骨髓间充质干细胞接种小鼠肝癌组织对小鼠生存期的影响

目的研究骨髓间充质干细胞（MSC）接种于原发性肝癌Heps荷瘤小鼠对其生存期的影响。方法体外贴壁培养法制备昆明小鼠骨髓MSC，分离培养传代扩增，流式细胞仪鉴定MSC表型。4’，6-二脒基-2-苯基吲哚（4’，6-diamidino-2-phenylindole，DAPI）对MSC进行标记备用。随机取54只8周龄昆明小鼠，建立Heps肝癌移植瘤模型。移植瘤长径达0．5～0．8cm时，随机分为MSC组、DAPI标记MSC组（DAPI组）、生理盐水（NS）对照组（NS对照组），每组18只。MSC组及DAPI组分别在小鼠Heps肝癌移植瘤内注射2×10^6 MSC及DAPI标记的MSC，NS对照组注射同体积的NS。每组各有6只荷瘤小鼠用于观察生存期。①自注射日起，隔日测量各组小鼠肿瘤长、短径，计算注射后3、7、14及28天的肿瘤体积；②记录注射当天开始至小鼠死亡的时间，计算各组小鼠平均生存时间；③于注射后3、7、14及28天，各组分批处死3只小鼠。取肿瘤组织，石蜡包埋并切片，苏木精-伊红染色后光学显微镜观察。结果①体外贴壁法成功制备MSC，流式细胞仪对第3代MSC进行鉴定，高表达CD29（97．84％），低表达CD34（5．56％）、CIM5（7．66％）。②小鼠Heps肝癌腹水瘤细胞成功制备小鼠Heps肝癌移植瘤模型，成瘤率100％。③注射MSC后1周，MSC组及DAPI组肿瘤体积增大明显，与NS对照组差异有显著性（P〈0．05）。④MSC组平均生存期为45天（95％可信区间：33～56天），DAPI组平均生存期为34天（95％可信区间：31～37天），NS对照组平均生存期为33天（95％可信区间：28～37天）；MSC组与NS对照组差异有显著性（P〈0．05），其余组间生存期差异无显著性（P〉0．05）。⑤各组小鼠肿瘤苏木精-伊红染色：28天时，MSC组及DAPI组肿瘤组织坏死明显，范围较NS对照组更大。结论MSC可在原发性肝癌Heps荷瘤小鼠肿瘤组织内定植，MSC接种后1周内肿瘤增长迅速，小鼠生存期延长。

对比两种药物治疗乙型肝炎的效果

目的分析乙型肝炎采用富马酸替诺福韦酯和恩替卡韦治疗的效果。方法随机选择2016年4月-2018年3月就诊于我院的56例乙型肝炎患者,抽签法分组,28例试验组患者采取富马酸替诺福韦酯治疗,28例对照组患者采取恩替卡韦治疗。结果2组患者治疗前HBV-DNA水平,差异不显著(P>0.05),与对照组相比,试验组治疗后HBV-DNA(乙肝病毒DNA)水平(0.96±0.12)IgIU/mL、HBV-DNA阴转率92.86%更加理想,差异显著(P<0.05)。结论乙型肝炎采用富马酸替诺福韦酯治疗的效果较为理想。

奥曲肽治疗肝硬化上消化道出血疗效观察

目的:分析肝硬化上消化道出血开展奥曲肽治疗的疗效。方法:在我院2015年1月至2019年6月选定44例肝硬化上消化道出血病例,分组方法是数字表法,每组22例,为22例实验组患者采取奥曲肽治疗,为22例对照组患者采取垂体后叶素治疗。结果:对比对照组,明显实验组治疗总有效率、不良反应均更加理想,差异明显(P<0.05)。结论:肝硬化上消化道出血开展奥曲肽治疗,效果显著。

乙肝患者口服恩替卡韦治疗前的ALT水平对治疗效果的影响

目的考察慢性乙型肝炎患者口服恩替卡韦治疗前丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)水平对治疗效果的影响。方法选取2018年1月~2019年12月诊治的慢性乙型肝炎患者80例作为研究对象,根据血清ALT的正常值上限(upper limit of normal,ULN)倍数进行分组,A组即ALT<5×ULN(25例),B组即ALT介于5~10×ULN(25例),C组即>10×ULN(30例),比较各组患者治疗24周及48周的乙肝病毒e抗原(hepatitis B virus e antigen,HBeAg)转阴率、乙肝病毒脱氧核糖核酸(hepatitis B virus deoxyribonuclease,HBV DNA)转阴率及血清炎性水平。结果与A组相比,C组患者在48周时HBeAg转阴率和HBV DNA转阴率均显著升高(P<0.05);与B组相比,C组患者在48周时HBeAg转阴率显著升高(P<0.05);与24周相比,C组患者在48周时HBV DNA转阴率显著升高(P<0.05);与治疗前相比,各组治疗24周和48周患者血清IL-10和TNF-α水平均显著降低(P<0.05);与24周相比,各组治疗48周患者血清IL-10和TNF-α水平均显著降低(P<0.05);与A组和B组相比,C组治疗48周患者血清IL-10和TNF-α水平均显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论相对于基线ALT介于2~10×ULN,ALT>10×ULN的慢性乙型肝炎口服恩替卡韦后的临床效果较好,HBeAg和HBV DNA转阴率较高。

骨髓间充质干细胞对小鼠Heps肝癌移植瘤组织作用的研究

目的观察骨髓间充质干细胞（MSC）接种于小鼠Heps肝癌移植瘤后局部免疫效应及肿瘤细胞促血管生成因子表达的变化，探讨MSC用于肝癌治疗的可能性及安全性。方法体外贴壁培养法制备昆明小鼠骨髓间充质干细胞，流式细胞仪鉴定MSC表型。4，6-二脒基-2-苯基吲哚（DAPI）对MSC进行标记备用。随机取54只8同龄雄性昆明小鼠建立Heps肝癌移植瘤模型。移植瘤长径达0．5～0．8cm时，随机分为MSC组、DAPI组、生理盐水（NS）对照组。MSC组及DAPI组分别向小鼠Heps肝癌移植瘤内注射2×10^6 MSC及DAPI标记的MSC，观察荷瘤小鼠生存期。利用免疫组化法检测肿瘤组织中CD4^＋、CD8^＋T及血管内皮生长因子（VEGF）的表达，并行常规组织学检查。结果MSC组平均生存期为45（95％C，33～56）d，NS对照组平均生存期为33（95％C1：28—37）d，两组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。免疫组化检测发现接种MSC早期肿瘤组织CD4^＋、CD8^＋T细胞下降明显，接种MSC晚期肿瘤组织VEGF表达明显下调，组织坏死严重，荷瘤小鼠生存期延长。结论MSC可在原发性肝癌Heps荷瘤小鼠肿瘤组织内定植，MSC接种后早期降低CD4^＋T、CD8^＋T表达．抑制荷瘤小鼠T细胞免疫，促进肿瘤的生长；晚期下调VEGF表达，诱发肿瘤组织大片坏死，延长荷瘤小鼠的生存期。

骨髓间充质干细胞与肿瘤基因治疗

肿瘤基因治疗往往由于携带治疗性细胞因子的载体从而使到达肿瘤部位的效率低而受到限制。骨髓间充质干细胞（MSC）具有免疫原性低及肿瘤趋向性。近年研究发现，它通过分泌可溶性因子抑制某些恶性肿瘤的生长，同时可作为一种克隆载体转染治疗基因，通过使治疗性细胞因子在肿瘤组织浓度提高、产生某些抗癌物质而达到抑制肿瘤的作用。