柴胡疏肝散含药血清对衣霉素诱导神经元内质网应激模型细胞凋亡的影响

目的:探讨柴胡疏肝散(CSS)含药血清对衣霉素诱导的内质网应激(ERS)模型神经元凋亡的影响。方法:采用衣霉素对NG108-15神经细胞进行诱导,建立ERS细胞模型并分成5组,模型组(10%空白兔血清干预)、安理申(盐酸多奈哌齐片)组(10%安理申含药血清干预)、2.5%CSS含药血清(低剂量)组、5%CSS含药血清(中剂量)组、10%CSS含药血清(高剂量)组。同时设置正常空白血清孵育且未经衣霉素诱导的正常组,干预后采用流式细胞仪和荧光染色检测各组细胞凋亡率。结果:流式细胞仪检测结果显示,各干预组细胞凋亡率均低于模型组(P <0.05);同时高剂量CSS含药血清组细胞凋亡率明显低于中低剂量组(P <0.05)。联合荧光染色也证明高剂量CSS含药血清组细胞凋亡率明显低于中低剂量组。结论:CSS能够抑制衣霉素诱导的ERS模型神经元凋亡,且其抑制作用随着药物浓度升高而增强。

杠柳甙元对人肝癌Hep3B细胞增殖、凋亡、迁移的调控作用及其机制研究

目的:观察杠柳甙元(Periplogenin,PPG)对人肝癌Hep3B细胞增殖、凋亡、迁移的调控作用,并探讨其相关机制。方法:将Hep3B细胞分为空白组、PPG组。空白组的Hep3B细胞未行PPG处理,PPG组的Hep3B细胞分别以2.5、5、12.5μmol/mL PPG干预48 h。使用CCK-8法检测细胞增殖;光镜观察细胞形态变化;DAPI/PI染色法观察细胞凋亡状态;平板克隆法检测细胞克隆形成能力;划痕法检测细胞迁移能力;Western Blot法检测细胞凋亡相关蛋白Caspase-3、Cleaved Caspase-3、Bcl-2以及细胞迁移相关蛋白基质金属蛋白酶-9(Matrix metalloproteina 9,MMP-9)。结果:与空白组比较,各PPG组细胞增殖水平降低,细胞数量减少且出现体积缩小、染色质固缩、核破裂等现象。PPG处理后,Hep3B细胞克隆形成水平降低,细胞迁移率降低。与空白组相比,Bcl-2蛋白水平显著降低,Cleaved Caspase-3/Caspase-3蛋白比例增高;MMP-9蛋白表达水平降低,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。结论:杠柳甙元可有效抑制肝癌Hep3B细胞的增殖、迁移,促进其凋亡,并呈剂量依赖性,其作用机制可能与激活Caspase信号通路、抑制MMP-9活性相关。

周小舟教授治疗肝病常用对药应用及经验创新

亚太地区人口占全球总人数的一半,因肝病死亡的亚太人数占全球62.6%[1],各种原因引起的肝病仍严重影响着人们的生活及健康。其中,脂肪性肝病、慢性肝炎、肝纤维化、肝硬化、原发性肝癌等肝病属于中医“肝癖”“胁痛”“肝着”“积聚”等范畴。

原发性肝癌患者血清前白蛋白与外周血淋巴细胞水平的关系

目的 分析原发性肝癌(Primary liver cancer,PLC)患者血清前白蛋白(Prealbumin,PA)与临床指标、外周血淋巴细胞亚群水平变化的关系,为评估PLC患者的免疫状态提供新的思路。方法 选取2018年5月~2020年10月就诊于我院肝病科确诊为PLC的114例患者作为研究对象。按照血清PA检测值的四分位数将患者分为4组,分别为Q1组(PA≤1.49μmol/L,n=29)、Q2组(1.49μmol/L3.70μmol/L,n=27),比较患者临床指标(Child-Pugh分级、BCLC分期、肝肾功能、甲胎蛋白等)及外周免疫细胞(淋巴细胞、白细胞、中性粒细胞)水平的差异,采用线性回归模型分析PA与外周血淋巴细胞的相关性;收集各组患者外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)并进行RNA高通量测序,利用Cibersort估算淋巴细胞的丰度,进一步运用简单线性回归法分析PA与PBMCs中淋巴细胞群丰度的相关性。结果 在临床指标比较中,各组PA、Child-Pugh分级、BCLC分期、AFP、AFP-L3%、AST、GGT、TB、DB、TP、ALB、GLB、A/G、ALP、TBA、CHE、HBG差异具有统计学意义(P<0.05);在免疫细胞水平比较中,各组淋巴细胞水平差异具有统计学意义(P<0.05);线性回归分析结果显示,在调整AST、GGT、AFP及A/G水平后,PLC患者的PA水平与外周淋巴细胞数量呈正相关(调整后R2=0.12,β=0.38,P<0.05)。利用RNA-seq测序得到PBMCs中免疫细胞亚群丰度,发现PA与CD8+T细胞、静息记忆性CD4+T细胞、静息NK细胞呈正相关(调整后R2=0.06、0.16、0.05,β=0.26、0.41、0.23,P<0.05)。结论 PA是PLC患者外周血淋巴细胞水平变化的相关因素,且与CD8+T细胞、CD4+T细胞、NK细胞水平密切相关,可能成为PLC患者免疫状态的预测因子,为辅助选择治疗方案提供参考。

基于张锡纯大气下陷理论论治肝肺综合征经验浅析

肝肺综合征(HPS)是终末期肝病常见并发症,以肺内血管扩张和血流动力学改变继发的动脉氧合障碍为主要临床特征[1]。血管活性物质(NO、内皮素-1等)灭活能力减弱、肺脉管系统单核细胞浸润、动静脉分流和Ⅱ型肺泡细胞功能障碍是诱导机体肺通气和肺换气能力缺陷的常见发病机制[2]。统计报告显示,HPS成人患病率高于慢性肝病儿童患者,分别为4%~32%和3%~20%[3],且女性、丙型肝炎或非酒精性脂肪性肝硬化患者占比更高[2]。

周小舟基于肝脾同调治疗非酒精性脂肪肝经验

非酒精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)可归属中医学的“肝癖”范畴,其病位在肝。NAFLD的病因与患者饮食结构改变、缺乏运动等有关。周小舟主任医师结合多年临证经验并结合中医经典理论,基于中医整体观提出了肝脾同调结合形气并治以治疗NAFLD的思路,认为NAFLD的病机以脾虚为本,郁、湿、瘀为标;其治疗以调畅气机为要,顾护脾胃为本,可采用塞源(调适饮食)减脂、实脾疏肝等治法,用药以香砂六君子汤加减。

探究传统忠孝观与未成年人的道德教育融合路径

一、传统的忠孝观的内涵传统忠孝观为中国封建社会的思想根基,有正面作用也有其负面印象。忠孝观虽然有一定的封建色彩,但也有很多正面的效果,对于今天中国未成年人的道德教育有重要的影响和作用,中国当今社会应从传统忠孝观中吸取一定的养分,为未成年人的道德教育和建构提供理论和文化的支持。

基于高通量测序探讨原发性肝癌预后标志物及中药靶向预测研究

目的:利用高通量测序技术筛选原发性肝癌(PLC)的预后标志物,并预测其潜在靶向中药。方法:纳入PLC患者103例及健康人50名,采集外周血并提取外周血单个核细胞(PBMC)进行高通量测序。利用生物信息学分析技术对基因表达矩阵进行差异分析,Cytoscape筛选核心基因,“CIBERSORT”反卷积算法和单样本基因集富集分析进行免疫浸润评分,“KM-plot”绘制生存曲线及Coremine Medical数据库获取靶向中药。结果:相较于健康对照组,404个基因在PLC患者PBMC中差异表达,主要参与气体运输、snRNP复合物形成、mRNA剪接等生物过程,在尼古丁成瘾、酗酒、溶酶体、花生四烯酸代谢等通路富集。9个核心基因包括SLC4A1、ALAS2、HBG1、AHSP、HBG2、HBB、HBD、HBA2和HBA1,其中HBA2、AHSP和HBG2高表达与PLC患者较短的生存期相关。静息态NK细胞、CD8^(+)T细胞、幼稚B淋巴细胞和活化记忆CD4^(+)T细胞等正免疫调控细胞群在PLC患者PBMC中占比减少,而抑制性免疫细胞群包括单核细胞、M0型巨噬细胞及调节性T淋巴细胞等浸润增加。生存分析显示静息态NK细胞浸润水平与PLC患者总体生存率呈正相关。此外,腹腔积液、肝功能Child-pugh评分及BCLC分期也是量化PLC预后的重要参考指标。鳖甲、阿胶、荷叶、茶树根、地龙在内的30味中药可能参与PLC靶向治疗。结论:本研究为PLC预后标志的鉴定和潜在靶向中药研究提供新方向。