微小牛蜱对牛巴贝西虫和双芽巴贝西虫传播能力的研究

河南省卢氏县为午巴贝西虫和双芽巴贝西虫的混合感染地区。将该地区自然感染的微小牛蜱的饱血雌虫置28℃产卵和孵育,然后分别用其次代幼虫、若虫和成虫感染除脾牛,结果证明微小牛蜱能经卵传递牛巴贝西虫和双芽巴贝西虫。幼虫不仅能传播牛巴贝西虫,同时也能传播双芽巴贝西虫。若虫和成虫只能传播双芽巴贝西虫,对午巴贝西虫不再具有传播能力。用若虫感染除蜱牛分离出1株纯双芽巴贝西虫。

抗羊胃肠道线虫新型缓释药弹的研制

应用丙硫苯咪唑与相应的缓释赋形剂混合研制成一种缓释药弹。通过动物试验证明，这种药弹能在羊瘤胃内长期滞留，缓慢释放驱虫达１００ｄ以上，用麦克马斯特法对试验羊连续３个月跟踪检查ＥＰＧ，减卵率在９８％以上。药物释放速率每天保持在１６．１８～２０．９６ｍｇ，即可有效地驱除羊胃肠道线虫并预防再感染。一次投药即能起到驱虫作用，又有很好的预防效果，是一种很有推广价值的预防羊胃肠道线虫病的新剂型。

边缘边虫在除脾牛体内的药物分离

本文采用药物杀虫法,从几种血液寄生虫混合感染的除脾牛体内,分离出两株边缘边虫。瑟氏泰勒虫和边缘边虫混合感染牛,连续投给磷酸伯氨喹片杀灭瑟氏泰勒虫,分离出一株边缘边虫DS-1株;双芽巴贝西虫、牛巴贝西虫和边缘边虫混合感染牛,注射台盼兰和贝尼尔杀灭血液中的双芽巴贝西虫和牛巴贝西虫,分离出另一个边虫株一边缘边虫DS-2株。地塞米松能进一步降低除脾牛的抵抗力,促进边虫在血液中的繁殖。药物杀虫分离法程序简单,作为分离边虫虫株的方法,在我国尚未见报道。

山羊边虫病的研究——西北地区羊边虫的分布

笔者利用补体结合试验和病原检查相结合的方法,首次在陕西、甘肃、宁夏、青海四省(区)23个县发现绵羊边虫。经实验证实,血清学检疫的最佳季节应在媒介蜱大量侵袭后1个月左右进行为宜。可疑带虫羊的脾切除后,可使虫体大量繁殖,在检疫地区以优势种蜱感染健康除脾羊可揭示边虫存在与否,这两种方法均可作为检疫的补充方法应用。

长角血蜱对牛大巴贝西虫的经卵传递试验研究

我国河南省卢氏县流行的牛的大巴贝西虫病,传播媒介为长角血蜱。本试验进一步证实,清洁的长角血蜱成虫饲喂在大巴贝西虫带虫的牛体上可被感染,病原能在饱血的雌蜱体内经卵传递,其第二代幼虫、若虫和成虫都具有将大巴贝西虫传递给易感牛的能力。微小牛蜱不能传播这种病原。

绵山羊边虫病的研究——绵羊边虫的蜱传播试验

通过蜱的传播试验,首次确定了我国西北广大养羊区有3种硬蜱是绵羊边虫的媒介蜱。甘肃省和宁夏回族自治区绵羊边虫的传播媒介均为草原革蜱,内蒙西部地区绵羊边虫的传播媒介为亚东璃眼蜱和短小扇头蜱。试验证明,上述3种媒介蜱对绵羊边虫都不能经卵传递,也不产生发育阶段性传播,唯一的传播方式为蜱成虫间歇性吸血传播。

牛的巴贝斯虫18S rRNA基因序列比较研究

对中国已报道的8株牛的巴贝斯虫(包括1株牛巴贝斯虫、1株双芽巴贝斯虫、1株大巴贝斯虫、3株卵形巴贝斯虫和2株巴贝斯虫未定种)的18S rRNA基因序列进行了测定与比较.自感染动物的血液中纯化虫体,提取基因组DNA,PCR扩增靶基因,然后将其连接到pGEM-T Easy载体上,进行克隆测序.研究结果显示:牛的巴贝斯虫18S rRNA基因大小在1 653～1 699 bp之间;用所测得的和自GenBank下载的各种动物的巴贝斯虫18SrRNA基因序列构建了系统发生树,发现由刻点血蜱传播的大巴贝斯虫伊犁株与由长角血蜱传播的3株卵形巴贝斯虫存在明显差别,应属于2个独立种;由小亚璃眼蜱传播的牛巴贝斯虫未定种不同于目前已报道的任何种类,在中国应为一个新种.因而,中国存在5种牛的巴贝斯虫,即:牛巴贝斯虫,双芽巴贝斯虫、大巴贝斯虫,卵形巴贝斯虫和巴贝斯虫未定种.

我国牛羊梨形虫病病原的收集与鉴定

目的建立标准化的梨形虫病病原收集与鉴定技术,用于我国牛羊梨形虫病的防治研究。方法自野外采集动物血液或媒介蜱,根据形态进行蜱种鉴定,实验性感染除脾动物,对我国不同地区、不同家畜的梨形虫病病原进行分离,并通过蜱传播试验确定媒介蜱的种类与传播方式;采用18S rRNA基因测序方法,对本实验室已分离的部分梨形虫进行进化关系研究。结果获得34个牛和羊的梨形虫不同地区分离株,并对病原进行了分类鉴定。结论采用血液注射或蜱传播试验可对梨形虫进行有效分离,通过传统分类学和病原进化关系研究,可对动物梨形虫进行正确的分类鉴定。

我国牛蜱传性血液原虫的虫种调查和分布特征的研究

利用病原检查法对我国２６个省（区）的３１８４头牛进行了牛蜱传性血液原虫调查，并研究了不同生态地区虫种的分布特征。调查共发现双芽巴贝西虫、牛巴贝西虫、大巴贝西虫、环形泰勒虫、瑟氏泰勒虫、突变泰勒虫和边缘边虫７种病原。双芽巴贝西虫分布于云南、贵州、四川等省，感染率为０．９７％～１．５％，媒介蜱为微小牛蜱和镰形扇头蜱。牛巴贝西虫分布于云南、贵州、湖南、湖北等省，感染率为２．３８％～５６．６６％，媒介蜱为微小牛蜱和镰形扇头蜱。大巴贝西虫分布于河南、甘肃、辽宁、新疆等省（区），感染率为１６．６５％～４０％，媒介蜱为长角血蜱和刻点血蜱。环形泰勒虫分布于宁夏、新疆、内蒙、甘肃等省（区），感染率为１７．２４％～３５．３０％，媒介蜱为残缘璃眼蜱。瑟氏秦勒虫分布于云南、贵州、广东、广西等省（区），感染率为３４．６７％～１００％，媒介蜱为长角血蜱。突变泰勒虫分布于贵州、新疆、西藏等省（区），感染率为４５％～５５％，媒介蜱为刻点血蜱。边缘边虫分布于云南、贵州、湖南、湖北等省，感染率为２０％～７９．３１％，媒介蜱为微小牛蜱和镰形扇头蜱。

小亚璃眼蜱和亚洲璃眼蜱对环形泰勒虫传播能力的研究

将实验室培养的小亚璃眼蜱 (Hyalommaanatolicumanatolicum )和亚洲璃眼蜱(Hyalommaasiaticumasiaticum)清洁幼虫和若虫饲喂于感染环形泰勒虫的牛体 ,收集饱血幼虫和若虫 ,用所孵化的若虫和成虫感染试验牛。结果显示 ,小亚璃眼蜱幼虫、若虫阶段感染 ,所发育之若虫、成虫均可传播环形泰勒虫 ;而亚洲璃眼蜱各阶段的传播试验结果均为阴性。

青海血蜱生活史的观察

对采自天然草场上的青海血蜱在实验室进行了生活史观察。结果 ,青海血蜱生活史较长 ,为三宿主蜱 ,1个生活周期为 13 8～ 2 17d ,1年 1个世代。幼蜱、若蜱的吸血期、蜕变期皆随季节和温度不同而有差异。饱血雌蜱的产卵前期和产卵期随温度不同而有差异 ,并随不同月份有明显的生殖滞育现象。另外 。

咪唑苯脲缓释剂的研制及对双芽巴贝斯虫病防治效果的评价

采用缓释剂制备技术研制了咪唑苯脲（Ｉｍｉｄｏｃａｒｂ）缓释注射液，该制剂药物包裹量大，析出量少，粒度均匀，３０００ｒ／ｍｉｎ离心１５ｍｉｎ不分层，且粘度小，便于肌肉注射使用。用该制剂对２头试验发病牛进行治疗，结果全部治愈。对实验牛双芽巴贝斯虫感染的预防试验表明，缓释剂的有效预防期至少为４个月，而咪唑苯脲水剂的有效预防期仅为３个月。在湖北省、江苏省进行了小规模区域试验，药物预防牛的发病率由原来的３．５％和１３．２％降至０。

残缘璃眼蜱人工培育及对环形泰勒虫的实验性传播

将采自内蒙古自治区的残缘璃眼蜱 (Hyalommadetritum )饲喂于牛体 ,观察了成虫、幼虫、若虫在实验室饲喂条件下的生活周期及滞育现象 ;通过蜱传播试验证实 ,残缘璃眼蜱饥饿幼虫、若虫吸入病原 ,其蜕化之若虫、成虫能将环形泰勒虫 (Theileriaannulata)传播给敏感动物 ,而幼虫阶段吸入病原 ,如若虫阶段在兔体饱血 。

补体结合试验诊断环形泰勒虫病的研究

用含环形泰勒虫的血液接种除脾牛，将红细胞中的虫体制成抗原，建立了总量为０．６ｍｌ的补体结合试验方法。人工感染牛血清中的抗体在感染后５ｄ即可检出，３０ｄ达到最高峰，持续８个月。检测４３头已知感染牛，４２头呈阳性反应，检出率为９７．５６％；３５份安全区牛血清，均呈阴性，没有假阳性反应。环形泰勒虫抗原与瑟氏泰勒虫血清有轻微的交叉反应，与双芽巴贝斯虫、牛巴贝斯虫、牛边虫、伊氏锥虫、日本分体吸虫病牛的血清无交叉反应。利用该方法对不同地区的１２７５份牛血清进行了环形泰勒虫病血清学调查，表明其敏感性、特异性良好，可用于口岸检疫。

贝尼尔缓释剂预防羊泰勒虫病的试验研究

对健康羔羊注射贝尼尔制备的缓释剂 ,注射液后 2个月和 3个月分别用感染羊泰勒虫的青海血蜱成蜱进行攻击 ,结果对照组羔羊全部发病 ,贝尼尔缓释剂注射组未发病 。

甘肃省羊泰勒虫病的调查及分布特征研究

利用病原检查、蜱感染试验和除脾激发试验相结合的方法，在甘肃省１３个地区（州、市）４５个县对２１６８只绵羊和山羊的泰勒虫病进行了调查。结果表明，甘肃省酒泉、张掖、金昌、武威、兰州、定西、天水、陇南、临夏、甘南、庆阳和平凉１２个地区３５个县均有羊泰勒虫病的分布，其传播媒介为青海血蜱，它主要孳生于阴湿灌丛草原，具有代表性的陇南和天水两地区羊泰勒虫的感染率高达４７．０％～８６．６％。

间接荧光抗体诊断牛边缘边虫病的研究

间接荧光抗体试验(IFAT)检测边缘边虫(Anaplasma marginale)感染牛血清快速准确,具有实际应用价值。利用冷藏抗原片进行的IFAT结果表明,该法具有特异性强、敏感性高等特点,人工感染牛符合率为100％;就疫区273份血清的检查,阳性率为35.2％,对安全区86份血清的检查,假阳性占3％。抗体消长实验表明,人工感染牛于第5天即可测出IFA抗体,60～70天达到高峰(1:5120),并维特一段时间,在感染后335天,抗体消失。在本试验中边缘边虫抗原与双芽巴贝西虫、牛巴贝西虫、瑟氏泰勒虫、伊氏锥虫感染牛血清均无交叉反应;与绵羊边虫感染羊血清有很强的交叉反应。

羊泰勒虫病人工感染试验

在实验室条件下用采自甘肃省临潭县的青海血蜱饥饿成蜱人工叮咬绵羊 ,使其感染泰勒虫并发病 ,观察其虫血症、临床表现、血液学变化及病理剖检变化。结果 ,试验羊普遍出现稽留热、贫血、体表淋巴结肿胀等症状 ;血红蛋白含量从 85 g/L降到40 g/L,红细胞总数从 12 .0× 10 12 降到 1.5× 10 12 ;内脏器官有不同程度地肿胀、出血 ;本病的潜伏期为 2 2—2 8d ,红细胞染虫率最高可达 39%。

咪唑苯脲缓释剂在黄牛体内的药代动力学及组织残留量测定

用紫外分光光度计测定了咪唑苯脲缓释剂在黄牛体内不同时间的血浆药物浓度及组织药物残留量。结果为该药药代动力学符合一室吸收模型、动力学方程为 :C =2 .7885 (e-0 .0 0 3 2t-e-0 .4 2 2 9t)。药代动力学参数为达峰时间Tmax为11.3 2 0h± 0 .2 95 5h ,峰浓度为 2 .80 4μg/mL± 0 .0 0 2 9μg/mL ,吸收相半衰期t( 1/2 )α为 1.64 3h± 0 .9960h ,消除相半衰期t( 1/2 ) β为 2 15 .0 61h± 2 2 .2 83 6h ,与肌肉注射咪唑苯脲注射液相比 ,半衰期延长了 2 10 .3 83h。组织含量检测结果为 :注射后 3月时脑、肝、脾、肾、心肌、肌肉中药物残留量分别为 0 .13 4 μg/g± 0 .0 3 0 2 μg/g、0 .976μg/g± 1.2 43 2 μg/g、0 .743 μg/g± 0 .1864 μg/g、0 .5 2 7μg/g± 0 .2 2 43 μg/g、0 .3 13 μg/g± 0 .172 3 μg/g和 0 .3 73 μg/g± 0 .0 42 0 μg/g ;4月时肝、脾、肾分别为 :0 .2 76μg/g±0 .0 43 7μg/g、0 .113

磷酸伯氨喹和贝尼尔对人工感染羊泰勒虫病例的治疗试验

用感染羊泰勒虫的青海血蜱叮咬健康羊人工复制羊泰勒虫病病例 6只 ,用贝尼尔和磷酸伯氨喹各治疗 2只。结果 ,磷酸伯氨喹以 1.5mg/kg体重剂量连续肌肉注射 3d ,2只羊的染虫率分别从 15 .0 %和 10 .0 %下降到 0 .5 % ,临床症状基本消失 ;贝尼尔以 5 .0mg/kg体重剂量连续肌肉注射 3d ,仅 1只羊的染虫率由 12 .0 %下降到 1.5 % ,临床症状基本消失 ,1只羊的染虫率由 12 .0 %上升到 15 .0 % ,临床症状加重。