体外抗猪轮状病毒8种藏药的初步筛选

为筛选具有抗病毒作用的藏药,对前期研究发现具有潜在抗病毒作用的诃子、甘青乌头、矮紫堇、甘青青兰、川西獐牙菜、短穗兔耳草、铁棒锤、瑞香狼毒等8种藏药的提取物进行了体外抗病毒研究。用水提法对8种藏药进行处理,通过浓缩、真空干燥后配制成不同浓度的水提物,以猪轮状病毒(PoRV)为受试对象,利巴韦林为对照。采用CCK-8测定药物安全浓度,用细胞病变效应(CPE)观察、实时荧光定量PCR、间接免疫荧光相结合的方法测定8种药物体外抗猪轮状病毒作用。结果表明,诃子、甘青乌头、甘青青兰、短穗兔耳草、川西獐牙菜、铁棒锤、瑞香狼毒、矮紫堇8种藏药提取物和利巴韦林药物对MA-104细胞的最大安全浓度分别为0.02、0.49、0.98、2.60、7.81、15.63、1.30、31.25、0.20 mg/mL。在药物与病毒预先作用的方式下,川西獐牙菜、瑞香狼毒、短穗兔耳草、铁棒锤、诃子5种藏药提取物和利巴韦林对猪轮状病毒的最大抑制率均超过50%,分别为87.37%、91.55%、86.19%、91.88%、63.74%、96.33%,能有效减轻病毒感染所致的细胞病变效应,其余3种藏药提取物对PoRV致细胞病变的最大抑制率均低于20%。对PoRV最大抑制率超过50%的5种藏药进一步试验发现,5种藏药提取物显著降低了病毒的复制增殖能力(P<0.001),有效减少了病毒在MA-104细胞的感染。研究结果证明5种藏药提取物对PoRV具有一定的抗病毒作用,为抗病毒藏药的筛选和机制研究提供了基础资料。

脂肪间质干细胞修复犬关节软骨损伤的研究

以手术方法建立2对共4处犬关节软骨组织损伤;使用无血清细胞培养液为对照,以标记有绿色荧光蛋白的犬脂肪间充质干细胞进行移植治疗试验。病理模型犬进行常规饲养15周后,对病理模型进行取样并系统检测。结果显示,试验组较对照组有更大面积和体积的新生关节软骨组织。新生软骨样组织呈绿色荧光蛋白(GFP)阳性。试验组与对照组的新生组织HE染色显示,试验组的细胞外基质染色较对照组更加均一,基质切面更加平整光滑。透明软骨的标志性基因COL2a1的免疫荧光染色显示,试验组可见较强的COL2a1阳性染色,而对照组仅有少量微弱的阳性染色。实时荧光定量PCR检测结果显示,试验组的COL2a1含量显著高于对照组(P<0.05)。试验结果表明,直接移植原代犬脂肪间充质干细胞到关节腔可有效修复犬软骨组织缺损,为干细胞治疗临床软骨组织损伤提供了科学依据。

用新型间充质干细胞制剂治疗猫创口延迟愈合

创伤后皮肤破裂或手术后皮肤创口都可能导致伤口(或切口)延迟愈合。身体是一个不断代谢的有机体,有自己的调节机制,皮肤损伤后的愈合时间也会遵循同样的规律。如果伤口愈合过程受到负面影响,则可能导致伤口延迟愈合。伤口出现延迟愈合的原因包括感染、药物、异物存留、损伤严重、营养不良、疾病、组织对合不良、年龄因素、皮肤缺损、自体敏感、脂肪液化、皮下积液等。研究建立了一种直接注射的间充质干细胞(MSCs)制剂,用于治疗1例由自体敏感导致的猫创口延迟愈合。治疗后21 d,伤口完全愈合。MSCs的局部植入成功促进了溃烂伤口的皮肤再生,并促进了毛发再生。研究结果为进一步推动干细胞治疗宠物疾病提供了切实可行的治疗剂型并提供了良好的治疗案例。

兽医专业硕士研究生课程案例教学的探索——以家畜疾病诊疗与案例分析为例

为了使兽医专业硕士研究生能够从课程教学中获得实践与应用性均较强的知识,本文以家畜疾病诊疗与案例分析选修课为例,进行了兽医专业硕士研究生课程案例教学的探索。结果表明,本课程将临床上患病家畜病例与课程教学内容相联系,与课程教学方式有机融合,通过临床实践、翻转课堂和主题探讨形式展开,增强了学生课上课下学习的积极性,以期为高校培养兽医学专业人才提供参考。

一步法多重RT-PCR禽流感病毒分型诊断法的建立与应用

根据禽流感病毒(AIV)的M基因序列设计合成了1对AIVM基因的通用诊断引物AMDI／AMD2,针对H5N1、H9N2两种亚型的HA基因分型设计合成了2对分型诊断引物H15D1／H5D2,H9D1／H9D2。采用一步法多重RT-PcR技术建立了一种禽流感病毒快速分型诊断方法,并对其特异性和灵敏度进行验证。结果表明,该诊断方法速度快,一般只需要28～30 h即可鉴定出结果,比病毒分离鉴定(5～7 d)至少缩短4～6 d;特异性强,试验组53株AIV全部扩增出与预期同样长度的目的条带,与病毒分离及血清学鉴定方法的检测结果完全一致。对照组中新城疫病毒(NDV)、减蛋综合征病毒(EDS76V)、传染性支气管炎病毒(IBV)均未扩增出特异性基因条带,;灵敏度高,试验组将AIV接种SPF鸡胚,培养后的鸡胚尿囊液(AAF)进行10-2稀释后,仍可以检测到其中的AIV。

装配式简支空心板梁纵向裂缝分析

根据我国公路桥涵设计规范规定的温差分布和实际情况假定的温度场,利用ANSYS软件对简支空心板梁桥进行温差应力计算分析,计算结果得出:温度应力在整个桥梁设计中占有很大的比重,横向温差应力是腹板产生纵向裂缝的主要原因。

装配式简支空心板梁纵向裂缝分析

根据我国公路桥涵设计规范规定的温差分布和实际情况假定的温度场,利用ANSYS软件对简支空心板梁桥进行温差应力计算分析,计算结果表明温度应力在整个桥梁设计中占有很大的比重,且横向温差应力是腹板产生纵向裂缝的主要原因。

牛iPSCs向神经细胞的诱导分化

【目的】通过类胚体介导体外自由分化与诱导分化,验证所建立的牛诱导性多能干细胞(Bovine induced pluripotent stem cells,biPSCs)能否分化为外胚层的神经细胞。【方法】将biPSCs悬浮培养以制备类胚体,通过类胚体介导使biPSCs在添加全反式维甲酸(RA)和β巯基乙醇(β-Me)诱导体系中分化为神经细胞,比较其诱导效率;提取不同诱导体系的分化细胞与类胚体的总RNA,利用RT-PCR方法鉴定分化细胞中神经细胞特异性基因的表达。【结果】培养的biPSCs集落呈球形,中央隆起,周围界限清晰,与胚胎干细胞集落形态类似。biPSCs碱性磷酸酶(AP)染色为阳性,并表达SSEA-4干细胞特异性表面蛋白。biPSCs通过类胚体介导分化,在未添加化学诱导物的条件下,可自由分化为Nestin、GFAP与NSE阳性神经细胞,其阳性细胞率分别为(15.14±1.13)%,(6.25±0.35)%和(5.45±0.62)%;biPSCs在RA诱导组中分化的神经细胞的数量最多,诱导后表达Nestin、GFAP和NSE细胞的阳性率分别为(49.56±2.33)%,(16.58±1.28)%和(13.66±2.21)%;在β-Me诱导组中,表达Nestin的阳性细胞率为(42.23±1.25)%。2个诱导组的诱导效率与无化学诱导物组有显著差异(P<0.05)。RT-PCR检测结果显示,不同诱导体系获得的分化细胞均能扩增到神经细胞特异性基因Nestin和βⅢ-Tubulin片段,产物长度与预期结果完全一致。【结论】biPSCs在体外具有向神经细胞发育的能力;RA是诱导biPSCs向神经细胞分化的良好诱导物。

西安地区犬吉氏巴贝斯虫病的诊断与治疗

本宠物医院临床上常遇到以溶血、贫血、血小板减少和血红蛋白尿为特征的犬病,经临床和实验室检验确诊为犬吉氏巴贝斯虫病。报告如下。

用扩展物理光学(E.P.O)计算旋转对称目标雷达散射截面(RCS)

本文介绍了计算电磁散射问题的扩展物理光学法、具体计算了细长椭球良导体目际的雷达散射截面与方位角的关系。结果表明,采用E.P.O.法可使谐振区的计算与实验结果很好地符合起来,从而扩大了物理光学法(P.O.)的适用范围。

pEGFP-N1-hTERT真核表达载体的构建与表达鉴定(英文)

[Objective] The aim of this study is to construct eukaryotic expression vector pEGFP-N1-hTERT and observe its expression in eukaryotic cells.[Method]The eukaryotic expression vector pEGFP-N1-hTERT was constructed with pC1-neo-hTERT and pEGFP-N1 plasmids,and the accuracy of human telomerase reverse transcriptase(hTERT)gene fragment was confirmed by double enzyme digestion and DNA sequencing analysis.After transfecting pEGFP-N1-hTERT into rat fetal neural stem cells(NSCs),the protein localization of human telomerase reverse transcriptase were indirectly observed through green fluorescent protein in the cells,and the correctness of constructed pEGFP-N1-hTERT was certificated by RT-PCR and Western Blot analysis.[Result]The eukaryotic expression vector pEGFP-N1-hTERT had correct structure and could express in eukaryotic cells.[Conclusion]This study laid a foundation for the establishment of immortalized NSCs line in rats.

十二指肠灌注亮氨酸对奶牛胰腺淀粉酶分泌的影响

本试验旨在研究十二指肠灌注亮氨酸对奶牛胰腺淀粉酶分泌的影响。以4头周岁荷斯坦母牛[(215±7)kg]为试验动物,手术安装十二指肠胰液收集袋、灌注管和回流管以及颈静脉插管,采用4×4拉丁方试验设计,进行十二指肠亮氨酸灌注试验[(灌注水平分别为0、29.5、59.1和88.6μmol/(kg.h)]。结果表明,随亮氨酸灌注水平升高,血浆胰岛素和胆囊收缩素浓度升高(P<0.05),胰腺α-淀粉酶合成速率(U/h)呈先升高后降低趋势(P<0.01),在29.5μmol/(kg.h)灌注水平时最大。十二指肠灌注亮氨酸也极显著影响了胰腺α-淀粉酶分泌浓度(U/L,P<0.01;U/g prot,P<0.01)。结果表明,亮氨酸可能通过刺激胰岛素和胆囊收缩素释放,调控青年奶牛胰腺淀粉酶分泌功能,二者存在剂量效应。

477例门诊犬寄生虫种类和感染情况的调查

对2012年-2015年西北农林科技大学西安动物医院门诊确诊的477例犬寄生虫感染资料进行分类统计和分析,以期了解西安地区犬寄生虫的种类和感染情况,对犬寄生虫的防控提供依据。结果显示,从感染犬中共检出14种寄生虫,每种寄生虫的阳性率依次为:吉氏巴贝斯虫51.79%(247/477),等孢球虫16.15%(77/477),贾第鞭毛虫11.74%(56/477),犬弓首蛔虫6.71%(32/477),疥螨4.41%(21/477),蠕形螨4.41%(21/477),犬复孔绦虫3.78%(18/477),犬钩口线虫2.31%(11/477),犬耳痒螨1.89%(9/477),吸吮线虫0.63%(3/477),华支睾吸虫0.42%(2/477),弓形虫0.42%(2/477),犬尾旋线虫0.21%(1/477),犬恶丝虫0.21%(1/477)。混合感染两种及以上寄生虫的犬占5.45%(26/477)。肠道寄生虫中的等孢球虫、贾地鞭毛虫、犬弓首蛔虫和犬钩口线虫等容易发生混合感染。寄生虫和病毒合并感染犬占8.39%(40/477),犬细小病毒(CPV)、犬瘟热病毒(CDV)和犬冠状病毒(CCV)常与犬肠道寄生虫合并感染。许多寄生虫感染与犬的年龄有密切关系,季节对寄生虫感染也有影响。原虫感染特别是吉氏巴贝斯虫感染应当引起重视。控制犬与寄生虫传播媒介的接触、改善犬的饲养管理条件对寄生虫感染的预防十分重要。

西安地区宠物犬皮肤病的流行病学分析

犬的皮肤病是临床上一种常见病和多发病，该病发病率高、病程长、致病因素复杂，以及与动物的品种、年龄、个体差异、饮食结构、生活环境和应激等因素有关，因此在诊断和治疗上有一定难度，且复发率高。犬的皮肤病病原主要有真菌、寄生虫与细菌三大类。本文通过对西北农林科技大学西安宠物医院2009年～2011年期间犬皮肤病病例的调查统计分析，从病原、品种、季节、年龄和性别4个方面分析讨论了犬皮肤病的发病特点，总结了西安地区犬皮肤病的一般流行规律，为宠物犬皮肤病的预防和治疗提供科学依据。报告如下。