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斜带石斑鱼生长激素基因重组蛋白的发酵 被引量:1
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作者 吕晴霁 潘忠超 +3 位作者 石和荣 杨慧荣 王树启 赵会宏 《水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期88-93,共6页
将含有石斑鱼生长激素基因的毕赤酵母X33进行震荡培养后,装入≥50L的自控罐中,28~30.5℃、pH 5.5~6.0、溶解氧≥30mg/L条件下发酵84h,生产石斑鱼生长激素基因重组蛋白。发酵期间,通过甲醇诱导毕赤酵母获得目的蛋白的高效表达,最后通过We... 将含有石斑鱼生长激素基因的毕赤酵母X33进行震荡培养后,装入≥50L的自控罐中,28~30.5℃、pH 5.5~6.0、溶解氧≥30mg/L条件下发酵84h,生产石斑鱼生长激素基因重组蛋白。发酵期间,通过甲醇诱导毕赤酵母获得目的蛋白的高效表达,最后通过Western Blot和SDS-PAGE聚丙酰胺凝胶电泳对目的蛋白进行定性定量检测。最终获得目的蛋白表达量约为1.5~2.0g/L,约占胞外可溶性总蛋白的16.4%。本试验用自控罐发酵生产含有斜带石斑鱼生长激素基因重组蛋白的毕赤酵母生产工艺,为实现工业化生产鱼类生长激素饵料添加剂奠定基础。 展开更多
关键词 斜带石斑鱼 生长激素基因重组蛋白 毕赤酵母 发酵
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饲料中添加复方中草药或核苷酸对虎龙杂交石斑鱼生长和免疫的影响 被引量:12
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作者 石和荣 何琪 +9 位作者 吕晴霁 彭激夫 梁添发 陈奕彬 柳小春 杨宇晴 刘苏 张海发 王庆 赵会宏 《水产学杂志》 CAS 北大核心 2019年第6期41-47,共7页
在水温27.05~31.05℃下,将初始质量为(22.36±0.07)g的虎龙杂交石斑鱼(Epinephelus fuscoguttatus♀×E.lanceolatus♂)饲养在有效养殖水体0.55m^3的桶中,每桶50尾鱼,投喂在基础饲料中添加由板蓝根、黄岑、黄芪、忍冬藤、白芷... 在水温27.05~31.05℃下,将初始质量为(22.36±0.07)g的虎龙杂交石斑鱼(Epinephelus fuscoguttatus♀×E.lanceolatus♂)饲养在有效养殖水体0.55m^3的桶中,每桶50尾鱼,投喂在基础饲料中添加由板蓝根、黄岑、黄芪、忍冬藤、白芷和甘草组成的复合中草药添加剂和由纯化胞苷酸、腺苷酸、胸苷酸、鸟苷酸、鸟苷酸和核糖核酸按等质量比例复配成的核苷酸,剂量为0g/kg(对照组)、2g/kg和4g/kg的复方中草药或4g/kg的核苷酸,饲养56d时尾静脉采血,测定血清免疫指标,研究复方中草药和核苷酸对虎龙杂交石斑鱼生长性能和免疫能力的影响。饲养结果表明:添加复方中草药或核苷酸能显著提高虎龙杂交石斑鱼的成活率(P<0.05),与对照组相比,4g/kg中草药组肥满度和脏体比显著增加(P<0.05),饲料系数降低了5.2%;4g/kg核苷酸组鱼溶菌酶活性显著高于其他组(P<0.05);添加复方中草药或核苷酸提高了虎龙杂交石斑鱼肾脏和脾脏中白细胞介素β(IL-1β)、干扰素γ(IFN-γ)和热休克蛋白70(HSP70)免疫相关基因的表达量,2g/kg中草药添加剂的增强效果更明显。综上所述,2g/kg、4g/kg的复方中草药添加量能有效促进虎龙杂交石斑鱼生长,具有一定的增强免疫效果。 展开更多
关键词 复方中草药 核苷酸 虎龙杂交石斑鱼 生长 免疫
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Dmrt基因在斜带石斑鱼胚胎发育不同阶段的表达分析 被引量:3
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作者 胡娟 林芳妹 +4 位作者 吕晴霁 王庆 杨慧荣 石和荣 赵会宏 《广东农业科学》 CAS 2019年第3期119-126,共8页
【目的】对斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)胚胎发育过程及 Dmrts 基因在此过程的表达情况进行研究,为以后深入研究Dmrts基因在石斑鱼中的功能提供基础。【方法】用自然产卵方式取得受精卵在室内恒温(24±0.5℃)、静水中孵化,在盐... 【目的】对斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)胚胎发育过程及 Dmrts 基因在此过程的表达情况进行研究,为以后深入研究Dmrts基因在石斑鱼中的功能提供基础。【方法】用自然产卵方式取得受精卵在室内恒温(24±0.5℃)、静水中孵化,在盐度 31.0 的海水中培育,整个胚胎发育过程历时约 29 h 50 min,之后进入胚后发育阶段。利用光学显微镜观察斜带石斑鱼胚胎发育过程,分别取分裂期、囊胚期、原肠期、神经胚期、器官形成期、初孵仔鱼期的胚胎保存于 RNAlater 中且每组5个平行。【结果】通过荧光定量分析 Dmrt在不同胚胎发育时期的相对表达量,结果表明,斜带石斑鱼 Dmrt 基因在胚胎发育过程中,都从卵裂期开始表达。其中 Ecdmrt1(E. coioides Dmrt1)基因在囊胚期表达水平达到峰值,卵裂期和初孵仔鱼期表达量较低,Ecdmrt1 基因在囊胚期表达是分裂期的 5.4 倍。Ecdmrt2(E. coioides Dmrt2) 基因在胚胎初期相对表达量比较平稳,而在神经胚期表达量显著上升,是分裂期的 9.2 倍;Ecdmrt2基因在初孵仔鱼中表达水平最高,是分裂期的 17.6 倍。Ecdmrt2b基因在胚胎发育过程中表达量逐渐增加,在器官形成期表达量达到峰值(P <0.05),在初孵仔鱼中表达水平又下降。Ecdmrt3(E. coioides Dmrt3)基因在胚胎发育初期表达量相对较低,在器官形成期表达量显著上升,是分裂期 7.1 倍,在初孵仔鱼中表达量达到峰值。【结论】Ecdmrt 基因在胚胎发育过程中均从卵裂期开始表达,且可能参与胚胎的组织器官发育及仔鱼发育生长。 展开更多
关键词 斜带石斑鱼 Ecdmrt1 Ecdmrt2 Ecdmrt3 胚胎发育
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