西双版纳进口食品中克罗诺杆菌分离鉴定、毒力基因及耐药性研究

为了解西双版纳进口食品中克罗诺杆菌的污染状况、毒力基因特征以及耐药性情况,该研究利用全自动微生物鉴定系统VITEK 2 compact和16S rDNA测序对克罗诺杆菌进行分离鉴定,通过PCR对4种毒力基因进行扩增,通过Kirby-Bauer纸片法对菌株进行14种抗生素的药敏试验,并对菌株BQ10进行了全基因组测序。结果显示,2.91%(5/172)的样品中存在克罗诺杆菌的污染,菌株中毒力基因ompX、cpa、hly的携带率为100%,且都未检出sip。分离株对头孢噻吩(cefothiophene,CFT)的耐药性最强,耐药率为69.23%(9/13),而对氨苄西林、阿莫西林、替卡西林、亚胺培南、环丙沙星等抗生素普遍敏感,未发现多重耐药菌株。全基因组测序结果显示BQ10的基因组大小为4.75 Mb,GC含量为54.69%,多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)为ST431型,通过毒力因子数据库VFDB和耐药数据库CARD预测到多种毒力基因和耐药基因。该研究结果为西双版纳进口食品中食源性致病菌风险评估、预警以及采取相关防控措施提供了一定的参考。

云南边贸进口即食食品中蜡样芽胞杆菌污染状况及其呕吐毒素基因型检测

为探究云南省边贸进口即食食品中蜡样芽胞杆菌的污染状况及其呕吐毒素基因型携带情况,从云南边境各口岸进口食品贸易集散点(边民互市点、农贸市场以及进出口产品店等地)共采集市售包装样品224份。通过VITEK 2 compact全自动微生物鉴定系统和双重实时荧光聚合酶链式反应(Double real-time fluorescent polymerase chain reaction,Dual real-time PCR)技术对分离得到的蜡样芽胞杆菌进行鉴定,并对阳性菌株中的呕吐毒素基因进行检测。结果表明:蜡样芽胞杆菌在所采集样品中的检出率为20.09%(45/224),天保、金水河、瑞丽以及畹町各口岸检出率均高于10%。检出率较高的食品类别为:酱腌菜60%(3/5)、调味品50%(15/30)、水产及其制品46.67%(7/15);从45份阳性样品中共分离出113株蜡样芽胞杆菌,其中呕吐型毒素基因cesB的携带率为0.88%(1/113),呕吐型毒素基因携带率较低,但是蜡样芽胞杆菌的污染风险仍不可忽视。该研究结果对边贸进口食品安全、食源性疾病的监测及预防提供了理论依据。

云南边贸进口即食食品中金黄色葡萄球菌的分离与鉴定

为探索云南边贸进口即食食品中金黄色葡萄球菌的污染状况,对云南5个边境口岸城市采集到的10类459份进口边贸即食食品中的金黄色葡萄球菌进行检验和分离,并对分离出的可疑金黄色葡萄球菌进行生化确认、全自动微生物鉴定以及16S rDNA序列鉴定,同时利用16S rDNA序列构建系统发育树和同源性分析。结果表明,从所采集的样品中检出2份阳性食品,检出率为0.43%,均为糖果和巧克力,占该类食品的3.8%。从2份阳性食品中分离出9株金黄色葡萄球菌菌株,通过16S rDNA系统发育树和遗传进化分析,9株金黄色葡萄球菌不存在明显的样品来源不同遗传进化差异。该研究结果为构建云南边贸进口食品食源性致病菌溯源技术、致病菌安全预警平台提供理论和技术支持。

MALDI-TOF-MS技术在块菌、美味牛肝菌物种快速甄别中的运用

运用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS),对2种云南特色高值野生食用菌块菌和美味牛肝菌进行物种甄别鉴定。运用液氮甲酸法处理样品,获得浓度分别为0.243 mg·mL^-1和0.284 mg·mL^-1的块菌和美味牛肝菌的蛋白质提取液,经MALDI-TOF-MS采集指纹图谱,对块菌和美味牛肝菌的蛋白指纹图谱进行比对与聚类分析。结果表明,产地不同的同种野生食用菌具有相似的蛋白指纹图谱和物种特征质谱峰,而不同种类的食用菌间具有差异明显的特征蛋白指纹图谱。MALDI-TOF-MS可以用于云南出口高值特色野生食用菌块菌和美味牛肝菌的物种快速甄别。

云南边贸食品中克罗诺杆菌污染状况及分析

为探究云南边贸进出口食品中克罗诺杆菌的污染情况,从云南边境4个口岸的进出口食品贸易集散点采集边贸食品1048份,根据国家标准GB 4789.40-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验克罗诺杆菌属(阪崎肠杆菌)检验》进行食品中克罗诺杆菌的检验,对分离得到的菌株利用VITEK 2 compact全自动微生物鉴定系统进行生化检测,分析菌株生化谱型区别以及其与食品原产地的相关性.本试验中,克罗诺杆菌阳性检出22份,克罗诺杆菌检出率最高的几类食品为豆制品25.0%(1/4),调味品9.3%(4/43),方便食品6.1%(2/33),茶叶和代用茶以及粮食加工品5.0%(1/20),糕点和饼干3.8%(9/238),水产制品1.9%(1/54),糖果和可可制品0.9%(2/215),饮料0.6%(1/157).阳性样品中分离出40株克罗诺杆菌,菌株生化谱型与食品原产地具有一定相关性.检出克罗诺杆菌的进出口食品并非婴幼儿配方食品,并不会对该类型食品消费人群造成严重致病可能.本研究结果对掌握云南边贸食品中克罗诺杆菌污染情况,加强边贸食品监管能力,并为云南食源性疾病的监测预防提供数据支持.

微生物法测定鸡枞菌中叶酸含量不确定度评估

为保证测量结果的准确性,对商品试剂盒微生物法测定鸡枞菌中叶酸含量不确定度进行分析。依据CNASCL01-G003-2019要求,并按照JJF 1059.1-2012和GB/Z 22553-2010对实验结果有影响的各个分量进行评估,即对样品测定重复性、样品称量、样品检测过程三个方面引入的不确定度进行分析,并确定了各不确定度分量,得出扩展不确定度。各分量不确定度从大到小分别为样品测定重复性0.0272、移液枪自身容差0.0226、标准品纯度0.002887、温度变化0.0006、容量瓶定容0.0006、样品称量0.00001633;相对合成标准不确定度为0.0356,扩展不确定度为7.7857,测量结果为(109.35±7.7857)μg/100 g。影响微生物法测定鸡枞菌中叶酸含量的最主要不确定度分量为样品测定重复性、移液枪自身容差、标准品纯度引入的不确定度。