小型猪经脉区皮肤微血管的三维重建

目的利用小型猪后肢膀胱经经脉线区皮肤连续组织切片,通过三维重建软件构筑后肢膀胱经经脉线区微血管三维图像。方法 3月龄中国农业大学Ⅲ系小型猪,经络定位仪定位后肢膀胱经。在第3腰椎与荐骨之间取1.2cm×0.5cm×0.5cm中间标有经脉线的皮肤。在取材皮肤的经脉线正下方真皮网状层与皮下组织交界处(距离表皮层约1mm),用刀片开一"V"型凹槽作为定位标记,制作经脉线皮肤垂直切面连续切片(厚10μm),每隔1张取1张,共取500张,进行微血管免疫组织化学显色。以定位标记为参照,采集二维图像,使用Neuro软件进行三维重建。结果构筑出的经脉线区微血管的图像具有立体感,可任意剖割并从不同方向显示其内部微血管构筑情况。结论利用小型猪经脉线区皮肤免疫组织化学微血管显色的连续组织切片,结合计算机三维重建技术,能够进行经脉线区皮内微血管的三维构筑,并可从任意角度观察。

大鼠脑微血管内皮细胞的体外培养及鉴定

探讨大鼠脑微血管内皮细胞的体外培养方法,为研究猪链球菌引起脑膜炎的致病机理打下基础。采用脑组织匀浆、二次过筛及酶消化技术分离大鼠脑微血管段,对分离的脑微血管内皮细胞进行了体外培养、形态学观察、免疫荧光鉴定及生长曲线的MTT法测定。结果表明:倒置显微镜下,细胞具有单层"铺路石样"排列的典型特征,免疫荧光检测第Ⅷ因子相关抗原呈阳性,成功建立了大鼠脑微血管内皮细胞的体外培养方法。