重组HIV-1腺病毒载体活疫苗的冻干保护剂研究

目的研制重组HIV-1腺病毒载体活疫苗的冻干保护剂。方法在重组HIV-1腺病毒载体活疫苗中加入不同配比的保护剂,在适宜条件下制备成冻干剂型。根据冻干后外观、病毒滴度和热稳定性试验等结果,筛选出冻干保护剂的最适配方。结果以人血白蛋白、海藻糖、甘露醇、右旋糖苷和蔗糖等成分按比例配伍制备的保护剂,对重组HIV-1腺病毒载体活疫苗显示了较好的保护作用。冻干前后疫苗病毒感染性滴度下降在0.17LogCC ID50/ml以内;37℃放置1周,滴度下降0.3LogCC ID50/ml左右;37℃放置3周后,滴度下降约为0.6LogCC ID50/ml。而无保护剂的液体疫苗对照于37℃放置1周,滴度下降近2.5个LogCC ID50/ml。结论以人血白蛋白、海藻糖、甘露醇、右旋糖苷和蔗糖等配伍而制备的保护剂效果较好。

鹿骨保健食品原料的工艺研究

以鹿骨初酶解产物为研究对象,以水解度为特征性指标,采用甲醛滴定法检测酶解进程,分析对比不同酶解条件对样品水解度的影响,确定了碱性蛋白酶和胰蛋白酶分步水解为最佳酶解条件。结果:采用碱性蛋白酶和胰蛋白酶分步水解的最佳,条件为酶底比1∶200和1∶240,料液比为1∶40,起始pH值为9.0,碱性蛋白酶45℃酶解1.5h后,加入胰蛋白酶37℃下酶解2h,水解度为21.37%。

HIV-1 gagpol重组腺病毒疫苗的构建及其免疫原性的研究

目的:构建HIV-1重组腺病毒疫苗并初步鉴定其免疫原性。方法:用Adeno-X Expression System试剂盒将HIV-1 gagpol基因片段插入到腺病毒载体上,通过脂质体介导将获得的重组腺病毒质粒Adeno-X-gagpol转染至293细胞,使之自主包装成有感染活性的重组腺病毒rAd-gagpol,用western-blotting法鉴定其表达情况;用CsCl密度梯度离心法纯化该重组腺病毒,以5×108pfu/mL的滴度1 mL单次免疫小鼠,15天后测小鼠体液免疫效果。结果:克隆序列与设计相符,重组腺病毒疫苗能稳定表达gagpol蛋白,体液免疫中检测出抗p55和p24的特异性抗体。结论:HIV-1 gagpol重组腺病毒构建成功,具有一定的体液免疫原性。