期刊文献+
共找到74篇文章
< 1 2 4 >
每页显示 20 50 100
基于核心素养的小学数学大单元整体教学策略探究
1
作者 吕小婷 《教师》 2024年第6期60-62,共3页
文章基于核心素养这一视角,探讨了小学数学大单元整体教学的策略,通过阐述大单元整体教学的涵义,强调大单元整体教学能够帮助学生将数学知识应用到实际问题中,培养学生解决问题的能力,同时,文章对小学数学大单元整体教学的现存问题进行... 文章基于核心素养这一视角,探讨了小学数学大单元整体教学的策略,通过阐述大单元整体教学的涵义,强调大单元整体教学能够帮助学生将数学知识应用到实际问题中,培养学生解决问题的能力,同时,文章对小学数学大单元整体教学的现存问题进行了分析,并基于这些问题提出了一系列的教学策略,使小学大单元整体教学更贴近学生的需求,更注重对学生核心素养的培养。 展开更多
关键词 核心素养 小学数学 大单元整体教学
下载PDF
一种体外扩增γδT细胞的新方法 被引量:6
2
作者 吕小婷 刘军权 +5 位作者 周忠海 陈玲 张娟 张颂 黄菲 陈复兴 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期739-742,747,共5页
目的:建立一种新的γδT细胞扩增方法。方法:从健康人外周血中分离外周血单个核细胞(PBMCs),与用唑来膦酸预处理过的未成熟DCs按10:1混合,在含IL-2 400 U/ml和10%小牛血清的RPMI1640培养基中培养,用MTT法测定细胞增殖倍数。用流式细胞... 目的:建立一种新的γδT细胞扩增方法。方法:从健康人外周血中分离外周血单个核细胞(PBMCs),与用唑来膦酸预处理过的未成熟DCs按10:1混合,在含IL-2 400 U/ml和10%小牛血清的RPMI1640培养基中培养,用MTT法测定细胞增殖倍数。用流式细胞仪对γδT细胞进行表型分析并检测其细胞内的颗粒酶B、穿孔素和CD107a含量。用乳酸脱氢酶释放法(LDH)检测细胞杀伤活性。结果:经唑来膦酸预处理的树突状细胞与自身外周血单个核细胞共培养,到11天时γδT细胞增殖倍数达到(120±15)倍,第8天和11天γδT细胞百分率分别达到70.26%±3.56%、90.11%±4.67%。γδT细胞细胞内颗粒酶B、穿孔素及CD107a在第8天时分别为81.66%±4.32%、86.62%±5.21%和80.12%±3.78%,均高于对照组。培养的γδT细胞对SGC-7901、SW-1990、SW-480肿瘤细胞株杀伤活性至第8天时达到峰值。结论:此法能有效诱导γδT细胞体外扩增,培养的γδT细胞颗粒酶B、穿孔素及CD107a均显著高于对照组,并有较强的抗肿瘤活性。 展开更多
关键词 树突状细胞 唑来膦酸 ΓΔT细胞 免疫治疗
下载PDF
存储局域网(SAN)在地质调查数据存储中的应用 被引量:5
3
作者 吕小婷 施艳 张振芳 《地质通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1531-1536,共6页
对中国地质调查局数据存储原有状况和存在的问题进行总结,在对数据存储技术进行分析的基础上,详细论述了基于SAN结构的地质调查存储系统的技术方案,包括基础结构,软、硬件配置等内容。系统满足了各项业务对数据的高可用性、数据存储的... 对中国地质调查局数据存储原有状况和存在的问题进行总结,在对数据存储技术进行分析的基础上,详细论述了基于SAN结构的地质调查存储系统的技术方案,包括基础结构,软、硬件配置等内容。系统满足了各项业务对数据的高可用性、数据存储的可靠性、数据的安全性日益增高的需求。系统运行后,取得了较为满意的应用效果。 展开更多
关键词 存储局域网络 地质调查 数据存储 数据备份
下载PDF
中国地质调查局国际互联网门户网站现状与加强建设的思考 被引量:3
4
作者 吕小婷 郎宝平 《地质通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期1473-1478,共6页
通过将中国地调局网站与美国地调局网站,在网站的用户、结构、内容、在线技术、信息政策等方面进行对比,分析了中国地调局网站建设中存在的不足,提出了加强网站规划、优化网站结构、建设网站集群、统一网站形象等改进建议,以期对今后网... 通过将中国地调局网站与美国地调局网站,在网站的用户、结构、内容、在线技术、信息政策等方面进行对比,分析了中国地调局网站建设中存在的不足,提出了加强网站规划、优化网站结构、建设网站集群、统一网站形象等改进建议,以期对今后网站建设能有一定的帮助。 展开更多
关键词 门户网站 网站建设 信息服务 中国地质调查局
下载PDF
放疗联合自身免疫细胞治疗宫颈癌的临床疗效 被引量:11
5
作者 朱月华 刘军权 +5 位作者 曹卉 陈惠萍 陈复兴 陈玲 张颂 吕小婷 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期421-427,共7页
目的:比较自身免疫细胞联合放疗与单纯放疗后宫颈癌患者的细胞免疫功能变化和生存期差异。方法:68例宫颈癌患者,放疗组38例,联合治疗组30例;分离患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PB-MC),分别诱导培养CD3 AK细胞... 目的:比较自身免疫细胞联合放疗与单纯放疗后宫颈癌患者的细胞免疫功能变化和生存期差异。方法:68例宫颈癌患者,放疗组38例,联合治疗组30例;分离患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PB-MC),分别诱导培养CD3 AK细胞、CIK细胞(cytokine-induced killer cell)、树突状细胞(dendritic cell,DC)、γδT细胞和NK细胞。流式细胞术检测治疗前后患者外周血CD3+、CD4+、CD8+、CD19+、CD16+CD56+和γδT细胞的比例和数量及PBMC中穿孔素、颗粒酶B和CD107a阳性表达率。对患者进行5年随访。结果:联合治疗组大多患者生活质量均有改善,联合组卡氏评分高于放疗组(P<0.05)。联合组治疗后患者的免疫细胞绝对值显著高于放疗组(P<0.05);PBMC的穿孔素、颗粒酶及CD107 a均高于治疗前(P<0.05),并显著高于放疗组(P<0.05)。联合治疗组中,患者(Ⅰb-Ⅳ期)1、2和5年总生存率分别为93.3%(28/30)、83.3%(25/30)和76.6%(23/30),明显高于放疗组的86.82%(33/38)、68.4%(26/38)和57.9%(22/38)(P<0.05);以Ⅱb和Ⅲ期患者疗效最显著。结论:放疗联合自身免疫细胞治疗宫颈癌能提高患者的免疫功能,并延长生存期。 展开更多
关键词 宫颈癌 过继免疫治疗 放射治疗 免疫功能 免疫细胞
下载PDF
人外周血γδT细胞CD107a的表达变化与细胞毒活性的关系 被引量:9
6
作者 周忠海 陈复兴 +4 位作者 吕小婷 张娟 孙蕾清 张磊 黄菲 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期301-305,共5页
目的:探讨人外周血γδT细胞体外诱导过程中CD107a的表达变化及其与γδT细胞细胞毒活性的关系。方法:分离健康人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs),加入含有IL-2和异戊烯焦磷酸(isopentenyl pyro-phosp... 目的:探讨人外周血γδT细胞体外诱导过程中CD107a的表达变化及其与γδT细胞细胞毒活性的关系。方法:分离健康人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs),加入含有IL-2和异戊烯焦磷酸(isopentenyl pyro-phosphate,IPP)的培养基,体外诱导γδT细胞。分别在第7、10、14天以流式细胞仪对培养的γδT细胞进行鉴定,并同时检测其CD107a、穿孔素和颗粒酶B的表达。CCK-8试剂盒检测γδT细胞对胰腺癌细胞SW-1990的杀伤效应。采用SPSS13.0软件进行spearman相关分析。结果:在培养的第7、10、14天,γδTCR阳性细胞分别为(60.31±3.84)%、(66.45±4.25)%、(70.99±4.66)%。CD107a、穿孔素和颗粒酶B的表达在γδT细胞培养第710天达到峰值后呈下降趋势,第7天与第0天相比差异有统计学意义[(80.66±4.42)%、(70.11±3.34)%、(94.26±4.25)%vs(69.02±5.04)%、(62.31±4.66)%、(53.62±3.69)%,P〈0.05]。培养第7天、第10天的γδT细胞对SW-1990细胞杀伤率显著高于第14天的γδT细胞[(58.86±5.12)%、(61.53±4.69)%vs(40.31±4.83)%,P〈0.05]。γδT细胞CD107a表达与穿孔素、颗粒酶B、其对SW-1990细胞杀伤效应显著相关(r=0.853,r=0.785,r=0.839,均P〈0.01)。结论:人外周血γδT细胞CD107a的表达与其抗肿瘤能力正相关,可能是γδT细胞细胞毒活性的一个标志。 展开更多
关键词 ΓΔT细胞 CD107a 胰腺肿瘤 细胞毒作用 穿孔素 颗粒酶B
下载PDF
汉黄芩素对人NK细胞杀伤胃癌MKN45细胞的影响及其机制研究 被引量:19
7
作者 许琳 王营 +3 位作者 陈复兴 刘军权 吕小婷 陈永强 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期804-808,共5页
目的探讨汉黄芩素对人NK细胞杀伤胃癌MKN45细胞的影响及作用机制。方法淋巴细胞分离液分离外周血单个核细胞(PBMC),在体外经rhIL-2诱导培养NK细胞;不同浓度的汉黄芩素分别作用于NK细胞24 h、48 h及72 h后CCK8法检测NK细胞增殖情况;不... 目的探讨汉黄芩素对人NK细胞杀伤胃癌MKN45细胞的影响及作用机制。方法淋巴细胞分离液分离外周血单个核细胞(PBMC),在体外经rhIL-2诱导培养NK细胞;不同浓度的汉黄芩素分别作用于NK细胞24 h、48 h及72 h后CCK8法检测NK细胞增殖情况;不同浓度汉黄芩素作用NK细胞48 h后:流式细胞术(FCM)检测NK细胞GraB、IFN-γ、PFP、CD107a的表达;Western blot检测NK细胞p-Akt、β-catenin、Bcl-2、p-ERK的表达;乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测NK细胞对胃癌细胞株MKN45的杀伤活性。结果 0.2~50μg/ml的汉黄芩素作用NK细胞24 h、48 h及72 h后,NK细胞的增殖率增高;同一质量浓度汉黄芩素作用48 h后的NK细胞的增殖率最高且在12.5μg/ml时达最高峰;汉黄芩素3.1~12.5μg/ml作用NK细胞48 h后:NK细胞的GraB、IFN-γ、PFP、CD107a表达增加、NK细胞的p-Akt、β-catenin表达增加、NK细胞对胃癌MKN45细胞的杀伤活性增高。结论汉黄芩素能够促进NK细胞的增殖,其促进NK细胞的增殖可能与Wnt信号传导通路及PI3K/Akt信号通路有关;汉黄芩素增加NK细胞对胃癌细胞的杀伤活性可能与汉黄芩素上调NK细胞GraB、PFP、IFN-γ及CD107a的表达有关。 展开更多
关键词 汉黄芩素 NK细胞 杀伤活性 免疫治疗
下载PDF
多种活化因子共刺激对人外周血单个核细胞体外增殖和表型的影响 被引量:11
8
作者 刘军权 朱云 +7 位作者 陈复兴 张南征 吕小婷 周忠海 张娟 张颂 陶征中 李昳 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期367-370,共4页
目的:观察多种活化因子共刺激后对人外周血淋巴细胞增殖和表型的影响。方法:用淋巴细胞分离液分离人外周血单个核细胞(PBMC),根据加入刺激因子(CD3 mAb、CD28 mAb、IFN-γ、IL-1α、IL-2、IL-15和IL-21)种类和方法不同将实验分为7组。... 目的:观察多种活化因子共刺激后对人外周血淋巴细胞增殖和表型的影响。方法:用淋巴细胞分离液分离人外周血单个核细胞(PBMC),根据加入刺激因子(CD3 mAb、CD28 mAb、IFN-γ、IL-1α、IL-2、IL-15和IL-21)种类和方法不同将实验分为7组。用全自动五分类血液分析仪计数不同细胞因子诱导培养的PBMC增殖力、流式细胞术测定诱导后共刺激细胞表面CD3,CD4,CD8,CD28,CD16、CD56+CD16,CD3+CD8+,CD3+CD4+,CD3+CD56+,CD45RO等分子的变化、乳酸脱氢酶释放法测定诱导后的共刺激细胞对SGC-7901、SW-1990和SW-116细胞株的杀伤活性。结果:在PB-MC培养体系中加入不同的刺激因子其细胞增殖能力有明显的差异,以含刺激因子CD3、CD28、IFN-γ、IL-2、IL-1α、IL-15和IL-21组增殖倍数最高,在培养第10 d时该组的增殖倍数为255.3 6.3,明显高于仅含CD3、IFN-γ和IL-2培养体系组(166.6 5.5)(P<0.05)。在PBMC培养体系中加入不同的刺激因子其部分细胞表面标志有所差异,在培养体系中无IL-15时CD16+CD56+(NK细胞)细胞和CD3+CD56+细胞比例明显高于其他组;CD45RO+的记忆性T细胞以延迟3 d添加IL-15和IL-21组升高最明显。经不同活化因子刺激培养10 d的PBMC对SGC-7901、SW-1990和SW-1116细胞杀伤活性有明显差异,以延迟3 d添加IL-15和IL-21组最高(分别为76.2%、60.3%和70.6%),明显高于仅含CD3、IFN-γ和IL-2培养体系的细胞组(分别为54.9%、44.6%和50.4%)(P<0.05)。培养的细胞对胃腺癌细胞SGC-7901杀伤活性最强。结论:不同刺激因子活化的PBMC其增殖能力、表面标记和杀伤活性有明显差异,在培养体系中增加相应的刺激因子对细胞定向培养有一定价值。 展开更多
关键词 共刺激 单个核细胞 增殖 T淋巴细胞表型 杀伤活性
下载PDF
不同刺激因子对人CIK细胞功能影响 被引量:12
9
作者 刘军权 朱云 +7 位作者 陈复兴 周燏 姬会春 杨宛莹 吕小婷 张颂 陶征中 李昳 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期1021-1026,共6页
本研究观察不同的细胞刺激因子共刺激对人CIK细胞增殖和功能的影响。用淋巴细胞分离液分离人外周血单个核细胞(PBMNC),按常规方法从PBMNC培养细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK细胞),然后根据加入CD28 mAb、IL-15和IL-21将实验分为5组:对照组(... 本研究观察不同的细胞刺激因子共刺激对人CIK细胞增殖和功能的影响。用淋巴细胞分离液分离人外周血单个核细胞(PBMNC),按常规方法从PBMNC培养细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK细胞),然后根据加入CD28 mAb、IL-15和IL-21将实验分为5组:对照组(CIK),CB28+IL-15+IL-21组,IL-15+IL-21组,CD28+IL-15组和CD28+IL-21组。用全自动五分类血液分析仪计数CIK细胞的增殖能力;用流式细胞术测定细胞刺激因子诱导的CIK细胞的粒酶B(granzyme B),穿孔蛋白(perforin)和CD107α等分子的变化;用ELISA法检测细胞因子IL-10、IL-12、INF-γ和TNF-α的含量;乳酸脱氢酶释放法测定细胞刺激因子共刺激的细胞对人肺癌细胞株A549(A549)、乳腺癌细胞株MFC-7(MFC-7)和人黑素瘤细胞株HME1(HME1)的杀伤活性。结果表明,在CIK细胞培养体系中加入不同的刺激因子,细胞增殖能力有明显的差异,以含CD28、IL-15和IL-21组细胞增殖倍数最高,在培养第10日时该组的增殖倍数为255.3±6.3,明显高于对照组,IL-21+IL-15组和CD28+IL-21组细胞增殖倍数分别为166.6±13.5、199.4±15.0和228.8±16.6(P<0.05),添加CD28和IL-15组则穿孔蛋白含量明显高于其他组。所有共刺激组的穿孔蛋白、粒酶B和CD107a表达百分率均明显高于对照组(P<0.05)。对A549、MFC-7和HME1细胞杀伤活性以含CD28+IL-15组最高(82.2%、59.3%和70.6%),明显高于对照组(60.9%、49.6%和48.4%)(P<0.05)。在CIK细胞培养体系中增加CD28+IL-15+IL-21组中细胞分泌IFN-γ量显著高于其他各组(P<0.05)。结论:不同刺激因子活化的CIK细胞的增殖能力、分泌细胞因子和杀伤活性有明显差异,在培养体系中增加相应的细胞刺激因子对细胞功能定向培养有一定意义。 展开更多
关键词 共刺激 CIK细胞 细胞因子 杀伤活性
下载PDF
根皮素对人γδT细胞杀伤胃癌SGC-7901细胞的影响及机制探讨 被引量:9
10
作者 刘刚 陈复兴 +2 位作者 刘军权 吕小婷 费素娟 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期602-606,615,共6页
目的:探讨根皮素对人γδT细胞杀伤胃癌SGC-7901细胞的影响及其机制。方法:IPP法扩增人外周血γδT细胞,不同浓度的根皮素作用于γδT细胞及胃癌SGC-7901细胞48小时后,MTT法检测γδT细胞及SGC-7901细胞的生长曲线,FCM检测γδT细胞PF... 目的:探讨根皮素对人γδT细胞杀伤胃癌SGC-7901细胞的影响及其机制。方法:IPP法扩增人外周血γδT细胞,不同浓度的根皮素作用于γδT细胞及胃癌SGC-7901细胞48小时后,MTT法检测γδT细胞及SGC-7901细胞的生长曲线,FCM检测γδT细胞PFP及GraB的表达;LDH释放法检测γδT细胞对SGC-7901细胞的杀伤活性;Western blot检测γδT细胞中Wnt3a的表达情况。结果:IPP作用10天后,γδT细胞比例由3.12%增加到79.6%。与对照组比较,浓度2.3518.75μg/ml的根皮素作用后γδT细胞的增殖率显著提高(P〈0.05),75μg/ml根皮素对SGC-7901细胞生长抑制率显著提高(P〈0.05),且2.3575μg/ml根皮素作用后的γδT细胞对SGC-7901细胞的杀伤活性明显增强(P〈0.05),γδT细胞中PFP、GraB及Wnt3a的表达较对照组显著增加(P〈0.05)。结论:根皮素能够增强γδT细胞对SGC-7901细胞的杀伤作用,其机制可能与根皮素促进γδT细胞的增殖,提高γδT细胞PFP、GraB表达及活化Wnt信号通路有关。 展开更多
关键词 根皮素 ΓΔT细胞 胃癌 杀伤活性
下载PDF
白藜芦醇抑制结肠癌干细胞增殖并增强MICA/B的表达 被引量:12
11
作者 杨君 刘军权 +1 位作者 吕小婷 费素娟 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期889-893,共5页
目的研究白藜芦醇(Res)对结肠癌干细胞(CCSC)增殖、凋亡和免疫原性的影响。方法采用无血清培养法由HCT116结肠癌细胞诱导培养CCSC,通过检测CCSC标志物CD133、CD44进行鉴定。MTT法检测Res对CCSC增殖的影响;annexinⅤ-FITC/PI双染色结合... 目的研究白藜芦醇(Res)对结肠癌干细胞(CCSC)增殖、凋亡和免疫原性的影响。方法采用无血清培养法由HCT116结肠癌细胞诱导培养CCSC,通过检测CCSC标志物CD133、CD44进行鉴定。MTT法检测Res对CCSC增殖的影响;annexinⅤ-FITC/PI双染色结合流式细胞术检测Res对CCSC凋亡的影响;流式细胞术检测Res对CCSC生长周期及主要组织相容性复合体Ⅰ类分子相关链A/B(MICA/B)表达的影响。结果 HCT116细胞在无血清培养下成球生长。球形细胞中CD133+细胞占91.07%±1.79%,CD44+细胞占90.33%±1.78%。与对照组相比,Res能明显抑制CCSC增殖,并且呈时间、剂量依赖性;Res作用48 h后,CCSC细胞周期G0/G1期比例显著升高,S期下降,呈剂量依赖性;随着药物浓度增加,CCSC的凋亡率增加,MICA/B的表达增强。结论从HCT116结肠癌细胞成功诱导培养出CCSC,Res能剂量依赖性地抑制CCSC的增殖,与阻滞细胞于G0/G1期,并诱导细胞凋亡有关;Res能增强CCSC中MICA/B的表达,增强其免疫原性。 展开更多
关键词 白藜芦醇 结肠癌干细胞 凋亡 细胞周期 主要组织相容性复合体I类分子相关链A/B(MICA/B)
下载PDF
糖原合酶激酶-3β抑制剂TWS119对γδT细胞增殖及表型的影响 被引量:7
12
作者 陈永强 郑璐 +6 位作者 刘军权 吕小婷 周燏 陈玲 徐晶 周忠海 陈复兴 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期748-752,共5页
目的:观察糖原合酶激酶-3β抑制剂4,6-二取代吡咯并嘧啶(TWS119)对γδT细胞增殖和表型的影响。方法:从健康人外周血中分离单个核细胞,加入到γδT细胞完全培养基培养,分别于第1天和第8天时,加入TWS119(0~8.0μmol/L)诱导培养。... 目的:观察糖原合酶激酶-3β抑制剂4,6-二取代吡咯并嘧啶(TWS119)对γδT细胞增殖和表型的影响。方法:从健康人外周血中分离单个核细胞,加入到γδT细胞完全培养基培养,分别于第1天和第8天时,加入TWS119(0~8.0μmol/L)诱导培养。培养到12 d后,用CCK-8法测定γδT细胞增殖能力;用流式细胞术检测γδT细胞纯度、CD45RA和CD62L的表达。结果:TWS119能够活化γδT细胞Wnt/β-catenin信号通路。在第1天加入TWS119诱导培养组中,随着TWS119浓度的增加,γδT细胞表面CD45RA和CD62L的阳性表达率逐渐升高,而对细胞的增殖及纯度呈抑制作用。在第8天加入TWS119诱导培养组中,TWS119能剂量依赖性促进CD62L的表达而对CD45RA表达无影响,同时在一定浓度范围能促进γδT细胞的增殖和提高纯度的作用。结论:TWS119在一定浓度范围内能促进γδT细胞增殖和提高γδT细胞纯度,并能活化γδT细胞Wnt/β-catenin信号通获得CD45RA+CD62L+γδT细胞和CD62L+γδT细胞。 展开更多
关键词 TWS119 ΓΔT细胞 细胞增殖 表型
下载PDF
3种不同抗凝剂对外周血培养的NK细胞功能影响 被引量:5
13
作者 陈玲 吕小婷 +2 位作者 徐涛 周忠海 姚仁南 《生物医学工程与临床》 CAS 2018年第5期572-577,共6页
目的探讨外周血经3种不同抗凝剂处理后培养的自然杀伤(NK)细胞的增殖率和杀伤功能的影响研究。方法采集10例年龄(35±5)岁健康志愿者15 m L外周血,分别置于含乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2,EDTA组)、细胞保存液(细胞保存液组)和肝素钠(... 目的探讨外周血经3种不同抗凝剂处理后培养的自然杀伤(NK)细胞的增殖率和杀伤功能的影响研究。方法采集10例年龄(35±5)岁健康志愿者15 m L外周血,分别置于含乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2,EDTA组)、细胞保存液(细胞保存液组)和肝素钠(肝素钠组)的抗凝管中。用淋巴细胞分离液收集单个核细胞,在NK细胞培养液中培养单个核细胞12 d,并观察细胞生长情况。在第4、6、8、10、12天时,收集细胞用CCK8法检测NK细胞的增殖情况。在细胞增殖最明显的第12天收集细胞,通过流式细胞仪检测各组NK细胞的颗粒酶、穿孔素和CD107a。台盼蓝染色检测细胞活性。通过CCK8法检测各组对肿瘤细胞株K562杀伤活性。结果通过细胞增殖发现,EDTA组NK细胞增殖不明显,肝素钠组和细胞保存液组增殖明显。第12天时检测发现,肝素钠组增殖倍数为128.15±6.38,细胞保存液组增殖倍数为107.51±5.70;肝素钠组优于细胞保存液组(t=6.20,P=0.00)。肝素钠组NK细胞纯度表达为(84.49±2.35)%,也明显高于细胞保存液组NK细胞表达[(77.63±1.37)%]。经台盼蓝染色检测,肝素钠组和细胞保存液组细胞活性率均为100%。通过流式细胞仪检测发现,肝素钠组NK细胞颗粒酶B、穿孔素和CD107a的表达都明显高于细胞保存液组(t=12.76、17.76、5.67,P=0.00、0.00、0.00)。对肿瘤细胞株K562杀伤结果显示,肝素钠组NK细胞杀伤活性(50.12%±3.42%)明显高于细胞保存液组(41.88%±2.47%)(t=4.78,P=0.001)。结论肝素钠和细胞保存液均可用于NK细胞培养的血液抗凝,但肝素钠组NK细胞的杀伤功能明显优于细胞保存液组。 展开更多
关键词 抗凝剂 NK细胞 细胞增殖 杀伤功能 乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2) 细胞保存液 肝素钠
下载PDF
AR-A014418对γδT细胞增殖、凋亡及杀伤功能的影响 被引量:4
14
作者 郑璐 孙蕾清 +6 位作者 陈复兴 周遹 吕小婷 陈玲 李莹 周忠海 陈永强 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期20-24,共5页
目的:观察糖原合酶激酶-3β(GSK-3β)选择性抑制剂AR-A014418对体外扩增的γδT细胞的细胞活性包括增殖、凋亡和杀伤功能的影响。方法:采用人淋巴细胞分离液分离健康人外周血中单个核细胞,在γδT细胞完全培养基中培养获得γδT细胞。... 目的:观察糖原合酶激酶-3β(GSK-3β)选择性抑制剂AR-A014418对体外扩增的γδT细胞的细胞活性包括增殖、凋亡和杀伤功能的影响。方法:采用人淋巴细胞分离液分离健康人外周血中单个核细胞,在γδT细胞完全培养基中培养获得γδT细胞。用不同浓度的AR-A014418诱导培养γδT细胞72 h后,用流式细胞术检测各诱导处理组γδT细胞的增殖、凋亡和杀伤能力;用Western blot检测γδT细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和Caspase-3表达情况。结果:AR-A014418浓度在0. 3~10μmol/L时能促进γδT细胞的增殖并抑制其凋亡。同时促凋亡蛋白Cleaved caspase-3和Bax表达逐渐减弱,而抗凋亡蛋白Bcl-2表达逐渐增强。尤其是在3μmol/L时,γδT细胞增殖活性最强,而且体外杀伤人肝癌HepG2细胞和人胃癌SGC-7901细胞活性也显著提高。结论:GSK-3β抑制剂AR-A014418在3μmol/L浓度时,可以抑制体外扩增γδT细胞的凋亡,并能增强其体外增殖和杀伤肿瘤活性,提示AR-A014418具有一定的免疫调节功能,为今后用于体外扩增γδT细胞提供实验依据。 展开更多
关键词 AR-A014418 ΓΔT细胞 增殖 凋亡 杀伤功能
下载PDF
羽扇豆醇对胰腺癌细胞株SW1990及γδT细胞生长的影响 被引量:7
15
作者 罗冠琴 朱炳喜 +3 位作者 陈复兴 刘军权 黄菲 吕小婷 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2011年第28期2958-2962,共5页
目的:探讨羽扇豆醇对人胰腺癌细胞SW1990及γδT细胞生长的影响.方法:采用本实验室体外扩增人外周血γδT细胞,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同浓度的羽扇豆醇在不同时间段对人γδT细胞和人胰腺癌细胞SW1990生长的影响.本实验分3组:... 目的:探讨羽扇豆醇对人胰腺癌细胞SW1990及γδT细胞生长的影响.方法:采用本实验室体外扩增人外周血γδT细胞,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同浓度的羽扇豆醇在不同时间段对人γδT细胞和人胰腺癌细胞SW1990生长的影响.本实验分3组:空白对照组、溶剂对照组和实验组,时间段分24、48、72h组.结果:羽扇豆醇浓度在0.4-200μg/mL时羽扇豆醇对人胰腺癌细胞SW1990在24、48、72h各组与空白对照组和溶剂对照组相比差异有统计学意义(P<0.05).而24、48、72h3组比较差异无统计学意义.γδT细胞培养7d从扩增前的3.61%增加到80.2%,羽扇豆醇对γδT细胞在24、48、72h随浓度的增加先增值后抑制作用.24h与空白对照组和溶剂对照组比较差异无统计学意义.48、72h各组与空白对照组和溶剂对照组相比差异有统计学意义(P<0.05).结论:羽扇豆醇对人胰腺癌细胞SW1990有抑制作用,对γδT细胞随着浓度增加有先促进后抑制作用. 展开更多
关键词 羽扇豆醇 胰腺癌细胞SW1990 ΓΔT细胞
下载PDF
糖原合酶激酶3β抑制剂TWS119激活NK细胞Wnt/β-catenin信号通路促进CD62L表达 被引量:3
16
作者 陈永强 郑璐 +6 位作者 刘军权 周忠海 吕小婷 张娟 张颂 孙蕾清 陈复兴 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期44-48,共5页
目的探讨糖原合酶激酶3β抑制剂4,6-二取代吡咯并嘧啶(TWS119)调控Wnt/β-catenin信号通路对NK细胞增殖和表型的影响。方法分离健康人外周血单个核细胞(PBMC),加入到含重组人IL-2和人AB血清的NK细胞完全培养基中诱导培养,获得NK细... 目的探讨糖原合酶激酶3β抑制剂4,6-二取代吡咯并嘧啶(TWS119)调控Wnt/β-catenin信号通路对NK细胞增殖和表型的影响。方法分离健康人外周血单个核细胞(PBMC),加入到含重组人IL-2和人AB血清的NK细胞完全培养基中诱导培养,获得NK细胞。(0~8.0)μmol/L TWS119处理NK细胞72 h,Western blot法检测NK细胞β-catenin的表达、CCK-8法测定NK细胞增殖能力;流式细胞术检测各组NK细胞CD107a和CD62L(L-选择素)的表达。结果培养10 d后的NK细胞纯度达到(61.76±3.74)%;TWS119能够活化NK细胞Wnt/β-catenin信号通路。(0~2.0)μmol/L TWS119处理NK细胞,能显著促进NK细胞增殖,浓度大于2.0μmol/L时增殖率逐渐降低。(0~8.0)μmol/L TWS119处理NK细胞,CD62L的阳性表达率逐渐升高,且呈剂量依赖性;与之相反,CD107a阳性表达率逐渐下降。结论 TWS119活化NK细胞Wnt/β-catenin信号通路可获得早期成熟的CD62L+NK细胞。 展开更多
关键词 Wnt/β-catenin信号 NK细胞 TWS119 表型
下载PDF
—80℃短期冻存对NK细胞功能及杀伤活性的实验研究 被引量:2
17
作者 吕小婷 周忠海 +3 位作者 陈玲 陈复兴 周熵 李洪春 《徐州医科大学学报》 CAS 2018年第11期706-710,共5页
目的探讨一80℃短期冻存不同时间对NK细胞功能及杀伤活性的影响。方法采集和分离健康人外周血单个核细胞,在体外培养扩增NK细胞,扩增12d后将部分NK细胞于一80%冻存1、4、12、24周。用流式细胞仪分别检测冻存前后NK细胞的表型、凋亡百分... 目的探讨一80℃短期冻存不同时间对NK细胞功能及杀伤活性的影响。方法采集和分离健康人外周血单个核细胞,在体外培养扩增NK细胞,扩增12d后将部分NK细胞于一80%冻存1、4、12、24周。用流式细胞仪分别检测冻存前后NK细胞的表型、凋亡百分率、穿孔素、颗粒酶B及CDl07a的表达;用LDH法检测并比较冻存前后的NK细胞对食管癌细胞株的杀伤活性。结果一80Y:冻存1、4、12周的NK细胞与未冻存的NK细胞比较表型、凋亡百分率、穿孔素、颗粒酶B、CDl07a表达及对食管癌的杀伤活性,差异无统计学意义(P>0.05)。而冻存24周的NK细胞与未冻存的NK细胞比较表型、凋亡百分率、穿孔素、颗粒酶B、CDl07a表达及对食管癌的杀伤活性,差异均有统计学意义(P<O.05)。结论一80'E冻存NK细胞12周以内对细胞的功能及杀伤活性没有影响。 展开更多
关键词 NK细胞 冻存 杀伤活性
下载PDF
地勘单位适应国家事业单位分类改革的实践与思考 被引量:6
18
作者 张润丽 姚震 吕小婷 《中国矿业》 北大核心 2016年第S2期62-65,114,共5页
地勘单位是国家事业单位的重要组成部分,地勘单位分类改革的推进将对地质工作的改革与发展产生深刻的影响。本文论述了国家事业单位改革的进程及近年最新举措,分析了地勘单位分类改革的总体情况,并对典型省份地勘单位的改革实践情况进... 地勘单位是国家事业单位的重要组成部分,地勘单位分类改革的推进将对地质工作的改革与发展产生深刻的影响。本文论述了国家事业单位改革的进程及近年最新举措,分析了地勘单位分类改革的总体情况,并对典型省份地勘单位的改革实践情况进行了总结,最后提出地勘单位分类改革推进过程中的思考与建议。 展开更多
关键词 地勘单位 分类改革 实践 思考
下载PDF
α-Thujone增强CD3AK细胞增殖及杀伤功能 被引量:2
19
作者 周燏 刘军权 +4 位作者 周忠海 吕小婷 张颂 张娟 陈复兴 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期222-225,共4页
目的:研究α-Thujone对CD3AK细胞增殖及杀伤功能的影响。方法:从人外周血来源的PBMC按常规方法培养成CD3AK细胞,用不同浓度的α-Thujone处理CD3AK细胞,CCK-8法检测CD3AK细胞增殖及其对K562、SW480、HO8910三株肿瘤细胞的杀伤情况。FCM... 目的:研究α-Thujone对CD3AK细胞增殖及杀伤功能的影响。方法:从人外周血来源的PBMC按常规方法培养成CD3AK细胞,用不同浓度的α-Thujone处理CD3AK细胞,CCK-8法检测CD3AK细胞增殖及其对K562、SW480、HO8910三株肿瘤细胞的杀伤情况。FCM检测经α-Thujone处理后CD3+CD8+T细胞上CD107a的表达。结果:α-Thujone能显著促进CD3AK细胞的增殖,表现出一定的浓度依赖性。α-Thujone还能促进细胞CD107a的表达和对多种肿瘤细胞的杀伤活性。结论:α-Thujone能促进CD3AK细胞增殖并增强其细胞毒性。 展开更多
关键词 α-Thujone CD3AK CD107a 细胞毒性
下载PDF
Gardiquimod增强人γδT细胞杀伤肿瘤细胞的研究 被引量:2
20
作者 周燏 刘军权 +5 位作者 周忠海 吕小婷 陈玲 孙蕾清 李昳 陈复兴 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期653-656,共4页
目的研究Toll样受体7激动剂(Gardiquimod)对人γδT细胞杀伤肿瘤作用的影响。方法以异戊烯焦磷酸法扩增人外周血γδT细胞。用不同浓度的Gardiquimod处理γδT细胞和肺癌细胞A549,MTT法检测细胞增殖情况。LDH法检测Gardiquimod处理后... 目的研究Toll样受体7激动剂(Gardiquimod)对人γδT细胞杀伤肿瘤作用的影响。方法以异戊烯焦磷酸法扩增人外周血γδT细胞。用不同浓度的Gardiquimod处理γδT细胞和肺癌细胞A549,MTT法检测细胞增殖情况。LDH法检测Gardiquimod处理后γδT细胞对A549的杀伤活性;流式细胞术检测处理前后γδT细胞上CD107a、穿孔素和颗粒酶的表达情况。结果 Gardiquimod在5.0~0.31μg/ml浓度可明显促进γδT细胞增殖,同时抑制A549增殖。Gardiquimod处理γδT细胞后,杀伤A549能力明显增强,且CD107a、颗粒酶及穿孔素的表达显著升高,与对照组相比,有统计学差异(P〈0.05)。结论 Gardiquimod通过增高γδT细胞上的CD107a、颗粒酶及穿孔素的表达来增强其杀伤肿瘤作用。 展开更多
关键词 Gardiquimod ΓΔT细胞 肺癌细胞A549 杀伤肿瘤
下载PDF
上一页 1 2 4 下一页 到第
使用帮助 返回顶部