供水末梢水恢复供水瞬间采集的水样中总大肠菌群含量(对数中位数为2.11 lg CFU·100 mL^(-1))高于连续供水末梢水打开水龙头瞬间采集的水样(对数中位数为0.30 lg CFU·100 mL^(-1))(P <0.05);间歇式供水末梢水恢复供水30 min后采集的水样中菌落总数(对数均数为2.04 lg CFU·mL^(-1))高于连续供水末梢水放水5 min后水样(对数均数为1.62 lg CFU·mL^(-1))(P <0.05)。家庭储水水样中菌落总数(对数均数为3.20 lg CFU·mL^(-1))高于两种供水系统的末梢水水样(P <0.05);储水水样中总大肠菌群含量(对数中位数为1.52 lg CFU·100 mL^(-1))高于间歇式供水末梢水恢复供水30 min后水样(P <0.05)。经蒙特卡罗模拟,间歇式供水系统覆盖人群中个体感染致病微生物的年风险概率的M(P5-P95)为47.67×10^(-4)(0-1 392.46×10^(-4)),连续供水系统为4.85×10^(-4)(0-182.37×10^(-4)),差异具有统计学意义(P <0.05)。[结论]本研究结果显示该地间歇式供水系统较连续供水系统增加了人群微生物暴露与感染的风险。