牛至香酚对LPS免疫应激小鼠血清细胞因子含量和肠道细胞因子、紧密连接蛋白表达水平的影响

【目的】旨在探究牛至香酚是否能有效改善脂多糖(LPS)免疫应激小鼠免疫功能的损伤。【方法】将80只小鼠随机分成空白对照组、模型组和牛至香酚低、中、高剂量组。牛至香酚低、中、高剂量组分别按25、50、100 mg·kg^(-1)的剂量灌胃牛至香酚,空白对照组和模型组按10 mL·kg^(-1)的剂量灌胃橄榄油,每日1次,连续14 d。第15天时,牛至香酚组和模型组小鼠腹腔注射8 mg·kg^(-1)LPS,空白对照组注射等量生理盐水,6 h后采集血液和肠道组织,检测小鼠血清细胞因子(IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-10)含量和肠道细胞因子(IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-10)、紧密连接蛋白(ZO-1、Occludin、Claudin-1)mRNA的表达水平。【结果】(1)与空白对照组相比,模型组小鼠血清TNF-α、IL-10、IL-1β含量上升(P>0.05),IL-6含量极显著上升(P<0.01);模型组回肠和结肠组织TNF-α、IL-6、IL-1βmRNA表达水平极显著上调(P<0.01),回肠和结肠组织ZO-1 mRNA表达水平下调(P>0.05),结肠组织Occludin、Claudin-1 mRNA表达水平极显著下调(P<0.01)。(2)与模型组相比,牛至香酚试验组小鼠血清IL-6含量极显著下降(P<0.01),IL-1β含量显著下降(P<0.05);牛至香酚高剂量组血清TNF-α含量极显著下降(P<0.01);牛至香酚中、高剂量组血清IL-10含量显著上升(P<0.05)。(3)同模型组相比,牛至香酚中、低剂量组回肠组织IL-1β、TNF-α、IL-6 mRNA表达水平极显著下调(P<0.01);牛至香酚中、高剂量组回肠组织ZO-1、Occludin mRNA表达水平极显著上调(P<0.01);牛至香酚高剂量组结肠组织IL-10 mRNA表达水平极显著上调(P<0.01),TNF-αmRNA表达水平极显著下调(P<0.01),Occludin、Claudin-1 mRNA表达水平极显著上调(P<0.01)。【结论】牛至香酚通过改变小鼠血清细胞因子含量和肠道细胞因子、紧密连接蛋白mRNA的表达水平,调节LPS免疫应激小鼠的免疫功能。

Homer1b/c“支架”在CTNND2-/-自闭症模型鼠中的作用研究

目的:观察CTNND2-/-自闭症模型鼠前额叶皮层中支架蛋白荷马1b/c(homer protein homolog 1b and 1c,Homer1b/c)与三磷酸肌醇受体(inositol 1,4,5-trisphosphate receptor,IP3R)、代谢型谷氨酸受体5(metabotropic glutamate receptor 5,mGluR5)和香克3蛋白(sh3 and multiple ankyrin repeat domains 3,Shank3)蛋白相关复合体的变化;前额叶皮层中常见氨基酸的变化,发现自闭症模型鼠中可能参与疾病发生的关键靶点。方法:蛋白免疫印迹法(Western blot,WB)法检测CTNND2-/-自闭症模型鼠前额叶皮层中支架蛋白Homer1b/c、突触后密度蛋白-95(postsynaptic density protein 95,PSD-95)、突触素蛋白(synaptophysin,SYP)、囊泡谷氨酸转运体1(vesicular glutamate transporter 1,vGluT1)的表达的变化;通过免疫荧光(immunofluorescence,IF)观察Homer1b/c与IP3R、mGluR5和Shank3蛋白的表达与共定位;免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,CO-IP)技术分别观察Homer1b/c与IP3R、mGluR5或Shank3结合的变化;使用液相色谱(liquid chromatography,LC)观察前额叶皮层中常见氨基酸的变化。结果:与对照组相比,CTNND2-/-模型鼠前额叶皮层中Homer1b/c(P=0.003)、PSD-95(P=0.003)以及SYP蛋白(P=0.046)的表达均明显降低;同时,Homer1b/c与IP3R、mGluR5、Shank3蛋白相互之间结合减少;前额叶皮层中常见的兴奋性神经递质谷氨酸(glutamate,Glu)和抑制性神经递质γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)的表达无明显变化(P=0.366,P=0.355),组氨酸(histidine,His)(P=0.036),酪氨酸(tyrosine,Tyr)(P=0.030)表达则明显增高。结论:CTNND2-/-自闭症模型鼠中Homer1b/c蛋白低表达,同时Homer1b/c与IP3R、Shank3、mGluR5蛋白复合物的形成减少,并推测低表达的Homer1b/c可能是导致自闭症神经元突触异常发育的关键靶点。

混合式教学在实验动物福利教学中的应用

医学实践中会使用大量的实验动物,如何将动物福利相关知识与理念扎根于学生心中,并使之在实验课堂中遵循动物福利是当前实验动物教学中的关键点。我们针对动物福利采取线上线下混合式教学模式,通过多种教学改革手段,建立行之有效的教学策略,实现专业课程和课程思政的有机融合,从而培养学生善待动物、尊重生命的科学素养。

两种植物提取物复合物对断奶仔猪免疫功能的影响

本试验旨在研究日粮中添加两种植物提取物对断奶仔猪免疫指标的影响。选取胎次相近(3~6胎次)、体重相近、25日龄断奶的"Y x L"仔猪120头,随机分为4组,每组3个重复,每个重复10头。其中,对照组饲喂基础日粮,3个试验组分别在基础日粮上添加20 mg/kg硫酸抗敌素+100 mg/kg杆菌肽锌、400 mg/kg植物提取物复合物I、400 mg/kg植物提取物复合物Ⅱ,试验期30天。结果表明:与对照组相比,45日龄时两组植物提取物复合物组IgA、IgM、IgG、C3、C4、IL-2、IFN-γ含量均显著提高(P <0. 05),RBC总数与IL-6含量升高; 60日龄时,三个试验组IL-2、IL-6、IFN-γ显著提高(P <0. 05),两组植物提取物复合物组IgM、IgG、C3、C4含量及RBC总数均极显著提高(P <0. 01),IgA含量显著提高(P <0. 05)。上述结果表明,两组植物提取物复合物能够改善断奶仔猪的免疫功能。

牛至香酚对LPS所致的免疫应激小鼠脾脏细胞因子及核转录因子mRNA表达的影响

将80只小鼠随机分成5组(空白对照组、模型组及牛至香酚低、中、高剂量组),牛至香酚低、中、高剂量组小鼠分别按25、50、100mg·kg^-1的剂量灌胃牛至香酚,空白对照组、模型组灌胃相同体积的橄榄油,每日1次,连续14d.第15天时,牛至香酚试验组、模型组小鼠腹腔注射8mg·kg^-1脂多糖(LPS),6h后采集脾脏组织,用qRT-PCR检测小鼠脾脏细胞因子(TNF-α、IFN-γ、IL-6、IL-10、IL-1β)、NF-κB及核转录因子(T-bet、GATA-3)mRNA的表达量,研究牛至香酚对LPS所致的免疫应激小鼠脾脏细胞因子及核转录因子mRNA表达的影响.结果表明:与空白对照组相比,模型组小鼠TNF-α、IFN-γ、IL-6、IL-10、IL-1β、NF-κB、T-betmRNA的表达量提高(P<0.01),GATA-3mRNA的表达量降低(P<0.01);与模型组相比,牛至香酚低、高剂量组IL-1βmRNA的表达量降低(P<0.01),低、中、高剂量组IL-6、TNF-αmRNA的表达量降低(P<0.01、P<0.05),低、中、高剂量组IFN-γmRNA的表达量极显著或显著降低(P<0.01或P<0.05),高剂量组NF-κBmRNA的表达量降低(P<0.05),低、中、高剂量组T-betmRNA的表达量降低(P<0.05),中剂量组GATA-3mRNA的表达量提高(P<0.05).由本试验结果可知,牛至香酚通过提高或降低小鼠脾脏细胞因子、核转录因子的表达,调节免疫应激小鼠的免疫功能.

太子参茎叶多糖对小鼠免疫器官指数和血清免疫球蛋白、补体含量的影响

将60只小鼠随机分为空白对照组,太子参茎叶多糖(RPSLP)低、中、高剂量组,每组15只.空白对照组小鼠灌服0.2m L·d^(-1)蒸馏水,低、中、高剂量组小鼠分别灌服50、100和200 mg·kg^(-1)·d^(-1)RPSLP,14 d后检测各组小鼠的免疫器官指数和血清免疫球蛋白、补体含量,研究RPSLP对小鼠免疫功能的影响.结果表明:与空白对照组相比,高剂量组小鼠的脾脏指数显著提高(P<0.05),胸腺指数显著降低(P<0.05);低、中剂量组小鼠的IgA含量显著提高(P<0.05),低剂量组小鼠的IgM含量显著提高(P<0.05),高剂量组小鼠的IgM含量显著降低(P<0.05);中、高剂量组小鼠的C_3含量显著提高(P<0.05);各剂量组小鼠的IgG和C_4含量无显著差异(P>0.05).由此可见,一定剂量的RPSLP可以促进小鼠免疫器官的发育,增强免疫力.

树突棘及突触发育障碍诱发自闭症小鼠核心症状的机制

目的探讨前额叶皮层(PFC)树突棘及突触发育障碍,诱发自闭症(ASD)小鼠核心症状的机制。方法将C57小鼠按照完全随机设计,分为正常对照组(CON组),ASD模型组(VPA组),溶剂对照组(DMSO组)和Wortmannin抑制剂组(Wortmannin组),10只/组。旷场实验,青年玩耍实验和三箱社交实验评价小鼠的ASD样行为;高尔基染色观察小鼠PFC树突棘密度的变化;Western blot检测小鼠PFC信号通路相关蛋白p-PI3K、PI3K、p-AKT、AKT、p-mTOR、mTOR以及突触相关蛋白PSD95、pSyn、Syn的表达;免疫荧光染色观察PSD95、p-Syn的变化。结果与CON组相比,VPA组小鼠出现了ASD样表型,PFC总的、成熟型树突棘密度减少(P<0.05),未成熟型树突棘密度增加(P<0.01),信号通路相关蛋白p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT和p-mTOR/mTOR表达上调(P<0.05),突触相关蛋白PSD95和p-Syn/Syn表达下调(P<0.01或P<0.001)。Wortmannin能改善小鼠ASD样表型,改善树突棘发育,下调PI3K/Akt/mTOR信号通路及上调突触相关蛋白的表达。结论 PI3K/Akt/mTOR信号通路的过度激活和突触相关蛋白PSD95、p-Syn表达降低可能导致VPA诱导的ASD小鼠PFC树突棘损伤和突触发育障碍,最终导致ASD样表型。

6味中药超微粉对产蛋后期蛋鸡生产性能、蛋品质和生殖激素水平影响的研究

为了确定中药超微粉对产蛋后期蛋鸡的生产性能、蛋品质的影响,试验选择60周龄的健康蛋鸡210只,随机分为7组,每组3个重复,每个重复10只蛋鸡,分别为对照组（基础日粮）和处理组,处理组包括益母草组（基础日粮＋1%益母草超微粉）、女贞子组（基础日粮＋1%女贞子超微粉）、鸡血藤组（基础日粮＋1%鸡血藤超微粉）、连翘组（基础日粮＋1%连翘超微粉）、金荞麦组（基础日粮＋1%金荞麦超微粉）、牛大力组（基础日粮＋1%牛大力超微粉）,66周龄时测定6味中药超微粉对产蛋后期蛋鸡生产性能、蛋品质和生殖激素水平的影响。结果表明：益母草和女贞子能显著提高产蛋率（P〈0.05）,益母草能显著改善哈夫单位（P〈0.05）,女贞子能显著改善蛋黄颜色和蛋黄相对重（P〈0.05）,益母草和女贞子能显著促进促卵泡激素和雌二醇激素的分泌（P〈0.05）。