松油烯-4-醇与α-红没药醇对金黄色葡萄球菌和痤疮丙酸杆菌协同抑菌作用研究

目的探讨松油烯-4-醇(T4O)和α-红没药醇(Bis)对于金黄色葡萄球菌(S.aureus)和痤疮丙酸杆菌(C.acnes)的协同抑菌作用。方法采用微量棋盘稀释法测定T4O、Bis联用时上述两种实验菌的最小抑菌浓度(MIC),并计算部分抑菌浓度指数(FICI)。对两种实验菌各设置MIC组(加入MIC的T4O、Bis)、2×MIC组(加入2倍MIC的T4O、Bis)及阴性对照组(不加T4O、Bis),绘制T4O、Bis联用时两种实验菌各组的时间-杀菌曲线,测定联用时两种实验菌各组的菌株表面Zeta电位(ZP)、细胞内核酸及蛋白质泄漏情况、细菌生物膜破坏情况以及S.aureus的呼吸链脱氢酶活性,透射电镜观察联用对两种实验菌各组菌株形态的影响。结果T4O和Bis联用时S.aureus及C.acnes的FICI<0.5,其中T4O对S.aureus的MIC为0.62 g/L,对C.acnes的MIC为0.31 g/L;时间-杀菌曲线显示,联用可明显抑制两种细菌生长。与阴性对照组相比,联用时两种细菌的ZP均降低,细菌细胞内核酸、蛋白质泄漏增加,菌体丧失正常形态,细菌生物膜被破坏,且S.aureus呼吸链脱氢酶活力降低。结论T4O和Bis对S.aureus及C.acnes具有协同抑菌作用,两者联合可能成为抑菌产品的有效成分。

白癜风合并鳞状细胞癌一例

临床资料患者，女，52岁。双手背、前臂白斑20余年，斑块、溃疡半年。20余年前于双手背、前臂出现对称性白斑，大小不等，边界清楚，无脱屑、萎缩，无自觉症状，当地诊断为白癜风，长期外用氮芥治疗，白斑处瘙痒，患者反复搔抓，皮损反复溃疡、愈合，逐渐出现肥厚、增生，半年前，原白斑基础上出现肥厚性疣状斑块、溃疡，不易愈合。既往体健，家族中无类似皮肤病患者。

Tim-3对B16F10细胞共培养的小鼠脾淋巴细胞增殖的影响

目的:明确T细胞免疫球蛋白黏蛋白-3(Tim-3)对B16F10细胞共培养的小鼠脾淋巴细胞增殖的影响。方法:构建Tim-3真核表达载体后,CCK-8法检测Tim-3融合蛋白对B16F10共培养的小鼠脾淋巴细胞的增殖。结果:Tim-3融合蛋白转染组淋巴细胞增殖活力低于未转染组和转染空载体组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:Tim-3融合蛋白抑制B16F10共培养的小鼠脾淋巴细胞的增殖。

外用糖皮质激素治疗银屑病的疗效与糖皮质激素受体的关联

银屑病是一种常见、易复发并以角质形成细胞异常增殖及分化不全为特征的慢性炎症性皮肤病。其中外用糖皮质激素(GC)以其良好的抗炎、抗过敏及免疫抑制等作用,成为长期以来皮肤科医师治疗银屑病的重要手段之一。近年来针对银屑病的外用治疗进行了各种相关研究,发现GC与糖皮质激素受体(GR)结合并发挥抗炎作用时受到多种因素影响。该文就银屑病外用GC治疗时对GR的影响因素作一综述。

天疱疮病人血脂水平分析

目的分析天疱疮病人血脂代谢的特点。方法根据皮损及组织免疫病理特点,将收集的43例天疱疮病人(疾病组)分为寻常组(寻常型及增殖型)、落叶组(落叶型及红斑型),以同期我院体检中心的50例健康体检者为对照组。检测各组的三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、载脂蛋白B(apoB)、载脂蛋白A1(apoA1)、脂蛋白α(Lp(α))、游离脂肪酸(FFA)水平及体质量指数(BMI)。结果疾病组病人血清LDL、apoB及FFA水平高于对照组,差异有显著性(t=2.510,Z=2.316、2.209,P<0.05);两组TG、HDL、apoA1、Lp(α)水平及BMI比较差异无显著性(P>0.05)。寻常组血清apoB及FFA水平显著高于对照组(H=2.441、2.557,P<0.05),但寻常组与落叶组比较、落叶组与对照组比较差异无显著性(P>0.05)。各组间其他指标比较差异均无显著性(P>0.05)。结论天疱疮病人存在血脂代谢异常,且其紊乱情况可能与疾病类型有关。

天疱疮发病的相关危险因素分析

目的探讨天疱疮发病的相关危险因素。方法选取104例天疱疮病人纳入病例组,143例查体中心体检者纳入对照组,通过回顾性调查对天疱疮的相关危险因素进行分析。结果单因素分析显示,两组食用葱蒜类蔬菜、感染、精神因素、睡眠状况差、接触农药和杀虫剂、外伤及手术、药物摄入、家族史比例等差异有显著意义(χ2=5.620~12.633,P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,食用葱蒜类蔬菜(OR=2.023,95%CI=1.122~3.647,P=0.029)、感染(OR=4.949,95%CI=1.720~14.243,P=0.003)、精神因素(OR=2.883,95%CI=1.408~5.903,P=0.004)、接触农药和杀虫剂(OR=2.048,95%CI=1.026~4.088,P=0.042)、药物摄入(OR=2.904,95%CI=1.147~7.356,P=0.025)、家族史(OR=14.086,95%CI=1.450~136.810,P=0.023)等对天疱疮发病有显著影响。结论食用葱蒜类蔬菜、感染、精神因素、接触农药和杀虫剂、药物摄入及家族史等对天疱疮发病起一定作用。

成年晚发肢带型肌营养不良1例

肢带型肌营养不良是一组以骨盆带肌及肩胛带肌等近端肌肉进行性萎缩和无力为主要表现的遗传性肌病,属于肌营养不良的一种亚型。肌营养不良发病率较低,分型众多,病因复杂,临床表现各异,临床上易误诊和漏诊。本文报告1例以四肢近端无力为主要表现的成年晚发肢带型肌营养不良,该患者病程长,病情进展缓慢,病史复杂,血清肌酸激酶(creatine kinase,CK)正常,经肌电图、经股部中份肌肉MRI及肌肉病理等检查后明确诊断。该病例提示对肌无力患者应进行早期的实验室筛查、肌电图及肌肉MRI检查,必要时通过肌活检及基因检测明确病因,做到早发现、早确诊、早治疗。

基于Inventor的机械结构设计

AutodeskInventor是功能强大的机械设计软件,可以快速地建立零件的三维模型,按零件的约束关系生成装配好的机构模型,并可以生成机构传动动画,检查零件间是否干涉,可以缩短设计周期,提高设计效率。文中以高压负载柜的机械结构设计为例,说明了该软件的应用方法及其优点。

热水机控制器测试系统电路

热水机控制器测试系统能够实现对被测试控制器的所有功能、性能参数测试、传感信号模拟、工作状态检测等功能。在火焰信号模拟、NTC信号模拟、点火电路检测、数据采集和综合参数测试控制等电路设计方面均有自己的特色。从该测试系统的调试、试用情况来看，系统性能稳定可靠。

T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3对黑素瘤TRP-2180-188肽疫苗刺激小鼠淋巴细胞的影响

目的探讨体外T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3（TIM-3）对与小鼠黑素瘤B16F10细胞共培养的酪氨酸相关蛋白-2（TRP-2180-188）抗原肽刺激小鼠淋巴细胞的影响。方法构建TIM-3重组质粒pFUSE—TIM-3-mlgG2Aae1—Fc2，分别转染重组质粒及空质粒pFUSE—mIgG2Aae1—Fc2至人上皮293T细胞，继续培养48h，制备含TIM-3、免疫球蛋白（Ig—tail）的上清液。TRP-2180-188肽疫苗免疫C57BL／6小鼠，分离小鼠脾淋巴细胞，用TRP-2180-188抗原肽和白细胞介素（IL）-2刺激培养5d，以未刺激细胞作为对照组。构建B16F10细胞与上述TRP-2180-188抗原肽刺激淋巴细胞共培养体系，分为空白对照组（加293T细胞培养48h上清液）、TIM-3组（加含TIM-3上清液）、阴性对照组（加含Ig-tail上清液）。CCK-8法检测细胞增殖情况，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测共培养体系中干扰素（IFN）-γ和肿瘤坏死因子（TNF）-α浓度，流式细胞仪检测共培养体系中CD8^＋淋巴细胞。结果酶切和测序鉴定证实目的基因正确插入真核表达载体中，检测到转染重组质粒pFUSE—TIM-3-mIgG2Aae1-Fc2的293T细胞上清液中有TIM-3表达，转染空质粒pFUSE-mIgG2Aae1-Fc2的293T细胞上清液中有Ig-tail的表达。CCK-8法检测显示24h时空白对照组、阴性对照组、TIM-3组淋巴细胞增殖活力分别为（100．00±10．42）％、（108．70±9．90）％、（78．06±6．37）％，48h时分别为（100．00±6．24）％、（168．00±2．98）％、（42．93±5．93）％；24h、48h时TIM-3组淋巴细胞活力低于空白对照组和阴性对照组（均P〈0．05）。TIM-3组48h相比24h淋巴细胞增殖倍数低于空白对照组和阴性对照组（均P〈0．05）。24h时，空白对照组、阴性对照组、TIM-3组IFN-γ浓度分别为（216．44±7．85）、（223．67±7．79）、（192．96±5．05）ng／L，48h时分别为（230．06±4．23）、（167．24±3．33）、（54．95±0．57）ng／L。24h、48h时，TIM-3组IFN-γ浓度低于空白对照组和阴性对照组（均P〈0．05）。24h、48h时，TIM-3组TNF-α浓度低于空白对照组和阴性对照组（均P〈0．05）。24h时空白对照组、阴性对照组、TIM-3组CD8^＋淋巴细胞中位数分别为0．421％、2．22％、3．30％，48h时分别为0．577％、0．691％、4．06％。24h、48h时TIM-3组CD8^＋T淋巴细胞中位数高于空白对照组和阴性对对照组。结论TIM-3在体外能够抑制B16F10细胞与TRP-2180-188抗原肽刺激淋巴细胞共培养体系中淋巴细胞增殖和分泌IFN-γ、TNF-α，提高CD8＆^＋T淋巴细胞。

搔抓诱发或加重特应性皮炎的机制

特应性皮炎是一种慢性、复发性、炎症性皮肤病，临床表现为剧烈瘙痒，严重影响患者心身健康。近年来特应性皮炎发病率增加，然而其病因和发病机制尚未完全阐明，且无有效的控制方法。搔抓可能是重要的诱发和加重因素，可刺激角质形成细胞释放趋化因子及促炎症细胞因子而诱发瘙痒-搔抓循环，破坏皮肤屏障而易于发生微生物感染，导致自身抗原的释放。瘙痒-搔抓循环、微生物感染及自身抗原均在特应性皮炎的发病中起重要作用。通过外用保湿剂、戴棉手套、湿包疗法、心理干预及剪短指甲等方法可避免搔抓。

线状毛囊角化病一例

患者女,24岁.右下肢褐色丘疹5年,无明显自觉症状,于2013年7月就诊我院.患者5年前无明显诱因于右大腿出现散在粟粒大小的褐色丘疹,无自觉症状,皮损逐渐增多,向小腿蔓延.就诊于当地医院,但未明确诊断,外用糖皮质激素软膏疗效不佳.既往体健,否认系统疾病及药物过敏史,家族其他成员无类似疾病.体检：各系统检查无异常.

木村病一例

患者女,51岁.头皮肿物10余年,左耳后肿物2年.患者10余年前无明显诱因于头皮出现花生米大小的皮下肿物,逐渐增多增大,可达鸽蛋大小,表面皮肤正常,无明显自觉症状,于当地医院不规律口服糖皮质激素治疗,效果欠佳,手术切除后复发,伴痒痛.2年前于左耳后出现肤色皮下肿物,逐渐增大,无自觉症状.既往体健,家族中无类似皮肤病患者.体检：各系统检查未见明显异常.皮肤科情况：头皮见数个花生米至鸽蛋大小皮下肿物,表面无破溃、渗出、脱屑,质韧,活动度差,皮温不高,有压痛,左耳后见一约3cm＆#215;4cm大小皮下肿物,皮色,质中,无压痛（图1）.全身浅表淋巴结未触及肿大.

Cbl-b基因shRNA干扰载体的构建及鉴定

目的 构建小鼠Cbl-b基因RNA干扰（RNAi）的真核表达质粒,并初步鉴定其干扰效果,为后续研究Cbl-b在黑素瘤免疫治疗中的作用奠定基础.方法 根据基因库提供的Cbl-b cDNA序列,设计并合成4对短发夹结构的互补DNA序列,克隆至载体PGPU6/GFP/Neo构建重组质粒,并予以DNA测序鉴定.重组干扰质粒构建成功后,将干扰质粒与Cbl-b过表达载体共转染293T细胞,于转染后48 h,通过实时荧光定量PCR法及蛋白质印迹法检测各质粒对Cbl-b基因的表达抑制效应.结果 测序分析证实,4对shRNA寡核苷酸序列分别成功插入至shRNA真核表达载体PGPU6/GFP/Neo中,将构建成功的PGPU6/GFP/Neo-shRNA质粒与Cbl-b真核表达载体共转染细胞48 h后,通过荧光实时定量PCR法及Western印迹测定,发现4条shRNA序列对Cbl-b的表达均有一定的抑制效应,其中以1号shRNA序列重组质粒对Cbl-b表达的抑制程度最高（P＜0.05）.结论 成功构建并筛选出沉默效应最高的Cbl-b shRNA真核细胞表达载体.

原发性乳房外Paget病组织中钠氢交换子调节因子1和β联蛋白的表达和意义

目的探讨钠氢交换子调节因子1（NHERF1）和β联蛋白在原发性乳房外Paget病组织中的表达及其意义。方法应用免疫组化方法，检测18例原位乳房外Paget病、22例侵袭性乳房外Paget病石蜡组织切片中NHERF1和β联蛋白的表达情况。结果NHERF1在22例侵袭性乳房外Paget病中18例（81．82％）为高表达，18例原位乳房外Paget病中7例（38．89％）高表达，两组差异有统计学意义（χ2=7．78，P〈0．01）；β联蛋白在侵袭性乳房外Paget病中有0例胞膜高表达和18例（81．82％）胞质或核高表达，原位乳房外Paget病中分别为6例（33．33％）和8例（44．44％），两组差异均有统计学意义（χ2值分别为8．63和6．08，P值分别〈0．01和〈0．05）。原发性乳房外Paget病组织中NHERF1的表达与B联蛋白胞膜表达呈负相关（ρ=-0．488，P〈0．01），与β联蛋白胞质或核表达呈正相关（ρ=0．623，P〈0．01）；β联蛋白胞膜表达与胞质或核表达呈负相关（ρ=-0．572，P〈0．01）。结论乳房外Paget病组织中NHERF1和β联蛋白表达异常，并可能与原发性乳房外Paget病的发生发展及侵袭有关。

钠氢交换子调节因子-1及β-联蛋白在皮肤黑素瘤及痣细胞痣组织中的表达

目的探讨皮肤黑素瘤及痣细胞痣组织中钠氢交换子调节因子-1（NHERF1）和β-联蛋白表达的意义。方法收集47例皮肤黑素瘤及37例痣细胞痣组织，用免疫组化方法对NHERF1和β-联蛋白在组织中的表达模式（膜表达、浆表达及核表达）和表达强度进行检测。结果原位皮肤黑素瘤组织中NHERF1胞质中等服阳性表达率为38％；而侵袭性皮肤黑素瘤组织中NHERF1胞质中等／强阳性表达率为71％，两组相比差异有统计学意义。同时，全部皮肤黑素瘤组织中NHERF1胞质中等偶阳性表达率为60％，而痣细胞痣组织中NHERF1胞质中等／强阳性表达率为0，差异有统计学意义。原位皮肤黑素瘤组织中可见β-联蛋白胞质中等／强阳性表达率为50％；而侵袭性皮肤黑素瘤组织中可见β-联蛋白胞质中等，强阳性表达率为84％。两组相比差异有统计学意义。全部皮肤黑素瘤组织中β-联蛋白胞质中等／强阳性表达率为72％，而痣细胞痣组织中NHERF1胞质中等／强阳性表达率为30％，两组相比具异有统计学意义。NHERF1及β-联蛋白胞质中等／强阳性表达率在痣细胞痣组、原位黑素瘤组及侵袭性黑素瘤组中均随着病变组织的恶性程度增加而升高。运用Spearman秩相关检验对皮肤黑素瘤中NHERF1及B一联蛋白的表达相关性进行分析显示无相关性。结论NHERF1及β-联蛋白在痣细胞痣、原位黑素瘤及侵袭性黑素瘤组织中的胞质阳性表达随着病变组织的恶性程度增加而升高，但两者的表达差异无相关性。

Cbl-b 基因沉默对小鼠原代淋巴细胞免疫活性影响的研究

目的：体外初步研究 Cbl-b 基因经特异性 siRNA 沉默后对小鼠淋巴细胞免疫活性的影响。方法摘取 C57BL/6小鼠的脾脏，体外无菌分离小鼠脾脏淋巴细胞后进行培养。通过 Entranster^TM-R4000试剂将 Cbl-b siRNA 转染入小鼠原代淋巴细胞以沉默细胞内 Cbl-b 的表达。转染72 h 后通过酶联免疫吸附实验（ELISA）检测淋巴细胞培养上清中干扰素γ（INF-γ）及肿瘤坏死因子α（TNF-α）的表达量。通过与 B16F10黑素瘤细胞共培养，研究 Cbl-b 基因沉默后的淋巴细胞对 B16F10黑素瘤细胞免疫杀伤活性的影响。结果 Cbl-b siRNA 成功转染进小鼠原代淋巴细胞并能有效沉默细胞内 Cbl-b 的表达。与阴性对照转染组及空白组相比，转染 Cbl-b siRNA 的淋巴细胞 IFN-γ、TNF-α分泌量增加（P 〈0.05）。共培养检测结果显示，Cbl-b siRNA 转染组比转染阴性对照组能更高效地杀伤小鼠 B16F10细胞。结论 Cbl-b 基因沉默能够促进小鼠淋巴细胞 INF-γ、TNF-α分泌能力，并能增强淋巴细胞对 B16F10黑素瘤细胞的体外免疫杀伤作用。

Notch-RBP-J信号通路对小鼠黑素瘤细胞B16F10与小鼠单核巨噬细胞RAW264.7共培养巨噬细胞极化影响的研究

目的 探讨小鼠黑素瘤细胞B16F10与小鼠单核巨噬细胞RAW264.7共培养中Notch-RBP-J信号通路对巨噬细胞表型分化的影响.方法 设计针对CBF1/RBP-Jκ基因的siRNA编码序列,转染至小鼠单核巨噬细胞RAW264.7细胞.实验分4组：沉默前共培养组,B16F10细胞与RAW264.7细胞共培养;沉默后共培养组,B16F10细胞与RBP-Jκ基因沉默后的RAW264.7细胞共培养;空白对照组,单独培养的RAW264.7细胞;阳性对照组,白细胞介素4刺激诱导的RAW264.7细胞.Western印迹法、ELISA法及流式细胞仪检测各组巨噬细胞的表型;RT-PCR法检测各组notch1、notch2、DLL1、DLL4及Hes1的表达.采用SPSS17.0软件进行重复测量方差分析及单因素方差分析、线性趋势检验、Bonferroni两两比较.结果 Western印迹结果显示,RAW264.7与B16F10共培养不同时间后,RAW264.7细胞的CD163在空白对照组、共培养24 h、48 h、72 h组、阳性对照组的相对表达量分别为1.016±0.018、1.274±0.034、2.065±0.094、3.615±0.144、3.099±0.071,经单因素方差分析（n=4）,F=527.42,P＜ 0.01,共培养后RAW264.7细胞CD163表达量较空白对照组增加;ELISA检测结果显示,共培养24、48、72 h,RAW264.7细胞培养上清液白细胞介素10的水平分别为（167.610±3.527）、（433.433±5.558）、（679.673±8.101） ng/L.沉默后共培养24、48、72 h,RAW264.7细胞培养上清液白细胞介素10表达量分别为（63.403±0.856）、（103.427±2.072）、（202.297±3.610） ng/L,较未沉默时降低（F=8.01,P＜ 0.05）.Western印迹法及流式细胞仪分别检测沉默后共培养RAW264.7细胞CD163、CD206的表达量,均较未沉默时减少（P＜0.05）.RT-PCR示,沉默后共培养组较沉默前共培养组及对照组的Notch信号通路相关基因mRNA表达均降低.结论 沉默Notch-RBP-J信号通路后共培养组中RAW264.7细胞向M2型极化较未沉默共培养组减少,总体表型仍为M2型;该通路的活化促进RAW264.7细胞向M2型极化.