基于特征图谱及网络药理学的大柴胡汤质量标志物研究

大柴胡汤临床应用广泛、疗效确切,为治疗胆囊炎的经典方剂。然而其成分多样、作用复杂,传统质控指标难以反映其整体功效。因此本研究基于特征图谱和网络药理学预测大柴胡汤质量标志物,以期对大柴胡汤整体质量进行有效控制。研究首先利用虚拟筛选技术获得35个大柴胡汤潜在药效成分。其次采用高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)建立15批大柴胡汤的特征图谱,结合对照品,指认化学成分。初步将芍药内酯苷、芍药苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、黄芩苷、汉黄芩苷、柴胡皂苷b^(2)、柴胡皂苷b^(1)定为大柴胡汤潜在质量标志物。最后利用网络药理学技术手段,构建“成分-靶点-通路-生命过程”网络图,探究其治疗胆囊炎的作用机制,进而明确质量标志物的准确性。结果显示潜在质量标志物可作用于多靶点从而达到抗炎、调节代谢等目的,进而联合治疗胆囊炎。质量标志物与大柴胡汤主要药理作用吻合,可表征大柴胡汤的整体功效。该研究结合特征图谱及网络药理学,挖掘大柴胡汤的质量标志物,为大柴胡汤的质量控制及评价提供依据。

大柴胡汤功效标志物的发现及其作用机制解析研究

大柴胡汤为经典名方之一,具有和解少阳、内泻热结之效。目前在临床上应用广泛,疗效显著,然而其质控指标及作用机制尚不明确。因此该研究利用文献挖掘、分子生物学、网络药理学多种技术,明确大柴胡汤的功效标志物及其作用机制,从而有效控制质量,确保临床疗效。首先,研究基于中药质量标志物(Q-marker)“五原则”对大柴胡汤功效标志物进行预测分析。其次,采用脂多糖(LPS)诱导RAW264.7细胞构建体外炎症模型,以Griess法评价大柴胡汤功效标志物的抗炎活性,验证功效标志物的有效性。利用中药系统药理学数据库(TCMSP)、ChEMBL与SwissTargetPrediction平台获取功效标志物的潜在作用靶点,构建大柴胡汤功效标志物的蛋白互作网络。利用拓扑、GO、KEGG富集分析构建“关键靶点-信号通路-生物过程”网络,进而阐释大柴胡汤功效标志物的作用机制。研究结果显示柴胡皂苷B;、黄芩苷、黄芩素、汉黄芩苷、新橙皮苷、柚皮苷、橙皮苷、芍药苷8个化合物可作为大柴胡汤的潜在功效标志物。抗炎活性评价结果显示潜在功效标志物均可有效抑制NO的释放,具有较好的抗炎活性。网络药理学研究结果表明大柴胡汤功效标志物可能通过作用于MAPK、NF-κB信号通路调节炎症反应;作用于HIF-1、PI3K-AKT信号通路调节糖类代谢;作用于AMPK、PI3K-AKT信号通路调节脂质代谢。该研究利用文献挖掘结合分子生物实验确定大柴胡汤的功效标志物,并运用网络药理学从分子水平探讨其作用机制,旨在为大柴胡汤质量控制研究提供参考,并为其临床应用提供科学依据。

基于系统中药学的黄芪补气潜在功效标志物的发掘

黄芪为补气之圣药,具有补气升阳,益卫固表的功效。随着黄芪化学成分研究的日益深入,其在临床上的应用也更加广泛。该研究基于系统中药学的理论,从分子层面表征黄芪补气功效,发掘黄芪补气功效标志物。通过TCMSP及ChEMBL数据库构建黄芪有效成分-靶点数据库,明确黄芪补气功效系统所涉及的靶点(元素)。根据靶点间的关系构建蛋白互作网络,并依据分子复合物检测算法(MCODE)划分网络模块(结构),以黄芪发挥补气功效(功能)的药理作用划定其补气功效系统的边界。从成分、靶点、药效层次上探讨表征黄芪补气功效成分。结果表明,黄芪中的常春藤皂苷元、槲皮素、毛蕊异黄酮、刺芒柄花素、华良姜素、异鼠李素、黄芪皂苷Ⅲ、黄芪异黄烷苷等8个关键成分可作用于17个关键靶点构成的8个功能模块,参与G蛋白偶联受体信号通路、脂质代谢过程、氮化合物代谢的正调控、细胞程序性死亡调控、脂肪酸代谢过程的调节等生命过程,产生调节机体免疫功能、强心、保护心肌细胞、改善物质代谢、抗氧化等药理作用,进而发挥补气的功效。该研究基于系统中药学的理论,从分子网络的水平发掘了黄芪补气的功效标志物,为中药药效物质基础阐释及中药质量控制研究提供了新思路。今后可聚焦于这些成分进行配伍研究,进而对黄芪补气功效展开更深入的研究,并加强相应疾病的药理机制及相关制剂的开发。