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鸭瘟病毒和番鸭细小病毒双重PCR检测方法的建立及应用
被引量:
5
1
作者
吴专伟
饶体宇
+6 位作者
鲜思美
彭庆波
张友
包细明
李婷
张益
吴伯梅
《中国家禽》
北大核心
2019年第12期17-21,共5页
为建立一种能同时鉴别鸭瘟病毒(DPV)和番鸭细小病毒(MDPV)的双重PCR方法,根据DPV UL6基因和MDPV NS-VP1基因分别设计并合成两对特异性引物,通过对双重PCR反应的引物浓度和退火温度优化,建立了能快速检测DPV和MDPV的双重PCR方法,并对该...
为建立一种能同时鉴别鸭瘟病毒(DPV)和番鸭细小病毒(MDPV)的双重PCR方法,根据DPV UL6基因和MDPV NS-VP1基因分别设计并合成两对特异性引物,通过对双重PCR反应的引物浓度和退火温度优化,建立了能快速检测DPV和MDPV的双重PCR方法,并对该方法的特异性、敏感性和重复性进行验证。结果表明:设计的两对特异性引物均能扩增出目的条带,其大小分别约为376 bp和624 bp;优化引物浓度组合为:DPV引物1.0μmol/L,MDPV引物2.5μmol/L,最佳退火温度为52.4℃。DPV和MDPV的核酸最低检出量分别为4 pg和173 pg,建立的双重PCR分别对鹅细小病毒、禽流感病毒、新城疫病毒、鸭疫里默氏杆菌、沙门菌、大肠杆菌、葡萄球菌、鸭源巴氏杆菌核酸扩增结果均呈阴性;对实验室保存的9份临床病料检测结果DPV检出率33.3%(3/9),MDPV检出率55.6%(5/9)。综上所述,建立的双重PCR方法特异性强、敏感性和稳定性较好,为DPV和MDPV的临床病料检测提供了技术支撑。
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关键词
鸭瘟病毒
番鸭细小病毒
双重PCR
下载PDF
职称材料
鸭瘟病毒、鹅细小病毒和番鸭细小病毒三重PCR检测方法的建立
被引量:
6
2
作者
饶体宇
张益
+6 位作者
鲜思美
包细明
李婷
吴伯梅
张友
吴专伟
彭庆波
《畜牧与兽医》
北大核心
2019年第7期85-89,共5页
为建立鉴别鸭瘟病毒(DPV)、鹅细小病毒(GPV)和番鸭细小病毒(MDPV)的多重PCR检测方法,参考文献合成针对DPVUL6基因、GPVNS基因和MDPVVP1基因序列的特异性引物。通过优化多重PCR反应中的引物浓度和退火温度,建立快速鉴别3种病毒的多重PCR...
为建立鉴别鸭瘟病毒(DPV)、鹅细小病毒(GPV)和番鸭细小病毒(MDPV)的多重PCR检测方法,参考文献合成针对DPVUL6基因、GPVNS基因和MDPVVP1基因序列的特异性引物。通过优化多重PCR反应中的引物浓度和退火温度,建立快速鉴别3种病毒的多重PCR方法,并对该方法的特异性、敏感性和重复性进行检验。结果显示,该方法对禽流感病毒、新城疫病毒、鸭肝炎病毒、鸭源巴氏杆菌、鸭疫里氏杆菌的核酸扩增结果均为阴性,表明特异性较强;DPV、GPV和MDPV的最低核酸检出量分别为237.3pg、22.45pg和204.6pg,表明敏感性良好;该方法对DPV+GPV+MDPV、DPV+GPV、DPV+MDPV、GPV+MDPV、DPV、GPV和MDPV的核酸均能扩增出与预期大小一致的目的条带,表明该多重PCR方法重复性较好。本研究方法具有特异性强、敏感性良好、重复性较好和快速简便等特点,可用于DPV、GPV和MDPV临床感染病例的联合检测与鉴别诊断。
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关键词
鸭瘟病毒
鹅细小病毒
番鸭细小病毒
多重PCR
原文传递
题名
鸭瘟病毒和番鸭细小病毒双重PCR检测方法的建立及应用
被引量:
5
1
作者
吴专伟
饶体宇
鲜思美
彭庆波
张友
包细明
李婷
张益
吴伯梅
机构
贵州大学动物科学学院
贵州省动物疫病研究所
出处
《中国家禽》
北大核心
2019年第12期17-21,共5页
基金
贵州大学大学生创新创业训练计划项目[贵大国创字(2018)014号]
贵州省农业攻关项目[黔科合支撑(2016)2506号]
文摘
为建立一种能同时鉴别鸭瘟病毒(DPV)和番鸭细小病毒(MDPV)的双重PCR方法,根据DPV UL6基因和MDPV NS-VP1基因分别设计并合成两对特异性引物,通过对双重PCR反应的引物浓度和退火温度优化,建立了能快速检测DPV和MDPV的双重PCR方法,并对该方法的特异性、敏感性和重复性进行验证。结果表明:设计的两对特异性引物均能扩增出目的条带,其大小分别约为376 bp和624 bp;优化引物浓度组合为:DPV引物1.0μmol/L,MDPV引物2.5μmol/L,最佳退火温度为52.4℃。DPV和MDPV的核酸最低检出量分别为4 pg和173 pg,建立的双重PCR分别对鹅细小病毒、禽流感病毒、新城疫病毒、鸭疫里默氏杆菌、沙门菌、大肠杆菌、葡萄球菌、鸭源巴氏杆菌核酸扩增结果均呈阴性;对实验室保存的9份临床病料检测结果DPV检出率33.3%(3/9),MDPV检出率55.6%(5/9)。综上所述,建立的双重PCR方法特异性强、敏感性和稳定性较好,为DPV和MDPV的临床病料检测提供了技术支撑。
关键词
鸭瘟病毒
番鸭细小病毒
双重PCR
Keywords
DPV
MDPV
double PCR
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
下载PDF
职称材料
题名
鸭瘟病毒、鹅细小病毒和番鸭细小病毒三重PCR检测方法的建立
被引量:
6
2
作者
饶体宇
张益
鲜思美
包细明
李婷
吴伯梅
张友
吴专伟
彭庆波
机构
贵州大学动物科学学院
贵州省动物疫病研究所
出处
《畜牧与兽医》
北大核心
2019年第7期85-89,共5页
基金
贵州省农业攻关项目[黔科合支撑(2016)2506号]
贵州省动物疫病防控与兽医公共卫生保障科技创新人才团队项目[黔科合人才团队(2015)4016号]
贵州大学大学生创新创业训练计划项目[贵大国创字(2018)014号]
文摘
为建立鉴别鸭瘟病毒(DPV)、鹅细小病毒(GPV)和番鸭细小病毒(MDPV)的多重PCR检测方法,参考文献合成针对DPVUL6基因、GPVNS基因和MDPVVP1基因序列的特异性引物。通过优化多重PCR反应中的引物浓度和退火温度,建立快速鉴别3种病毒的多重PCR方法,并对该方法的特异性、敏感性和重复性进行检验。结果显示,该方法对禽流感病毒、新城疫病毒、鸭肝炎病毒、鸭源巴氏杆菌、鸭疫里氏杆菌的核酸扩增结果均为阴性,表明特异性较强;DPV、GPV和MDPV的最低核酸检出量分别为237.3pg、22.45pg和204.6pg,表明敏感性良好;该方法对DPV+GPV+MDPV、DPV+GPV、DPV+MDPV、GPV+MDPV、DPV、GPV和MDPV的核酸均能扩增出与预期大小一致的目的条带,表明该多重PCR方法重复性较好。本研究方法具有特异性强、敏感性良好、重复性较好和快速简便等特点,可用于DPV、GPV和MDPV临床感染病例的联合检测与鉴别诊断。
关键词
鸭瘟病毒
鹅细小病毒
番鸭细小病毒
多重PCR
Keywords
duck plague virus
goose parvovirus
Muscovy duck parvovirus
multiplex PCR
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
鸭瘟病毒和番鸭细小病毒双重PCR检测方法的建立及应用
吴专伟
饶体宇
鲜思美
彭庆波
张友
包细明
李婷
张益
吴伯梅
《中国家禽》
北大核心
2019
5
下载PDF
职称材料
2
鸭瘟病毒、鹅细小病毒和番鸭细小病毒三重PCR检测方法的建立
饶体宇
张益
鲜思美
包细明
李婷
吴伯梅
张友
吴专伟
彭庆波
《畜牧与兽医》
北大核心
2019
6
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