CD39^+和CD73^+调节性T细胞与原发性胆汁性胆管炎肝脏损伤的相关性研究

目的分析原发性胆汁性胆管炎(primary biliary cholangitis,PBC)患者腺苷代谢通路相关分子的变化及其与PBC炎性损伤的关系。方法连续选择2016年10月-2017年10月在太仓市第一人民医院和常熟市第二人民医院就诊的PBC患者49例和体检健康者36例。流式细胞术分析外周血腺苷代谢通路关键分子CD39和CD73在CD4+T细胞和Foxp3+调节性T细胞(Treg)中的表达情况,高效液相色谱串联质谱(UHPLC-Q-TOF/MS)分析患者血清三磷酸腺苷(ATP)水平。分析以上指标的统计学差异及其与肝脏炎性损伤指标丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、γ-谷氨酰基转移酶(GGT)、碱性磷酸酶(ALP)和Mayo评分之间的相关性。结果 PBC组CD4+CD39+T细胞占CD4+T细胞比例[(5.28±1.92)%]较对照组[(11.01±3.19)%]显著降低(t=10.25,P<0.01),CD4+CD25+Foxp3+CD39+T细胞(CD39+Treg)在Foxp3+Treg中所占比例[(23.75±9.48)%]同样显著低于对照组[(54.68±5.18)%],差异有统计学意义(t=13.79,P<0.01)。PBC组和对照组CD4+CD73+T细胞在CD4+T细胞中的占比和CD4+CD25+Foxp3+CD73+T细胞在Foxp3+Treg中的占比差异无统计学意义(t值分别为2.235和1.083,P>0.05)。PBC组血清ATP水平[(200.28±79.41)μg/L]明显高于对照组[(89.20±33.76)μg/L],差异有统计学意义(t=8.367,P<0.01)。PBC组CD39+Treg占Treg比例与ATP、GGT和Mayo评分水平呈负相关关系(r值分别为-0.413、-0.378和-0.382,P值分别为0.003、0.007和0.007)。结论 CD39+Treg在PBC患者中比例显著降低,可能通过降低ATP的分解导致炎性损伤加剧。CD73+Treg在PBC患者中未见明显变化。

乙型肝炎病毒DNA定量检测临界室内质控品的制备与初步应用

目的制备乙型肝炎病毒(HBV)-DNA定量检测的临界室内质控品并评价其在日常工作中的应用价值。方法留取健康体检者血清作为基质,稀释阳性标准品,与临床标本采用实时荧光定量聚合酶链反应一起检测,根据结果计算出x、s、CV值并在L-J室内质控图上作图,应用Westgard多规则质控判断方法。结果 x=3.55×104 copy/mL,s=0.24(对数值),CV=5.27%。结论自制HBV DNA临界质控品结果稳定,具有一定实用价值。

血清可溶性B7-H3在原发性胆汁性胆管炎患者中的表达水平及临床预后评价

目的探讨血清可溶性B7-H3(sB7-H3)在原发性胆汁性胆管炎(PBC)患者中的表达水平和临床预后评价。方法选取初诊诊断为PBC的患者37例、体检健康者50例,并收集基本临床资料。用ELISA法测定血清sB7-H3及白细胞介素6(IL-6)的浓度;用全自动生化分析仪测定丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰基转移酶(GGT)、总胆红素(T-Bil)等指标,同时用多重微珠流式荧光法和免疫印迹法测定自身抗体。对sB7-H3、IL-6与肝功能各项指标进行Spearman相关性分析。结果PBC组血清sB7-H3以及IL-6较对照组均显著升高,差异有统计学意义(P<0.0001以及P=0.0055);Mayo评分高的患者sB7-H3水平显著高于Mayo评分低的患者(P=0.0006);anti-GP210阳性PBC患者的sB7-H3水平较阴性组显著升高,差异有统计学意义(P=0.0015);Spearman相关性分析发现sB7-H3、IL-6血清浓度均与ALT、AST、ALP、T-Bil呈正相关关系(P<0.05)。结论sB7-H3在PBC患者血清中显著升高,在PBC患者预后评估中具有潜在的应用价值。

CD123与CD47在急性髓细胞白血病干细胞中的表达及临床意义

目的探讨CD123与CD47在急性髓细胞白血病（AML）干细胞中的表达，及其与临床预后的关系。方法纳入2009年3月至2015年8月急性髓细胞白血病患者127例（AML组），并纳入23例健康体检者作为对照组。采用流式细胞仪检测骨髓干细胞内的CD123与CD47表达，观察不同患者两种标记物的表达，并分析两种标记物阳性表达与患者疗效和预后的关系。结果CD47在各种亚型患者干细胞中的表达差异无统计学意义（P〉0．05）。CD47高表达患者90例，常规治疗后完全缓解率（CR）低，白血病发病率高。CD123在不同类型的患者中表达程度存在一定差异，AML组CD123阳性表达率为63．0％，远高于健康对照17．4％，其阳性表达患者临床预后较差。结论CD123与CD47可作为判断急性白血病预后的诊断指标。

VISTA在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨负性共刺激分子T细胞活化的V结构域Ig抑制因子(V-domain immunoglobulin suppressor of T cell activation,VISTA)的表达与胃癌患者临床病理参数及预后的关系。方法收集2011年1月至2012年12月在苏州大学附属第一医院接受胃癌手术的268例胃癌患者肿瘤组织并制作成组织芯片;免疫组化染色法检测组织芯片VISTA、浸润细胞标志物、γ干扰素(IFN-γ)的表达水平;荧光定量PCR(qRT-PCR)检测胃癌和胃炎组织中VISTA mRNA的表达水平;ELISA法检测血清IFN-γ的表达水平;进一步分析VISTA与IFN-γ、胃癌患者临床病理参数之间的相关性以及对患者预后的影响。结果VISTA主要在肿瘤浸润免疫细胞(122/268,45.5%)和间质细胞(148/268,55.2%)中表达,较少在肿瘤细胞(14/268,5.2%)中表达。VISTA与IFN-γ的表达水平呈正相关(P<0.05)。胃癌组织VISTA mRNA和蛋白质的表达水平均显著高于胃炎组织(P均<0.05),且其高表达与胃癌患者性别、肿瘤分期以及是否存在淋巴结转移之间呈显著相关性(P均<0.05)。VISTA低表达是影响胃癌患者总生存率的危险因素(P=0.035)。结论VISTA具有作为胃癌与胃炎鉴别诊断指标的潜能,可作为胃癌患者风险因素的预后标志物,但需联合肿瘤微环境中的其他指标分析以精准预测患者预后。

LINC00978在甲状腺乳头状癌组织及外周血中水平及临床价值

目的:探索长链非编码核糖核酸(long non-coding RNA,lncRNA)LINC00978在甲状腺乳头状癌(papillary thyroid cancer,PTC)组织及外周血中的水平及临床价值。方法:收集2018年6月-2019年5月在太仓市第一人民医院就诊PTC患者38例(PTC组),另选取甲状腺良性疾病患者33例(甲状腺良性疾病组)及健康体检者32例(健康对照组),通过实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测PTC组织及外周血中LINC00978表达水平。PTC组接受PTC切除术,依据术前LINC00978表达水平的中位数(LINC00978=0.73)将PTC组分为LINC00978高表达组和低表达组,采用Logistic多因素分析血浆游离LINC00978与PTC患者临床病理参数的相关性,构建受试者工作特征(ROC)曲线评估血浆游离LINC00978的临床诊断效能。结果:血浆游离LINC00978在人甲状腺癌细胞(K1)中的相对含量为(0.65±0.28),在PTC-1甲状腺癌细胞相对含量为(1.17±0.34),明显高于正常甲状腺滤泡上皮细胞Nthy-ori 3-1中的相对含量(0.36±0.22),差异有统计学意义(P<0.01)。血浆游离LINC00978在PTC组的相对含量为(1.28±0.61),明显高于健康对照组的(1.02±0.34)和甲状腺良性疾病组的(1.09±0.36),差异有统计学意义(P<0.05)。术后,PTC组的血浆游离LINC00978相对含量为(0.81±0.22),明显低于术前的(1.28±0.61),差异有统计学意义(P<0.05)。多因素分析显示:血浆游离LINC00978表达水平与肿瘤TNM分期、肿瘤大小、淋巴结转移显著相关(P<0.05)。血浆游离LINC00978诊断甲状腺乳头状癌的曲线下面积(AUC)为0.66(95%CI:0.56,0.75),截断值为1.12,敏感度为63.85%,特异度为62.14%。结论:LINC00978在PTC患者血浆中显著高表达,与肿瘤大小、TNM分期及淋巴结转移相关。

对血栓性疾病患者进行血浆D-二聚体检测的临床意义

目的:探讨对血栓性疾病患者进行血浆D-二聚体检测的临床意义。方法:选取2014年3月至2015年12月期间我院收治的87例血栓性疾病患者作为观察组,选取同期在我院进行体检的30例健康人作为对照组,对两组研究对象均进行血浆D-二聚体检测。然后,比较两组研究对象血浆中D-二聚体的水平和阳性率及观察组患者中不同血栓性疾病患者血浆中D-二聚体的水平和阳性率。结果:观察组患者血浆中D-二聚体的水平和阳性率均明显高于对照组研究对象,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组患者中不同血栓性疾病患者血浆中D-二聚体的水平和阳性率相比差异有统计学意义(P<0.05),其中急性肺栓塞、下肢深静脉血栓患者血浆中D-二聚体的水平和阳性率均明显高于其他血栓性疾病患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:血栓性疾病患者血浆中D-二聚体的水平会较健康人显著升高,且不同血栓性疾病患者血浆中D-二聚体的水平存在显著差异,因此对血栓性疾病患者进行血浆D-二聚体检测有助于对其病情进行诊断。

血小板参数与类风湿关节炎临床指标相关性研究

目的:探讨血小板参数与类风湿关节炎之间的关系。方法:采用回顾性分析方法选取2016年2月至2019年2月本院就诊的45例类风湿关节炎(RA)病人,另外选择60例健康体检志愿者。通过t-test比较血小板参数在两组人群间差异;结合RA相关临床指标,利用斯皮尔曼(Spearman)相关性分析,研究血小板参数与RA间的相关性。结果:与健康对照比较,血小板计数(PLT:)显著升高(P<0.05),而平均血小板体积(MPV)和血小板分布宽度(PDW)在RA患者中下调(f><0.05)。PLT与类风湿因子(R=0.437,P=0.007),血沉(R=0.371,P=0.016)和C反应蛋白(R=0.530,P<0.001)存在显著正相关。MPV与血沉(R=-0.403,P=0.012)和C反应蛋白(R=-0.375,P=0.022)负相关。PDW与血沉(R=-0.447,P=0.005)和C反应蛋白(R=-0.509,P=0.001)负相关。抗环瓜安酸肽抗体与血小板各参数间皆不存在相关性。结论:RA患者血小板参数出现异常,并与RA相关的临床特征存在显著相关,对提高RA临床诊断具有重要意义。