非洲猪瘟病毒抗体化学发光检测方法的建立与应用

【目的】建立一种特异性强、敏感度高、操作简捷、高通量的非洲猪瘟病毒(African swine fever,ASFV)抗体化学发光检测方法,用于早期监测ASFV的流行情况。【方法】本研究以羧基磁珠作为固相载体偶联ASFV重组p72蛋白,用适量的牛血清白蛋白(BSA)进行封闭,加入检测样品进行反应,以兔抗猪IgG-AP抗体作为酶标抗体,加入相应底物进行显色,优化各项反应条件,建立ASFV抗体化学发光检测方法,并对该方法的特异性、敏感度、重复性和检出率进行验证。【结果】建立的ASFV抗体化学发光检测方法蛋白与羧基磁珠偶联最适pH为7.0,最佳蛋白偶联浓度为5μg/mL,使用10%BSA溶液封闭效果最佳,反应磁珠终浓度为1.00 mg/mL,酶标二抗最佳工作稀释度为1∶40000。同时该方法反应时间为30 min,血清稀释度为1∶512,敏感度高于商品化ASFV抗体ELISA检测试剂盒,与猪瘟病毒、A型口蹄疫病毒、O型口蹄疫病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病病毒gE、猪伪狂犬病病毒gB抗体阳性标准血清均无交叉反应。重复性试验中,批内变异系数为4.41%~8.70%,批间变异系数为2.43%~8.07%,均<10%。通过检测120份血清样品并与商业化ASFV抗体ELISA检测试剂盒进行对比分析,商业化ELISA试剂盒检出率为96.7%,本研究建立的化学发光检测方法检出率为100%。【结论】本研究建立的ASFV抗体化学发光检测方法可用于ASFV感染后抗体水平检测,为后续试剂盒的开发提供参考。

旋毛虫免疫逃避机制的研究进展

旋毛虫病是由旋毛虫引起的一种全球分布的食源性人兽共患寄生虫病,对动物生产和人兽公共卫生安全造成严重危害。旋毛虫发育史复杂,整个生命周期都在同一宿主体内完成,为了能与宿主相互共存,其进化出各种免疫逃避机制来躲避宿主的免疫清除,从而建立长期的慢性感染。本研究从旋毛虫抗原变异、对宿主的免疫调节作用和通过形成包囊产生免疫隔离3个方面,对其免疫逃避机制进行阐述,将为深入了解旋毛虫的致病机制提供重要帮助。

新城疫病毒、禽传染性支气管炎病毒与禽流感病毒三重RT-qPCR鉴别检测方法的建立与应用

新城疫、禽传染性支气管炎与禽流感是可引起禽类呼吸道症状相似的三种急性传染病,且存在混合感染。为建立新城疫病毒、禽传染性支气管炎病毒与禽流感病毒三重RT-qPCR检测方法,该研究对比了GenBank登录的新城疫病毒(NDV)L基因、禽传染性支气管炎病毒(IBV)1a基因和禽流感病毒(AIV)NP基因,经分析选取保守序列设计了三套引物与探针,通过优化检测方法的反应体系,成功建立了可同时检测NDV、IBV和AIV的三重RT-qPCR方法,并对其特异性、敏感性和重复性进行了评估。结果表明,该方法能够特异性检测出NDV、IBV和AIV,有较好的特异性;方法对三种病毒的最低检测限均为3.02×10^(2)copies/μL,有较高的敏感性;重复性实验结果显示批内与批间变异系数均不大于1.28%,有良好的重复性。使用本研究建立的方法对102份临床咽拭子进行检测,并与常规RT-PCR进行比较,总符合率为96.6%。本研究建立的三重RT-qPCR检测方法,特异性强,灵敏度高,可用于NDV、IBV、AIV三种病毒的检测。

STING信号通路在不同宿主疾病中的研究进展

cGAS-STING是一种细胞内DNA感受器,可以针对入侵的病原体和自身免疫性疾病激活先天性免疫应答,STING通路激活可启动干扰素调节因子(IRF3)和核因子(NF-κB)。IRF3能向细胞核内转运,并触发免疫刺激基因(ISGs)和Ⅰ型干扰素(IFNs)的表达,导致免疫细胞激活并迁移到靶细胞,NF-κB能驱动炎症细胞因子的产生。cGAS-STING可导致介导炎症反应的蛋白产生,并且能在宿主抵抗入侵的病原、自身免疫性疾病、肿瘤免疫和衰老相关炎症中发挥着独特和关键的作用。该文以cGAS-STING信号通路的结构和功能作为切入点,对其在不同宿主中的调控作用进行综合论述,以期为cGAS-STING的相关研究提供理论依据和参考价值。

105株携带耶尔森菌强毒力岛大肠杆菌的毒力基因型和部分菌株毒力因子序列研究

为了解105株携带耶尔森菌强毒力岛(HPI)的大肠杆菌(E.coli)中相关毒力因子的流行情况和基因序列,根据GenBank中参考序列设计引物,采用PCR方法对广东地区养殖场来源的105分离株HPI+E.coli的fyuA、tsh、iucD、iss 4种毒力基因进行检测,统计基因类型;并对部分分离株的5种毒力基因(irp2和fyuA、tsh、iucD、iss)进行了克隆与序列分析。结果显示105株HPI+E.coli中4种毒力因子携带情况不尽一致,基因fyuA、tsh、iucD和iss的阳性率分别为55.24%、17.14%、49.52%和23.81%,105株HPI+E.coli共有13种基因型;分析表明,除iss基因与参考序列的同源性在88.0%～90.9%外,irp2、fyuA、tsh、iucD 4种基因与GenBank中参考序列的同源性高达96%以上;广东省养殖场E.coli毒力因子基因型复杂,并以基因型irp2+fyuA+iucD+和仅含irp2+的菌株分离率最高,分别为17.14%和28%。

大肠埃希菌多重耐药性的形成机制

细菌耐药(尤其多重耐药)现象的出现,给我国养殖业带来巨大的经济损失,大肠埃希菌耐药性可分为原发性和获得性。大肠埃希菌外排泵功能增强、膜通透性下降均可以导致多重耐药的产生,而质粒、整合子/基因盒系统等可移动的遗传因子在多重耐药性的传播上有着重要作用。此外,细菌生物被膜的形成使细菌对多种抗菌药物产生强大的抵抗力。文章从上述几个方面阐述大肠埃希菌产生多重耐药的形成机制,并提出相应的防控对策。

番鸭新病——花肝病的研究 Ⅱ分离毒的致弱及灭活苗的保护试验

文章通过试验找出能适合于花肝病分离毒生长和繁殖的胚 ,并检测了自制灭活苗对雏番鸭的保护作用。将病料匀浆液接种到番鸭胚、鸭胚和鸡胚上分离病毒 ,并作病毒适应性试验 ,检测继代病毒对雏番鸭的致病性 ;制备了普通灭活苗、油佐剂灭活苗、左旋咪唑灭活苗 ,并分别进行了几种灭活苗的保护试验。结果表明 :分离毒在番鸭胚上能较好地适应并继代 ,随着代次增加 ,其毒力逐步下降 ;灭活疫苗对雏番鸭的保护试验表明 ,灭活疫苗有一定的保护作用 。

淫羊藿蜂胶合剂对雏鸡免疫器官的影响

淫羊藿是具有“补肾壮阳,祛风除湿”的传统中药,现代研究证明,淫羊藿对免疫功能具有促进作用,对T细胞[1]、B细胞[2]、巨噬细胞[3]均有促进和调节作用。蜂胶(propolis)作为佐剂已广泛地应用于畜禽疫苗的生产中,具有抗菌消炎杀病毒、促进组织再生和增强免疫功能的作用[4、5...

复方免疫增强剂对鸡新城疫和传染性腔上囊病疫苗免疫效果的影响

以黄芪、灵芝等中药与左旋咪唑、维生素E组成 2种复方免疫增强剂A方和B方 ,Ⅰ组雏鸡用A方拌料饲喂 ,Ⅱ组雏鸡用B方给予颈部皮下注射 ;检测了 7、14、2 8和 5 4d的ND HI值 ;5 4d的IBD AGP值 ;7d和 2 8d的免疫器官指数 ;并检测了Ⅱ组 46d的外周血淋巴细胞活性。结果显示 ,2种制剂均在不同程度上提高ND和IBD疫苗的免疫反应 ,促进免疫器官的发育 ,增强了T淋巴细胞的活性。

番鸭新病—花肝病的研究 Ⅰ.分离毒的致病性及感染途径试验

番鸭花肝病是近年流行的一种新的番鸭疫病 ,其特征性病变是死亡番鸭的肝、脾、小肠等部位出现灰白色的坏死点。本文自广东省主要疫区分离到几株病毒 ,这些病毒在番鸭胚上可继代繁殖 ,其胚液可使番鸭发病。不同途径感染试验表明该病毒通过肌肉注射、爪垫部注射、口服、同居感染均可使番鸭发病和死亡 ,并具有典型病变。分离毒不能使半番鸭、本地鸭、鸡发病。

中药对鸡传染性腔上囊病和鸡新城疫疫苗的免疫增强作用效果试验

给经ND和IBD疫苗常规免疫的 5 4日龄岭南黄鸡饮服红参、灵芝、黄芪、花旗参等中药制剂 ,10d后测定血清ND和IBD抗体 ,并在 64和 74日龄时称重。结果 :与对照组比较 ,ND和IBD血清抗体和体重均有不同程度的提高。

蛋鸡群沙门氏菌的监测

[目的]了解蛋鸡场沙门氏菌的感染情况。[方法]采用沙门氏菌抗原和抗体检测方法对2012~2015年采集的广东省蛋鸡场样品进行检测。采用ELISA方法对1784血清样品进行了肠炎沙门氏菌和1 387份血清样品进行了鼠伤寒沙门氏菌抗体检测;采用凝集试验方法对1 391份血清样品进行了鸡白痢沙门氏菌抗体检测;采用细菌培养、PCR方法对采自广东省的活鸡/死鸡、环境拭子等1 458份样品进行了沙门氏菌检测。[结果]肠炎、鼠伤寒、鸡白痢3种血清型沙门氏菌抗体的阳性率分别为16.70%、10.09%和1.01%;沙门氏菌抗原检测的阳性率为1.65%。[结论]蛋鸡群中存在肠炎、鼠伤寒、鸡白痢等3种沙门氏菌不同程度的感染,但是蛋鸡群的总体感染率不高。

樱桃谷鸭感染猪霍乱沙门氏菌的分离鉴定

某地樱桃谷鸭群发生一种高发病率、高死亡率的传染病 ,其临床表现为沉郁、不食、下痢、脚软、发热等 ,病变特征以内脏器官充血、出血为主。本文从鸭体内分离到 2株细菌 ,经鉴定为猪霍乱沙门氏菌 ;并进行了毒力试验和药敏试验 ,结果 2菌致病性均很强 ,对氯霉素、卡那霉素。

携带耶尔森强毒力岛的大肠埃希菌耐药性及其对雏鸭的致病性试验

为了解105株动物源携带耶尔森强毒力岛的大肠埃希菌耐药状况和致病性,分别对各分离菌进行28种抗菌药物的敏感性测定,并选择不同毒力基因型的10株大肠埃希菌进行雏鸭的致病性试验。结果表明,分离菌对四环素、多西环素、氨苄西林、阿莫西林、复方磺胺甲口恶唑、链霉素耐药性较高,耐药率均在80%以上;敏感率在80%以上的药物有头孢他啶、氨苄西林/舒巴坦、阿米卡星、头孢西丁、氨曲南、头孢曲松、奈替米星;其他药物均显示较高的耐药率;105株大肠埃希菌中有87种耐药谱。10株大肠埃希菌对雏鸭的致病性均很强,且同样的基因型表现出的致病特性不一致。结果说明大肠埃希菌分离菌株耐药性严重和致病性强,提示防治大肠埃希菌病的重要性。

鸭疫里氏杆菌病的研究进展

鸭疫里氏杆菌病已成为危害养鸭业的重大疾病之一。该病呈急性或慢性败血症 ,以纤维性心包炎、肝周炎、气囊炎、干酪性输卵管炎为和脑膜炎为特征。该病病原为鸭疫里氏杆菌 ,血清型复杂 ,营养要求较高。近一个世纪 ,特别是近二十多年来 ,各国学者对它进行了许多较为深入的研究 ,取得了很大进展。本文对该病的病原学、流行特点、诊断及防制等方面的研究进行了较为详细的综述。这对如何进行该病的诊断。

我国禽病流行新动态

近 1 0年来 ,1 0余种新禽病在我国出现 ,我国兽医科技工作者对其进行了研究与报道。这些疾病大多为急性、烈性传染病 ,危害较大 ,且大多病原没有确定。本文介绍了在我国出现并流行、危害养禽业健康发展、可能尚未引起人们足够重视的几种新病 ,如鸡大肝大脾病、雏鹅新型病毒性肠炎、鹅副黏病毒、鸭流行性出血症、番鸭花肝病等 ,并对其流行特点、临诊症状、病原特性、病理变化等研究现状作一简要叙述 ,以期引起同行重视 。

鸭疫里默氏杆菌菌种保存试验及蜂胶苗的保护试验

鸭疫里默氏杆菌感染已成为危害养鸭业最严重的 细菌性疾病之一，其病原生长营养 要求较高，普通方法不易保存；目前防制该病主要采用药物和（或）疫苗。本文对几种保存 方式鸭疫里默氏杆菌的活力和毒力进行初步试验，并检测了自行研制的蜂胶苗的保护率。结 果表明将带菌鸭血放于－２０ ℃冰箱，鸭疫里默氏杆菌的活力和毒力可保持１７个月以上； 应用研制的蜂胶苗对雏鸭免疫两次可获得较好的保护力，达１００％（１０／１０）。