β肌球蛋白重链基因Arg249Gln突变导致家族性肥厚型心肌病基因型与表型分析

目的筛查家族性肥厚型心肌病(HCM)致病突变基因,分析基因型与临床表型相关性。方法采用全外显子测序技术对一HCM家系先证者编码肌节蛋白的8个致病基因进行分析,利用Sanger测序法对发现的突变位点在该家系的14名家庭成员及307名健康对照者中进行验证。结果遗传筛查发现先证者携带β肌球蛋白重链(MYH7)基因c.746G>A(Arg249Gln)突变。家系中4人携带该突变,3人确诊为HCM,携带者均有严重的临床表型,2人因HCM发生猝死。在307名健康对照者中没有检出MYH7基因Arg249Gln突变。结论MYH7基因Arg249Gln突变可能是导致该家系家族性HCM的恶性突变,该突变携带者临床表型较严重。

肥厚型心肌病MYH7基因Arg143Gln的突变分析

目的:筛查肥厚型心肌病(HCM)致病基因突变位点并解析该突变的特点和临床症状,以期为HCM的基因诊断和治疗提供理论支持。方法:采集患者家系的血液样本并收集其临床资料,对先证者采取全外显子组测序方法,利用Sanger测序法对先证者的致病突变位点在家系及307名正常对照组人群中验证,结合文献报道,通过同源性比对和多种生物信息学方法分析该突变的致病性。结果:全外显子组测序发现先证者携带β肌球蛋白重链基因(MYH7) c.G428A突变,该家庭中3人携带该突变,2人被诊断为HCM,表现出HCM特征性临床表现,其他家人及对照组人群均未发现上述突变。不同物种同源性比对提示该位点的所编码的第146位氨基酸具有高度保守性,不同生物信息学方法分析该突变位点是有害突变。结论:MYH7基因c.G428A是有害突变,发病患者可能会表现出严重临床表现,具有致病性。

丙泊酚抑制GRP78/PERK/CHOP通路改善PE诱导H9C2细胞凋亡的研究

目的:研究丙泊酚对苯肾上腺素(phenylephrine, PE)诱导H9C2心肌细胞的影响及机制。方法:H9C2细胞均分为5组,PE诱导细胞凋亡模型,用0.5,1,1.5 mmol·L^(-1)丙泊酚预处理。采用流式细胞术检测凋亡率;RT-qPCR检测GRP78/PERK/CHOP通路的mRNA表达;蛋白质印迹检测GRP78/PERK/CHOP通路蛋白、caspase-12、caspsae-3、SERCA2a的表达;定磷法检测SERCA2a活性。结果:PE诱导心肌细胞凋亡率升高,GRP78/PERK/CHOP通路mRNA及蛋白表达升高,caspase-12、caspsae-3表达升高,SERCA2a蛋白表达及活性降低,差异有统计学意义(P均<0.05)。中、高浓度的丙泊酚可明显逆转PE诱导的上述指标变化,且差异有统计学意义(P均<0.05)。结论:丙泊酚通过恢复SERCA2a的活性及表达量、抑制GRP78/PERK/CHOP通路,降低PE诱导的心肌细胞凋亡。