基因沉默血管内皮生长因子受体3对胃癌细胞增殖的抑制作用

目的:探讨靶向血管内皮生长受体-3(vascular endothelial growth factor receptor-3,VEGFR-3)小干扰RNA重组载体对胃癌细胞增殖的作用.方法:构建pSUPER-shRNA/VEGFR3重组载体,将其转染入胃癌细胞SGC-7901,采用MTT法观察细胞的生长曲线,RT-PCR检测重组载体在转染前后VEGFR-3 mRNA表达水平的变化,Western blot检测VEGFR-3的蛋白表达.结果:pSUPER-shRNA/VEGFR3重组载体可显著抑制SGC-7901细胞中VEGFR-3基因的表达(P<0.05);转染pSUPER-shRNA/VEGFR3的SGC-7901细胞生长明显受抑制(P<0.05),VEGFR-3基因蛋白表达明显降低(P<0.05).结论:pSUPER-shRNA/VEGFR3重组载体能够对胃癌细胞SGC-7901中VEGFR-3形成基因沉默,并抑制胃癌细胞的增殖.

胃管灌注泛影葡胺和医用石蜡油治疗粘连性小肠梗阻对比研究

目的比较泛影葡胺、医用石蜡油及单纯输液等非手术方法对急性粘连性小肠梗阻的治疗作用。方法将123例急性粘连性小肠梗阻患者分成3组：单纯输液组（对照组）44例,行单纯液体保守治疗;医用石蜡油组34例,除对照组治疗外并经胃管注入10%医用石蜡油溶液100 mL;泛影葡胺组45例,除对照组治疗外经胃管注入76%泛影葡胺溶液100 mL。观察各组肠梗阻缓解时间及住院时间。结果泛影葡胺组平均住院时间、首次排便时间较石蜡油组与单纯输液组均明显缩短（P〈0.05~0.01）。结论胃管灌注泛影葡胺治疗急性粘连性小肠梗阻与常规非手术疗法有同样的效果,且具有明显缩短小肠梗阻缓解时间及住院时间的优点。

VEGFR-3 siRNA腺病毒表达载体对结肠癌细胞凋亡和侵袭的影响

目的探讨靶向血管内皮细胞生长因子受体3(vascular endothelial growth factor receptor-3,VEGFR-3)基因的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)腺病毒载体对人结肠癌Lo Vo细胞系凋亡及侵袭的影响。方法将靶向VEGFR-3 siRNA腺病毒转染结肠癌Lo Vo细胞,以Western blotting检测VEGFR-3蛋白的表达,Hoechst 33342染色法和流式细胞仪检测Lo Vo细胞的凋亡情况,用Transwell小室测定Lo Vo细胞的侵袭力。结果实验组与空白对照组和阴性对照组比较,实验组中转染靶向VEGFR-3 siRNA腺病毒后结肠癌Lo Vo细胞中VEGFR-3蛋白的表达被下调(P<0.05)。Hoechst 33342染色法和流式细胞仪检测Lo Vo细胞凋亡率明显升高(P<0.05),Transwell小室测定Lo Vo细胞侵袭能力下降(P<0.05)。结论靶向VEGFR-3 siRNA腺病毒能下调结肠癌LoVo细胞中VEGFR-3蛋白的表达,从而诱导结肠癌Lo Vo细胞的凋亡,抑制其侵袭能力,因此,VEGFR-3可以作为结肠癌靶向治疗的一个潜在靶点。

胰腺损伤的诊治

本组回顾性分析自1994年1月～2003年12月间我院收治资料完整的胰腺损伤病例53例，所有病例均经剖腹探查术确诊。

VEGFR-3小干扰RNA对结肠癌裸鼠移植瘤生长的影响

目的:研究血管内皮生长因子受体3(vascularendothelial growth factor receptor 3,VEGFR-3)小干扰RNA对结肠癌细胞移植瘤模型生长的影响.方法:构建VEGFR-3小干扰RNA表达载体.将结肠癌LoVo细胞注射入裸鼠皮下建造裸鼠移植瘤模型.将15只裸鼠结肠癌模型随机分成3组:实验组(pG-siRNA/VEGFR-3重组质粒)、阴性对照组(pG-HK重组质粒)与空白对照组.分别瘤体内注射相应的siRNA混合物或转染剂混合液,每3 d注射1次,共注射3次,观察肿瘤体积的变化;6 wk后处死裸鼠,肿瘤称取质量,并进行qRT-PCR和Western blot测定VEGFR-3 mRNA和蛋白的变化,通过免疫组织化学进行微淋巴管计数.结果:实验组移植瘤体积和质量明显小于阴性对照组和空白对照组,有显著的统计学意义(P<0.001).实验组抑制率为52.75%,与对照组相比,差异有显著(P<0.001).qRT-PCR和Western blot测定VEGFR-3 mRNA和蛋白的变化比较,实验组有明显降低(P<0.001).实验组淋巴管计数较对照组差异显著(P<0.05).结论:VEGFR-3 siRNA可以抑制裸鼠结肠癌细胞移植瘤的生长,并减少裸鼠移植瘤淋巴管生成,能有效抑制结肠癌细胞的生长.

PTEN低表达增加胃癌曲妥珠单抗的耐药性

目的：明确PTEN活性和胃癌曲妥珠单抗耐药性的关系。方法：用Western blot方法检测胃腺癌细胞株中HER2蛋白、PTEN蛋白、PI3K蛋白、AKT蛋白的表达;用CCK-8方法检测曲妥珠单抗对HER2阳性/PTEN野生型NCI-N87细胞的生长抑制作用;构建PTEN siRNA载体并将其PTEN siRNA载体感染HER2阳性/PTEN野生型NCI-N87细胞,建立稳定表达PTEN siRNA的细胞株N87-PD和阴性对照N87-NC,用Western blot验证其表达水平;同时用CCK-8验证曲妥珠单抗对各组细胞生长的影响。结果：Western blot结果显示,NCI-N87细胞的HER2表达水平高于MNK-7细胞。CCK-8检测表明,随着药物浓度的增加,细胞存活率持续呈下降趋势。三种siRNA中以siRNA-1对PTEN mRNA的干扰效果最优,选择siRNA-1进行后续实验。实时定量PCR法测定最终病毒滴度为1.56×10~9/ml（siRNA-1）和1.62×10~9/ml（NC）。PTEN siRNA对NCI-N87细胞的PTEN蛋白表达有明显的下调作用且N87-PD细胞中磷酸化AKT蛋白水平显著高于对照组细胞N87-NC;曲妥珠单抗作用72h后,CCK-8测定N87-NC细胞存活率显著下降,而N87-PD细胞存活率与阴性对照组细胞无显著差异。结论：PTEN低表达增加胃癌曲妥珠单抗的耐药性。

XELOX与FOLFOX4方案治疗进展期胃癌的随机对照临床研究

目的:评价卡培他滨联合奥沙利铂方案(XELOX)与氟尿嘧啶/亚叶酸钙联合奥沙利铂方案(FOL-FOX4)治疗进展期胃癌的临床疗效及不良反应。方法:54例进展期胃癌患者随机分成两组,XELOX组28例,卡培他滨1000mg/m2,口服,2次/日,第1-14天;奥沙利铂135mg/m2,静脉点滴,第1天,21天为1个周期。FOLFOX4组26例,奥沙利铂85mg/m2,静脉点滴,第1天;亚叶酸钙200mg/m2,静滴2h后予氟尿嘧啶400mg/m2,推注,后续600mg/m2持续静滴2h,第1、2天,每2周重复,4周为1周期。两组均治疗4周期以上。结果:XELOX组有效率53.57%,中位TTP5.8个月,MST10个月,FOLFOX4组有效率46.15%,中位TTP5.7个月,MST9.8个月。两组近期有效率差异无显著性。不良反应比较,手足综合征以XELOX组显著(P<0.05),III/IV级恶心呕吐发生率以FOLFOX4组显著(P<0.05),其余不良反应除腹泻外发生率以FOLFOX4组稍高,但差异无显著性。结论:XELOX方案与FOLFOX4方案治疗进展期胃癌疗效确切,不良反应能耐受,两组近期疗效相似,不良反应以XELOX组更易耐受,尤其对一般情况欠佳及老年的患者耐受性好。

近端胃大部切除后两种消化道重建术式的比较

目的：探讨近端胃癌行近端胃大部切除后理想的消化道重建方式。方法：1995年-2006年对145例近端胃癌行根治性近端胃大部分切除后随机采用两种常用的消化道重建术式：食管与胃直接吻合73例（吻合组）；食管与胃之间空肠间置72例（间置组）。对两种重建术的手术时间、术中出血量、术后并发症及术后1年生活质量、反流性食管炎及营养指标进行了比较。结果：与吻合组比较，间置组手术时间显著延长（P〈0．01），但术中出血量、术后并发症发生率两组间无显著差异，术后1年间置组生活质量优于吻合组，反流性食管炎显著减少（P〈0．01），而营养状态两组间无显著差异（P〉0．05）。结论：食管残胃间空肠间置是近端胃大部分切除后较为合适的消化道重建术式。

VEGFR-3 siRNA体外对人结肠癌细胞生长的抑制作用

目的:探讨血管内皮生长因子受体-3(VEGFR-3)在肿瘤细胞生长中的作用.方法:根据人VEGFR-3mRNA编码序列,设计3个RNA干涉靶点,构建siRNA表达载体,并转染到LoVo细胞中,应用半定量RT-PCR检测基因转染前后VEGFR-3mRNA表达水平的变化,采用四甲基偶氮唑蓝显色法(MTT)观察细胞生长变化,并应用流式细胞计数仪分析细胞凋亡的情况.结果:针对VEGFR-3基因的siRNA表达载体成功构建,psiRNA-VEGFR-3可显著抑制LoVo细胞中VEGFR-3基因的表达,转染psiRNA-VEGFR-3细胞生长明显抑制,并可诱导LoVo细胞出现凋亡.结论:psiRNA-VEGFR-3载体能够在LoVo细胞中引发RNA干扰效应,下调VEGFR-3基因的表达可以抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡.

多西他赛联合卡培他滨治疗蒽环类耐药的复发转移性乳腺癌疗效观察

选择56例蒽环类耐药的复发转移性乳腺癌患者，给予多西他赛联合卡培他滨方案治疗，多西他赛37.5mg／m^2静滴，第1、8天；卡培他滨900mg／m^2口服，2次／d，第1-14天；连续服用2周，每3周为一周期。每周期结束后评价疗效，记录不良反应。结果完全缓解（CR）13例，部分缓解（PR）12例，稳定（SD）19例，进展（PD）12例，总有效率44.64％，肿瘤控制率78.57％。不良反应主要为骨髓抑制、胃肠道反应和手足综合征，患者均可耐受，无治疗相关死亡患者。认为多西他赛联合卡培他滨治疗蒽环类耐药的复发转移性乳腺癌疗效较好，不良反应可以耐受，可作为蒽环类耐药的复发转移性乳腺癌的解救化疗方案。

胃癌数据库系统的构建

目的:设计并构建胃癌数据库系统。方法:采用Microsoft SQL Sever数据库管理系统构建数据库。利用VB进行编程,完成数据库应用程序设计。结果:完成了数据库、应用程序及相应的自定义查询工具的设计和构建。数据库功能模块包括录入、查询、系统管理、输出、用户和帮助。结论:胃癌数据库管理系统具有独立、清晰和升级快等优点,为临床研究提供了完整准确的原始数据记录,可投入临床使用。

苯丙素甙逆转大肠癌耐药与凋亡的关系

目的:探讨苯丙素甙化合物逆转大肠癌耐药与凋亡的关系.方法:实验分3组:LoVo/Adr细胞组(空白对照组);LoVo/Adr细胞+PPG40mg/L组(实验组);LoVo/Adr细胞+VP5mg/L(阳性对照组).采用MTT法检测苯丙素甙对LoVo/Adr细胞的耐药性;流式细胞仪分析苯丙素甙对大肠癌耐药LoVo细胞的凋亡的作用;通过检测pNA量观察苯丙素甙对LoVo/Adr细胞Caspase-3的活性.结果:苯丙素甙可降低阿霉素对LoVo/Adr细胞的IC50值,具有逆转作用,其逆转倍数为9.93;他还可引起LoVo/Adr细胞凋亡,与对照组相比,具有显著性差异(P<0.01).经苯丙素甙作用后,LoVo/Adr细胞pNA释放量明显增加(31.75±4.34pmol/minvs18.45±2.39pmol/min,P<0.01),而同时加入Caspase-3抑制剂Z-VAD-FMK,pNA释放量明显低于实验组(17.69±2.68pmol/minvs31.75±4.34pmol/min,P<0.01).结论:苯丙素甙对耐药LoVo/Adr细胞具有逆转耐药作用,通过Caspase-3途径诱导凋亡可能为其逆转耐药的机制之一.

胃癌合并慢性阻塞性肺病的围手术期处理

目的:探讨胃癌合并慢性阻塞性肺病(COPD)的围手术期处理。方法:回顾性总结了35例胃癌合并COPD患者围手术期的处理。结果:35例患者中术后13例发生并发症(37.1%),其中肺部并发症11例,占术后并发症的84.6%。肺部感染10例,其中肺部感染合并呼吸衰竭6例、肺不张2例、胸腔积液2例。死亡1例,为严重肺部感染并呼吸衰竭。结论:当胃癌患者合并COPD时,手术虽非禁忌,但属高危人群。应完善术前评估,加强围手术期的监测,即时处理肺部并发症。

苯丙素甙化合物逆转大肠癌LoVo/Adr细胞多药耐药性

目的:以大肠癌LoVo/Adr耐药株为实验对象,观察苯丙素甙(PPG)化合物逆转多药耐药(MDR)作用及可能机制.方法:采用MTT法检测PPG对LoVo细胞和LoVo/Adr细胞增殖的影响.用PPG小于IC10(存活率>90%)的剂量进行耐药逆转试验,确定半数抑制浓度(IC50)并计算逆转倍数.流式细胞术检测PPG对LoVo/Adr细胞阿霉素(ADR)的摄入影响;荧光显微镜观察PPG对ADR在细胞中分布的影响.结果:当PPG浓度为80,160mg/L时,LoVo细胞存活率分别为(69.34±3.48)%,(30.15±1.86)%;LoVo/Adr细胞分别为(67.89±2.87)%,(34.96±2.14)%,提示PPG具有抑制细胞增殖作用且具有一定的量效关系(P<0.05).当PPG浓度小于40mg/L时,LoVo/Adr,LoVo细胞存活率均大于90%;PPG浓度为20,40mg/L时,逆转倍数分别为5.24,9.78.ADR主要分布在LoVo/Adr细胞胞质区,加用PPG后,胞质区荧光强度从2.04±0.70升至2.35±0.87,摄入能力显著增强(P<0.05).结论:PPG具有抗肿瘤、逆转耐药作用,PPG通过增加LoVo/Adr细胞对ADR的摄入及细胞胞质区积聚是其逆转耐药机制之一.

PTGD在老年恶性梗阻性黄疸补救治疗中的应用

目的:探讨超声引导下经皮经肝胆囊穿刺引流术(PTGD)在老年恶性梗阻性黄疸补救治疗中的价值。方法:对11例术后复发及PTCD失败的老年恶性梗阻性黄疸患者行超声引导下经皮肝胆囊穿刺置管引流术。结果:3周后黄疸完全消退为64%(7/11),减轻36%(4/11),随访3、6个月生存率为55%、36%。结论:PTGD可作为老年恶性梗阻性黄疸术后复发及PTCD失败的补救治疗。

早期气管切开辅助治疗特重型颅脑损伤

目的:研究特重型颅脑损伤后早期气管切开对防治肺部感染的影响。方法:选择特重型颅脑损伤(GCS 3-5分)患者57例,随机分为治疗组30例入院后即行气管切开术,对照组27例在患者出现肺部感染后行气管切开术。气管切开后行气道综合管理。结果:38例出现肺部感染,其中治疗组12例,10例感染得到控制,控制感染时间5-10 d,平均7 d。对照组26例,9例感染得到控制,控制感染时间11-20 d,平均17.5 d。早期气管切开肺部感染率、控制感染平均时间和感染控制率均明显优于未行早期气管切开者(P<0.01)。结论:早期气管切开能有效防治特重型颅脑损伤患者并发肺部感染。

胃癌术后复发致梗阻性黄疸的挽救治疗

目的:总结胃癌术后复发引起的梗阻性黄疸的治疗。方法:回顾性分析2001-2010年我院收治的48例因胃癌术后复发所致梗阻性黄疸的资料。男性31例,女性17例。根治性切除术后42例,姑息性切除术后6例。黄疸发生于术后6个月以内、6-12个月(包括12个月)、13-24个月(包括24个月)、25个月及以上者分别为5例、14例、17例、12例。外科手术治疗12例,其中胆管空肠吻合4例,T管引流8例;经内镜放置胆道内支架7例;PTCD 17例;药物减黄治疗12例。34例经减黄治疗后行放、化疗综合治疗。结果:12例手术治疗者,2周内黄疸完全消退。7例经内镜置入内支架者,4周内黄疸完全消退率为85.7%。17例成功行PTCD患者4周内黄疸完全消退率为58.8%。12例黄疸较轻者药物治疗9例有效。全组患者中位生存期为7.5月,1年生存率为39.9%。结论:胃癌术后复发引起的梗阻性黄疸者愈后不佳;极积有效的减黄治疗可改善患者的生活质量,微创减黄可作为首选方法;对一般状态较好者,减黄后进行放、化疗综合治疗,有可能延长患者的生存期。