β-内酰胺酶抑制剂复合抗菌药物的使用量与产ESBLs细菌分离率关系研究

目的 探讨临床上产超广谱 β 内酰胺酶 (ESBLs)细菌分离率的增加 ,是否与含 β 内酰胺酶抑制剂的复合β 内 酰胺类抗菌药物使用量有关 ,为抗菌药物的规范合理使用提供依据。方法 用SPSS10 0统计软件包 ,统计分析 1998～ 2 0 0 2年 ,每年含β 内酰胺酶抑制剂的复合 β 内酰胺类抗菌药物使用量与产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌分离率间的相关性关系。结果 5年来含 β 内酰胺酶抑制剂的复合 β 内酰胺类抗菌药物使用总量从16 5 4kg/年增加到 15 6 86 8kg/年 ,增加了 84 8 4 % ;培养总样本数从 10 897份增加到 185 6 7份 ,增加了 70 4 % ;两者间相关系数r =0 884 ,P <0 0 5 ;抗菌药物使用总量与细菌分离株数间的相关系数r =0 4 4 9,P >0 0 5 ,与产ESBLs细菌总分离率间的相关系数r =0 933,P <0 0 5 ;年平均每份送检样本中此类抗菌药物的使用量与细菌分离株数间的相关系数r =0 389,P >0 0 5 ,与产ESBLs细菌总分离率间的相关系数r =0 889,P <0 0 5。结论 产ESBLs细菌分离率的增加与含 β 内酰胺酶抑制剂的复合 β 内酰胺类抗菌药物使用总量及年平均每份送检样本中此类抗菌药物的使用量呈正相关 ,提示临床使用抗菌药物应更具合理性。

1997～2002年洋葱伯克霍尔德菌的临床分离与耐药性变迁

目的 了解本地区洋葱伯克霍尔德菌在临床的分离与耐药性变迁情况 ,以利于临床抗感染的预防与治疗。方法 用WHONET5软件统计分析浙江省人民医院 1997～ 2 0 0 2年洋葱伯克霍尔德菌临床分离菌株在各病区、样本中的分布及耐药性的变迁情况。结果 分离率从 1977年的 0 11%上升到 2 0 0 2年的 0 37% ;6年中以监护病区分离菌株最高占总分离菌株的 4 8 4 % ,其次为呼吸科病区占 10 9% ;在送检样本中以呼吸道标本分离菌株数最高占总分离数的 6 6 1% (痰液 +咽拭子 ) ,其次为血液占 10 4 %。对 2 6种抗生素的耐药性分析示 ,多数抗菌药物其耐药性均大于 5 0 % ;小于 5 0 %只有 6种 ,哌拉西林或他唑巴坦 (4 0 5 %～ 4 2 9% ) ,头孢哌酮或舒巴坦 (33 %～ 4 9 1% ) ,头孢吡肟(4 0 1%～ 4 6 % ) ;环丙沙星 (2 8 6 %～ 4 6 2 % ) ;左氟沙星 (33 3%～ 4 6 4 % ) ,复方新诺明 (2 8 6 %～ 4 2 9% )。结论 洋葱伯克霍尔德菌在临床的分离率在增加 ,已成为医院内感染的主要病原菌之一 ,该菌对多数抗菌药物具有较高耐药性 ,且有不断增加趋势 。

1997～2001年耐甲氧西林葡萄球菌临床分离率及耐药性分析

目的 回顾分析耐甲氧西林葡萄球菌 (MRS)在临床的分离与耐药情况 ,了解本地区此类细菌的分离及耐药趋势。方法 统计分析 5年来医院内MRS的分离及耐药情况。结果 MRS从 1997年 5种 (5 1株 )增至2 0 0 1年 13种 (345株 )。 1997～ 2 0 0 1年 ,耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌 (MRSA)与耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌 (MRS CN)对万古霉素耐药率为 0 ,对复方磺胺甲唑的耐药率分别为 6 .2 %～ 2 1.1%、2 2 .4 %～ 36 .4 % ;对其他种类抗生素耐药率均在 5 5 %以上 ;耐药率增长最快的为环丙沙星 :MRSA 5 1.4 %～ 88.6 % ;MRS CN5 6 .3%～ 88.8%。mecA基因检出率 :MRSA 98.8%～ 10 0 .0 % ;MRS CN 93.8%～ 99.0 %。结论 MRS在临床的分离率逐渐增加 ,其对非 β 内酰胺类抗生素的耐药率也在不断增加。临床在治疗葡萄球菌引起的感染时 。

乙酸钙-鲍氏不动杆菌临床分离与耐药性的7年监测

目的了解1998～2004年乙酸钙-鲍氏不动杆菌在临床标本中的分离情况及其耐药趋势,为临床感染的预防和治疗提供参考资料.方法回顾分析1998～2004年间所有标本中乙酸钙-鲍氏不动杆菌的分离率,菌株在标本和病区的分布以及对14种抗菌药物的耐药率.结果乙酸钙-鲍氏不动杆菌的分离率有逐年升高的趋势,从1998年的0.18%增至2004年的1.48%;其在呼吸道标本的分离率最高（70.58%）,其次是尿液（9.42%）、血液（4.63%）;病区分布以重症监护室最高（47.28%）,乙酸钙-鲍氏不动杆菌对14种抗菌药物的耐药率,1998年仅有氨曲南＞50%,而到2004年仅头孢哌酮/舒巴坦的耐药率＜50%,其他13种均＞50%;其耐药率均呈递增的趋势,耐药性增幅列前3位分别为：头孢他啶11.1%～88.9%、亚胺培南0～64.8%、复方新诺明0～64.0%.结论乙酸钙-鲍氏不动杆菌的临床分离率在增加,其对多数抗菌药物有较高的耐药性,且耐药率呈逐年上升趋势,尤其是对亚胺培南耐药率的快速增长,应引起临床抗感染治疗的高度重视.

荧光定量RT-PCR法检测胃癌患者腹腔洗出液中CEA-mRNA含量的临床意义

目的探讨用荧光定量RT-PCR法检测胃癌患者腹腔洗出液中癌胚抗原mRNA(CEA-mRNA)含量的临床意义。方法采用荧光定量RT-PCR法检测98例胃癌患者及10例胃溃疡患者(对照组)手术中病灶切除前后腹腔洗出液中CEA-mRNA的含量,对不同病期及切除前后所测得的CEA-mRNA含量进行统计分析。结果本法可检测的下限约为10copies?ml,上限约为1.0×108copies?ml。检测所得荧光信号基线的循环数(CT值)与CEA-mRNA拷贝数对数值的相关系数为-1.0,错误率为0.0731。对照组腹腔洗出液CEA-mRNA的含量少于10copies?ml。胃癌患者腹腔洗出液中CEA-mRNA的含量病灶切除前为(0.0～5.62)×106copies?ml,几何均数为(172.11±63.07)copies?ml;切除后(256.4～4.67)×107copies?ml,几何均数为(606.32±76.21)copies?ml,两组的差别有显著性意义(P=0.008);切除前Ⅰa+Ⅰb期与Ⅱ期、Ⅱ期与Ⅲa+Ⅲb期、Ⅲa+Ⅲb期与Ⅳ期比较,其CEA-mRNA含量的差别均有显著性意义(P=0.007、0.015、0.027);同样,切除后各期比较,其差别也均有显著性意义(P=0.004、0.012、0.023)。切除前后未侵及浆膜与侵及浆膜者比较,其CEA-mRNA含量的差别有显著性意义(P=0.0008、0.0007);切除前后有淋巴结转移者与未转移者比较,其CEA-mRNA含量的差别有显著性意义(P=0.045、0.044);

铜绿假单胞菌可导致聚合酶链反应检测结核杆菌假阳性

铜绿假单胞菌可导致聚合酶链反应检测结核杆菌假阳性吕火祥，刘建栋，陈霞，许立，王爱萍（浙江省人民医院，杭州３１００１４）用ＰＣＲ技术对结核杆菌ＤＮＡ片段的扩增，可提高阳性检出率，已颇受临床和实验室关注，但此方法亦不同程度地存在假阳性问题。我们也发现铜绿...

第三代头孢菌素使用与耐甲氧西林葡萄球菌检出率关系的研究

目的 了解医院内分离的耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)耐药性增高是否与第三代头孢菌素的使用增加相关,为抗生素的规范使用提供依据。方法 回顾1997年～2001年间,每年10月份MRS的分离率及全院抗生素及第三代头孢菌素的使用情况,用相关系数表示两者的相关性。结果 1997年～2001年抗生素的总使用率下降,由1997年的79.6％降到2001年的69.0％,而第三代头孢菌素的使用率显著增加,由1997年的8.61％到2001年的18.66％;MRS的增加与抗生素的总使用率无关,而与第三代头孢菌素的使用呈正相关(r=0.9511,P<0.01)。结论 虽然抗生素的总使用率下降,但第三代头孢的使用增加,MRS的增加与第三代头孢菌素使用呈正相关。要降低MRS的分离率,应减少第三代头孢菌素的不合理使用。

肺炎克雷伯菌16S rRNA甲基化酶基因及氨基糖苷类修饰酶基因研究

目的了解临床分离的肺炎克雷伯菌(Klebsiella pnenmoniae,Kpn)氨基糖苷类耐药基因携带状况。方法对临床分离的84株Kpn16S rRNA甲基化酶基因,armA、rmtA、rmtB、rmtC、rmtD、npmA;氨基糖苷类修饰酶基因,aac(3)-Ⅰ、aac(3)-Ⅱ、aac(6’)-Ⅰb、aac(6’)-Ⅱ、ant(3")-Ⅰ、ant(2")-Ⅰ用PCR法检测。结果84株菌中检出16S rRNA甲基化酶基因rmtB阳性4株(4.8%);氨基糖苷类修饰酶基因aac(3)-Ⅱ、aac(6’)-Ⅰb、ant(3")-Ⅰ阳性分别为8株(9.5%)、10株(11.9%)、8株(9.5%)。结论从84株Kpn菌中发现16S rRNA甲基化酶基因rmtB及氨基糖苷类修饰酶基因aac(3)-Ⅱ、aac(6’)-Ⅰb、ant(3")-Ⅰ,临床应对此类菌株引起重视。

哌拉西林/他唑巴坦对三种非发酵菌体外敏感性检测方法的比较

目的评价不同方法检测无CLSI解释标准的3种非发酵菌———嗜麦芽窄食单胞菌、洋葱伯克霍尔德菌、脑膜脓毒性黄杆菌对哌拉西林/他唑巴坦的耐药性情况,以利于检测方法的选择应用。方法同时用标准K-B法、VITEK-32配套的药敏检测卡GNS-143法、E-test试条法检测临床分离的139株无CLSI解释标准的非发酵菌对哌拉西林/他唑巴坦的敏感性,并对3种方法相互间的符合情况进行比较。结果3种方法检测80株嗜麦芽窄食单胞菌,36株洋葱伯克霍尔德菌,23株脑膜脓毒性黄杆菌对哌拉西林/他唑巴坦的敏感率分别为:46.3%、82.5%、45.0%,77.8%、44.4%、52.8%,69.6%、52.2%、56.5%;耐药率分别为:32.5%、10.0%、48.8%,19.4%、38.9%、38.9%,17.4%、39.1%、21.7%。139株细菌3种方法间的符合情况:K-B法与VITEK法比较,完全符合率为51.1%、部分符合率为22.3%、完全不符合率为26.6%;K-B法与E-test试条法比较,三者分别为61.9%、15.8%、22.3%;VITEK法与E-test试条法比较,三者分别为56.1%、16.6%、27.3%。结论不同的方法检测同一种细菌对哌拉西林/他唑巴坦的药敏结果有较大不同,各方法间的可比性较差。嗜麦芽窄食单胞菌K-B法与E-test试条法符合性好于VITEK法,而其他2种细菌VITEK法好于K-B法。建议临床实验室对此类细菌的药敏检测仅报告实验检测结果,而不报药敏检测解释结果。

聚合酶链反应对尖锐湿疣组织中HPV分型检测的意义

聚合酶链反应对尖锐湿疣组织中ＨＰＶ分型检测的意义吕火祥钱奕红刘建栋（浙江省人民医院，杭州３１００１４）人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）６、１１、１６、１８型常引起人类生殖器感染，其中ＨＰＶ１６、１８型具有潜在的致癌性。国内外对ＨＰＶ的检测在尖锐湿疣组织中的型别...

脂肪乳剂微量快速定量检测C-反应蛋白

C 反应蛋白（CRP）在Ca2+存在下可与脂肪乳剂微粒的某些成份（磷酸胆碱等）结合而凝集,使溶液中溶质间的空隙增大,吸光度下降,在一定的光径内,其吸光度下降程度与溶液中CRP 的量成正比.

广泛药物耐药铜绿假单胞菌与鲍曼不动杆菌对多粘菌素B的MIC值分布调查

目的通过检测多粘菌素B体外对广泛药物耐药(extensive drug-resistant,XDR)的铜绿假单胞菌与鲍曼不动杆菌的最低抑菌浓度(MIC)的分布上,来评价其对此类细菌的抗菌活性,为临床治疗、控制感染提供依据。方法用纸片扩散法检测临床分离的288株细菌(铜绿假单胞菌130株,鲍曼不动杆菌158株)对临床常见的25种抗菌药物的敏感性以确定其中广泛药物耐药菌;用E-试验检测多粘菌素B及临床常用11种抗菌药物MIC值,分析菌株的MIC值分布情况。结果 288株细菌经K-B法确认均为XDR菌株,对临床常用的11种抗菌药物的敏感性均低于15%;对多粘菌素B的MIC值均≤2μg/ml;130株铜绿假单胞菌的MIC值分布情况为0.125μg/ml1株、0.19μg/ml2株、0.25μg/ml9株、0.38μg/ml37株、0.5μg/ml48株、0.75μg/ml19株、1.0μg/ml11株、1.5μg/ml4株,MIC50为0.5μg/ml,MIC90为1.0μg/ml;158株鲍曼不动杆菌的MIC值分布情况为0.125μg/ml1株、0.19μg/ml3株、0.25μg/ml12株、0.38μg/ml45株、0.5μg/ml56株、0.75μg/ml21株、1.0μg/ml13株、1.5μg/ml7株、2.0μg/ml1株,MIC50为0.5μg/ml,MIC90为1.0μg/ml。结论多粘菌素B体外对广泛药物耐药铜绿假单胞菌与鲍曼不动杆菌均敏感,本地区临床未发现有多粘菌素B耐药株;但存在敏感区域内的高MIC值菌株,应引起临床重视。

ATB-FUNGUS 3酵母样菌抗真菌药物敏感性试验与ROSCO纸片扩散法及标准的CLSI M27-A2方法比较

目的探讨商品化的真菌药物敏感性检测ATB-FUNGUS3(ATB-F3法)及ROSCO纸片扩散法(Rosco法)与标准的CLSIM27-A2(标准MIC法)方法的符合率。方法分别用法国生物梅里埃的ATB-F3法和丹麦Rosco法及标准MIC法平行检测5-氟胞嘧啶、两性霉素B、氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑5种抗真菌药物对184株临床分离的念珠菌的体外药物敏感性,并进行比较。结果ATB-F3法与标准MIC法检测5-氟胞嘧啶、两性霉素B、氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑5种抗真菌药物的符合率分别为100%、100%、96.2%、92.9%、96.7%;Rosco法与标准MIC法的符合率分别为85.9%、91.8%、94.6%、89.7%、90.2%;ATB-F3法与ROSC法的符合率分别85.9%、91.8%、94%、87.5%、88%。结论ATB-F3法及Rosco法与MIC法均有很高的符合率,而以ATB-F3法更高;两种商品化的方法间符合率较好,临床实验室均可选用,但宜选用MIC法或ATB-F3法以尽可能减少误差。

无CLSI解释标准非发酵菌对哌拉西林/他唑巴坦敏感性三种检测方法的比较

目的评价不同方法检测无CLSI解释标准的非发酵菌对哌拉西林/他唑巴坦的耐药性情况,以利于检测方法的选择应用。方法同时用标准K-B法、VITEK-32配套的药敏检测卡GNS-143法、E-test试条法检测临床分离的139株无CLSI解释标准的非发酵菌对哌拉西林/他唑巴坦的敏感性,并对三种方法相互间的符合情况进行比较。结果三种方法检测80株嗜麦芽窄食单胞菌,36株洋葱伯克霍尔德菌,23株脑膜败血性黄杆菌对哌拉西林/他唑巴坦的敏感率分别为:46.3%、82.5%、45.0%、77.8%、44.4%、52.8%、69.6%、52.2%和56.5%;耐药率分别为:32.5%、10.0%、48.8%、19.4%、38.9%、38.9%、17.4%、39.1%和21.7%。139株细菌三种方法间的符合情况:K-B法与VITEK法比较,完全符合率51.1%、部分符合率22.3%和完全不符合率26.6%;K-B法与E-test试条法比较,三者分别为61.9%、15.8%和22.3%;VITEK法与E-test试条法比较,三者分别为56.1%、16.6%和27.3%。结论不同的方法检测同一种细菌对哌拉西林/他唑巴坦的药敏结果有较大不同,各方法间的可比性较差。嗜麦芽窄食单胞菌K-B法与E-test试条符合性好于VITEK法,而其他二种细菌VITEK法好于K-B法。建议临床实验室对此类细菌的药敏检测仅报告实验检测结果,而不报药敏检测解释结果。

洋葱伯克霍尔德菌临床分离与耐药性的6年监测

目的了解本地区洋葱伯克霍尔德菌在临床的分离与耐药性变迁情况,为临床抗感染提供合理用药依据。方法根据我院1997年~2002年洋葱伯克霍尔德菌临床分离菌株在各病区样本中的分布及耐药性的变迁情况,用WHONET 5软件统计分析。结果洋葱伯克霍尔德菌在本院多病区所采样本中的分离率从1997年的0.11%增加到2002年的0.50%;6年中分离菌株以监护病区最高,占48.4%,其次为呼吸科病区占10.9%;以呼吸道标本菌株数最高,占66.1%(痰液+咽拭子),其次为血液占10.4%。对26种抗生素的耐药性分析显示,多数抗菌药物其耐药性均大于50%;少于50%只有6种,哌拉西林/他唑巴坦(40.5%~42.9%),头孢哌酮/舒巴坦(33.0%~49.1%),头孢吡肟(40.8%~46.4%),环丙沙星(28.6%~46.2%),左氟沙星(33.3%~46.4%),复方新诺明(28.6%~42.9%)。结论洋葱伯克霍尔德菌在临床的分离率在增加,已成为医院内感染的主要病原菌之一,本菌对多数抗菌药物具有较高耐药性,且有不断增加趋势,临床抗感染治疗应以分离菌株的体外抗菌药物敏感性为依据。

临床分离肺炎克雷伯菌Ⅰ类整合子作用机制的研究

目的研究Ⅰ类整合子在肺炎克雷伯菌中的分布、结构及其在介导耐药中的作用。方法应用多重聚合酶链反应(mult-PCR)方法检测88株临床分离菌株的整合酶基因,对其阳性菌株可变区扩增产物进行测序分析;采用微量稀释法测定14种抗生素对试验菌株的敏感性。结果在其中38株肺炎克雷伯菌DNA上检测到Ⅰ类整合子,阳性率43.2%。所携带的耐药基因盒绝大多数为aadA2和dfr17,整合子阳性组耐药率明显高于阴性组。结论目前临床分离的肺炎克雷伯菌耐药性强,并广泛存在Ⅰ类整合子。菌株携带基因盒和耐药表型之间有较好的对应关系,基因盒介导了细菌耐药性。耐药基因盒是整合子阳性菌株对氨基糖苷类耐药的主要原因。

联合培养法在解脲脲原体及人型支原体分离及药物敏感性检测中的应用

目的探讨固体培养法与液体的抗菌药物敏感性检测法联合应用于解脲脲原体与人型支原体检测的临床意义。方法将临床样本直接接种于支原体分离培养的固体培养基及液体稀释法抗菌药物敏感性检测培养基进行抗菌药物敏感性检测。结果在240例临床送检的样本中检出76例解脲脲原体,检出率31.7%,人型支原体29例,检出率12.1%,同时检出两种支原体18例,检出率7.5%;固体培养基中肉眼可见细菌菌落生长且液体培养基变红3例,占1.25%。对9种抗菌药物敏感性检测,解脲脲原体对环丙沙星、氧氟沙星耐药率较高,分别为78.9%、64.5%;对阿齐霉素、红霉素、交沙霉素、克拉霉素、磷霉素、强力霉素、四环素较低,分别为3.9%、3.9%、0.0%、2.6%、0.0%、1.3%、5.3%;人型支原体对红霉素、环丙沙星、氧氟沙星、克拉霉素、阿齐霉素耐药率较高,分别为100%、82.6%、82.8%、68.8%、48.3%;对交沙霉素、磷霉素、强力霉素、四环素较低,分别为17.2%、17.2%、0.0%、13.8%。结论联合培养法可准确地培养与鉴定解脲脲原体及人型支原体,并排除单纯液体培养中细菌污染造成的假阳性反应。

泛耐药产酸克雷伯菌的耐药基因研究

目的了解1株对临床常用18种抗菌药物(包括亚胺培南、美洛培南)均耐药的产酸克雷伯菌(Klebsiella oxytoca,Kox)所携带的耐药基因状况。方法对该株Kox菌进行了9类耐药基因的PCR法检测,包括β-内酰胺酶基因blaTEM,blaSHV,blaLEN,blaOKP,blaCTX-M-1、2、9群,blaOXA-1、2、10群,blaCARB,blaPER,blaVEB,blaGES,金属β-内酰胺酶基因blaIMP、blaVIM、blaKPC,AmpC酶基因blaDHA、blaACT/MIR、blaCMY/MOX、bla CMY/LAT,氨基糖苷修饰酶基因aac(3)-Ⅰ、aac(3)-Ⅱ、aac(6’)-Ⅰb、aac(6’)-Ⅱ、ant(2")-Ⅰ、ant(3")-Ⅰ,喹诺酮类耐药基因qnrA,TMP耐药基因dfrA1、dfrA17,消毒剂磺胺耐药基因qacE△1-sul1,整合子遗传标记基因intⅠ1、intⅠ2、intⅠ3,转座子遗传标记基因tnpA、merA,共计36种。结果本株Kox菌共检出9种耐药基因,分别为β内酰胺酶基因blaTEM,blaSHV,金属β-内酰胺酶基因blaKPC-2,氨基糖苷修饰酶基因aac(3)-Ⅱ,ant(3")-Ⅰ,喹诺酮类耐药基因qnrA,TMP耐药基因dfrA17,消毒剂磺胺耐药基因qacE△1-sul1,整合子遗传标记基因intⅠ1。结论在本株泛耐药Kox菌中发现了少见的blaKPC-2金属β-内酰胺酶基因,本菌对18种抗菌药物的耐药可能与其同时携带有多种耐药基因有关,临床应对此类菌株引起重视。