脂肽类生物表面活性剂的研究进展

脂肽是由微生物代谢产生的一类具有很强表面活性的生物表面活性剂 ,在医药、食品、化妆品和微生物采油等方面有良好的应用潜力。本文对脂肽的生产、分离。

脂肽的分离纯化与结构研究

采用酸沉淀分离、有机溶剂提取、分级沉淀、脱色吸附及制备薄板的方法,从枯草芽孢杆菌HSO121的培养液中分离得到一种脂肽类化合物。茚三酮试验、红外光谱分析表明该脂肽具有环状结构,电喷雾离子化质谱结果显示,该脂肽是分子量为1022D和1036D的两个同系物,氨基酸分析及串联质谱分析表明,脂肽的肽链结构为Leu-Leu-AspValLeu-Leu-Glu,说明它是Surfactin的结构类似物。

半边旗中黄酮成分的分离鉴定与抗氧化活性研究

半边旗干燥的全草经粉碎后,以80%乙醇回流萃取得浸膏,浸膏再用石油醚、氯仿和乙酸乙酯依次抽提,将乙酸乙酯抽提物减压蒸干得到半边旗黄酮样品。样品经薄板层析、化学显色反应及紫外光谱分析,初步鉴定了其中的黄酮物质成分;样品经液相色谱-质谱联用分析,进一步确证了半边旗黄酮中含有芹菜素、木犀草素和木犀草素葡萄糖苷。样品用Na2S2O3-I2滴定试验考察发现其具有良好的抗氧化活性。

一种脂肽类生物表面活性剂产生菌的筛选

从油田地层水中筛选分离得到1株能够产生表面活性剂的细菌,经鉴定为枯草芽孢杆菌。分析了该菌株的生理形态和生长特性,以及该菌株代谢产生的生物表面活性剂的性质。薄层色谱与原位水解显色和红外光谱分析表明,培养后菌株代谢产生的生物表面活性为脂肽。它能使水的表面张力降低到26mN/m,其临界胶束浓度为0.025mg/mL。

HPLC法同时测定炎菌清搽剂中水杨酸、醋酸曲安奈德和利福平的含量

目的:建立高效液相色谱法同时测定炎菌清搽剂中水杨酸、醋酸曲安奈德、利福平的含量。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱为 Hypersil C_8(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相为甲醇-乙腈-0.075 mol·L^(-1)磷酸二氢钾溶液-1.0 mol·L^(-1)枸橼酸溶液(30:30:26:4),流速0.8 mL·min^(-1),检测波长254 nm,柱温30℃。结果:水杨酸、醋酸曲安奈德、利福平的线性范围分别是:202.24～2022.4 μg·mL^(-1)(r=0.9991),5.2～52 μg·mL^(-1)(r=0.9994),20.23～202.3μg·mL^(-1)(r=0.9996);日内精密度 RSD(n=5)分别是1.4%,1.2%,0.89%;平均回收率(n=9)分别为100.6%,97.8%,100.5%。结论:本方法快捷方便,结果可靠,可作为炎菌清搽剂的质量控制标准。

半边旗5F注射液的质量标准研究

目的：建立半边旗注射液的质量标准。方法：采用薄层色谱法对半边旗注射液进行鉴别；采用高效液相色谱法测定主要成分11α-羟基-15-氧-16-烯-对映贝壳杉烷-19-酸（5F）的含量，色谱柱为Hypersil C18（4．6mm×250mm，5μm），流动相为甲醇-水-冰醋酸（55：45：0.045），检测波长254nm，流速1．0mL·min^-1，柱温35℃；采用pH计法、离子火焰法和沉淀法分别测定注射液pH，K^＋、鞣质、蛋白质、草酸盐以及重金属含量。结果：薄层鉴别斑点清晰，重现性好。高效液相色谱法测定5F在30～240mg·L^-1,线性关系良好（r=0.9998），平均加样回收率为99．8％。连续3批注射液pH7．80～8．20，K^＋浓度小于10mmol·L^-1，注射液的鞣质、蛋白质、草酸盐以及重金属含量都符合药典规定。结论：本实验建立的分析方法灵敏可靠，可作为半边旗注射液的质量控制方法。

常压硅胶柱层析分离制备高纯贝壳杉烷型二萜

从半边旗(Pteris semipinnata L,PSL)提取物中分离高纯度贝壳杉烷型二萜化合物,建立了分离工艺条件。以TLC实验筛选适当的洗脱流动相,常压硅胶柱层析分离纯化,产物用两相法重结晶,TLC及MS监测分离效果及产品纯度。结果表明优选的流动相为混合溶剂石油醚∶丙酮∶醋酸=7∶3∶0.05(体积比),纯化分离得到两个贝壳杉烷型二萜单分子化合物,纯度分别从62%和17%提高到96%和94%。

高效液相色谱法测定半边旗中木犀草素的含量

目的建立草药半边旗中木犀草素含量的准确测定方法，并测定不同采收期半边旗中木犀草素的含量。方法采用高效液相色谱法，色谱柱为Diamonsil C18流动相为甲醇水梯度洗脱，流速0．2ml·min^-1，检测波长为283nm，柱温度35℃。结果木犀草素进样量在0．062-0．62μg范围内线性关系良好（R^2=0．9987），平均回收率为99．5％（RSD=1．98％）。结论该方法操作简便，结论可靠，可用于半边旗草药的质量控制。

高效液相色谱法测定半边旗中芹菜素含量

目的建立草药半边旗中芹菜素含量的准确测定方法,并测定不同采收期的半边旗中芹菜素的含量。方法采用高效液相色谱法,色谱柱为DiamonsilC18柱,流动相为甲醇-水(梯度洗脱),流速为0.2mL/min,检测波长为283nm,柱温为35℃。结果芹菜素进样量在0.076～0.76μg范围内与峰面积线性关系良好(r2=0.9986),平均回收率为98.1%(RSD=1.24%)。结论高效液相色谱法操作简便,测定结果可靠,可用于半边旗草药的质量控制。

半边旗5F注射液中有效成分的含量测定方法

目的：建立半边旗5F（化学名为11α-羟基-15-氧-16-烯-对映贝壳杉烷-19-酸）注射液中有效成分的含量测定方法。方法：采用高效液相色谱法测定主要成分5F的含量，色谱柱为Hypersil C18（250mm×4．6mm，5μm），流动相为甲醇-水-冰醋酸（55：45：0．045），检测波长为254nm，流速为1．0mL·min^-1，柱温为35℃。结果：高效液相色谱法测定5F的含量在30～240mg·L^-1范围内线性关系良好（r=0．9998），平均加样回收率为99．8％。结论：本实验所建立的分析方法灵敏可靠，可作为半边旗5F注射液中有效成分的定量分析方法。

高效液相色谱法测定人乙肝免疫球蛋白中麦芽糖的含量

目的：建立高效液相色谱法，测定静脉注射用人乙肝免疫球蛋白（HBIGIV）中麦芽糖的含量。方法：采用氨基柱Kromasil 100—5NH2（4．6mm×250mm）及示差折光检测器，以0．004mol·L^-1硫酸溶液做流动相，柱温50℃，流速0．8mL·min^-1。结果：麦芽糖含量的线性范围5～40g·L^-1．平均回收率（n=6）为99．4％，RSD为1．13％。结论：本方法准确、简便，适用于测定人乙肝免疫球蛋白静脉注射液中麦芽糖含量的测定。

半边旗抗肿瘤活性成分5F对照品的制备和鉴定

制备并鉴定了半边旗抗肿瘤活性成分11α-羟基-15-氧-16-烯-对映贝壳杉烷-19-酸(5F)的对照品。采用二氧化碳超临界萃取、有机溶剂萃取、柱层析、重结晶方法进行分离、纯化以制备半边旗5F化合物单体;采用TLC、HPLC-MS检测杂质;采用HPLC峰面积归一化法测定纯度;采用理化性质、波谱特征鉴定其化学结构。结果表明,从半边旗地上部分的二氧化碳超临界萃取物中分离得到纯度为99.2%的5F对照品。该对照品可以作为半边旗药材以及主要成分为5F的药物制剂含量测定的对照物。

半边旗中黄酮的提取工艺研究

目的确定提取半边旗总黄酮的最佳工艺条件,并精制以提高黄酮的含量。方法采用正交实验法,考察溶剂用量、乙醇浓度、提取时间以及提取次数对半边旗中总黄酮溶出量的影响,确定最佳提取条件,然后对半边旗总黄酮进行精制,用高效液相色谱测定已知黄酮的含量。结果在所考察的因素中,对半边旗总黄酮提取影响程度为乙醇浓度>提取次数>溶剂用量>提取时间,半边旗总黄酮最佳提取条件为12倍用量80%乙醇回流提取2次、每次回流2 h,精制后半边旗黄酮含量达到84.3%以上。结论该工艺设计合理,操作简单,生产成本低廉,有较高的工业生产应用价值。

半边旗5F注射液的溶血性和过敏性实验研究

目的观察半边旗5F注射液的制剂安全性。方法采用家兔红细胞体外孵育进行溶血性试验;采用豚鼠经胫静脉给药进行全身过敏性试验。结果半边旗5F注射液在体外对家兔红细胞无溶血作用,对豚鼠不引起全身过敏性反应。结论半边旗5F注射液是一种安全的注射用制剂。

天然药物化学的教学体会与分析

根据天然药物化学的教学特点,按照教学大纲,从强化基础知识,拓宽学生知识面;增强互动,答疑解惑,激发学生的学习热情;结合行业内的热点问题,联系实际,引导并提高学生分析问题的能力;重视实验课的安排,注重直观实验现象,提高学生的动手能力;采用多媒体教学,贴近学科前沿,培养学生科研材料的学习能力等五个方面介绍了教学体会和分析。

环脂肽氨基酸顺序的质谱测定

从一株枯草芽孢杆菌的培养液中分离得到一种生物表面活性剂,红外光谱、茚三酮显色及质谱分析表明它是一种具有环状结构的脂肽.质谱显示脂肽的脂肪酸部分为β羟基脂肪酸;氨基酸分析表明肽部分由4个亮氨酸、1个天门东氨酸、1个缬氨酸和1个谷氨酸组成.利用串联飞行时间质谱测定了环脂肽的分子量及质谱图.根据分子量的氮规则和质谱碎片产生的简单断裂、双氢转移机制、McLafferty等单氢重排机制,直接确定了未水解的环脂肽中脂肪链的长度以及氨基酸连接的顺序.质谱中的峰可以得到合理解释.确定了该环脂肽的环状结构.

半边旗抗肿瘤有效成分5F的纯化工艺研究

目的:探索D101大孔吸附树脂制备半边旗中抗肿瘤有效成分贝壳杉烷类二萜5F的工艺。方法:以HPLC为检测手段,以5F在浸膏中的含量为指标,比较甲醇和氯仿提取5F的专属性;以HPLC和TLC为检测手段,考察D101大孔吸附树脂对5F的吸附和洗脱条件。结果:半边旗药粉采用氯仿提取,制成含乙醇20%的药液上柱后,先用2BV30%的乙醇除去极性杂质,再用4BV60%的乙醇洗脱,得到质量分数为32.25%的5F。结论:建立了一种5F的纯化工艺,并达到要求的标准。

丹参类中药的品种与鉴定研究概述

综述了丹参类中药在本草考证、品种调查、伪品品种研究、性状鉴定、显微鉴定、理化鉴定、微形态学研究和分子生物学研究等方面的研究进展,为丹参类中药的资源利用和深入研究提供参考。

半边旗提取物5F对HepG2细胞凋亡的影响及其机制

目的：研究半边旗（PsL）提取物Ent-11α-hydroxy-15-oxo-kaur-16-en-19-oic-acid（5F）诱导的HepG2细胞凋亡及其可能机制。方法：通过MTT法检测细胞活性以研究HepG2细胞经不同浓度（5-80 mg/L）5F处理24 h所导致的5F细胞毒作用。采用Hoechst/PI实验定性分析细胞凋亡。采用Western blotting实验检测经5F处理的HepG2细胞线粒体内Bax水平及分析cyto-c与AIF在胞浆内的水平。结果：通过细胞活性分析证明,5F对HepG2细胞的细胞毒性随着5F浓度的提高而增强。HepG2经5F处理后,可观察到以细胞核凝聚为特征的凋亡细胞。经5F处理的HepG2细胞线粒体内Bax水平提高,胞浆内cyto-c及AIF水平增强。结论：5F介导的细胞凋亡涉及线粒体依赖途径,5F可能对人类癌细胞具有诱导凋亡作用,尤其是肝细胞癌（HCC）细胞。

口虾蛄乙酸乙酯提取物分离及体外抗肿瘤活性研究

目的分离口虾蛄乙酸乙酯提取物并对其组分进行体外抗肿瘤生物活性追踪。方法采用MTT比色法,细胞集落形成实验及生长曲线测定对分离得到的提取物进行抗癌生物活性筛选。结果MTT法发现乙酸乙酯提取物中E成分对HO-8910PM细胞生长抑制作用最强,MTT法、细胞集落形成实验及生长曲线测定均显示成分E对HO-8910PM细胞生长有显著抑制作用,且有明显的时效-量效关系。结论口虾蛄乙酸乙酯提取物中的组分E能明显抑制肿瘤细胞生长。