细胞培养三种染色法检测沙眼衣原体

用细胞培养法对１６０ 例有淫乱史病人标本进行沙眼衣原体培养，后经免疫荧光法，Ｇｉｅｍ ｓａ 染色法和碘染法鉴定，结果表明， 免疫荧光法的敏感度最高 （４８／１６０， ３００％ ）， Ｇｉｅｍ ｓａ法次之 （４３／１６０， ２６９％ ）， 碘染色法较低 （３９／１６０， ２４４％ ），但后两者简便快速， 可以节省昂贵的试剂购置费用， 仍是有待发展的检测技术； 沙眼衣原体标本贮存以液氮最佳，在７ 天内，－ ７０°Ｃ是一个临界分离温度。

子宫内膜癌细胞JEC-9药物敏感性研究

用单层细胞培养、细胞生长抑制和集落形成试验三种方法,观察子宫内膜癌细胞系JEC-9细胞对九种常用抗癌药物和三种中药合剂的敏感性,结果表明,表阿霉素、顺铂和丝裂霉素对该癌细胞有高度敏感性,其中表阿霉素在1.2×10^(-6)mg/ml浓度下仍有明显的细胞毒效应。结合临床给瘤源患者用药,取得良好的治疗效果。

人白细胞干扰素对子宫内膜腺癌细胞系的作用研究

目的观察人白细胞干扰素（ＩＦＮα）对我们建立的子宫内膜腺癌细胞系（ＪＥＣ）的细胞生长和细胞周期的影响。方法将不同浓度：２０００ｕ／ｍｌ、５００ｕ／ｍｌ、１００ｕ／ｍｌ的ＩＦＮα与ＪＥＣ共同培养７天，检测ＪＥＣ细胞生长曲线、细胞的凝集素受体表达，并用流式细胞仪分析细胞周期的变化。结果和结论ＩＦＮα对ＪＥＣ细胞的增殖有抑制作用，浓度越大，抑制作用越明显，但不影响凝集素受体的表达；ＩＦＮα可使ＪＥＣ细胞Ｇ１／Ｇ０期增加、Ｓ期增加和Ｇ２／Ｍ期阻滞，前者与ＩＦＮα浓度呈正相关，而后者则为负相关。

牙髓干细胞在修复牙槽骨缺损的组织学观察

为探索牙髓干细胞(DPSCs)在兔牙槽骨缺损再生修复中的成骨效果,为临床上骨缺损的修复提供一定的理论基础。采用从新西兰幼兔前牙及磨牙牙髓组织中分离DPSCs进行体外培养;16只实验新西兰兔随机分为空白组,实验组两组,在动物下颌无牙区牙槽骨人工制备10 mm×4 mm×4 mm骨缺损,其中空白组骨缺损区填入浸有PBS溶液的0.25 g Bio-oss骨粉,实验组加入1×108/L的DPSCs和0.25 g Bio-oss骨粉;于术后第6周同期处死动物,无菌获取牙槽骨组织,制作石蜡切片,HE染色及免疫组化检测骨涎蛋白(BSP)。结果显示:光镜下传代培养的细胞与原代培养的细胞形态基本一样,幼兔牙髓细胞具有体外多次传代增殖能力;术后6周,空白组纤维结缔组织较稀疏,牙槽嵴塌陷,唇舌侧牙槽骨凹陷吸收,HE染色可见少量红细胞,未见明显新骨生成,骨涎蛋白免疫组化成弱阳性表现。实验组牙槽骨缺损区愈合良好,牙槽嵴饱满,可见部分未吸收骨粉颗粒,被新生组织包裹,新生组织与骨缺损周围嵌入良好,上附有部分纤维结缔组织,唇舌侧牙槽骨未见明显凹陷,大部分牙槽嵴宽度及高度与邻牙基本相平,骨缺损区质地较韧,HE染色提示炎性渗出明显吸收,可见新生骨组织,骨缺损区周围有大量成骨细胞,骨小梁较空白组致密,骨涎蛋白免疫组化成强阳性表达,与空白组有明显差异。由此可知,牙髓干细胞有向成骨分化能力,促进牙槽骨缺损的修复。

大鲵的迟钝爱德华菌感染

目的对大鲵不明原因死亡进行病原学鉴定,并根据药物敏感实验结果选用抗生素治疗。方法从患病死亡大鲵足部溃烂病变部位及心脏取血采样,分别用液体培养基、普通琼脂平板、血平板进行增菌和画线培养分离,经法国BiomeriruxVITEK R 2全自动微生物分析系统检测。结果与结论引起感染是迟钝爱德华菌(E.tarda),该病原体对庆大霉素、头孢曲松钠和环丙沙星等抗菌药物敏感,用敏感的庆大霉素和头孢曲松钠处理,控制了感染的流行。

人子宫体腺癌细胞系JEC—9的建立

我们于1988年5月对人子宫体腺癌进行培养,建立了四个细胞系,分别命名为JEC—5、JEC—6、JEC—9和JEC—11。至今这些细胞系已在体外连续生长18个月,其中JEC—9传代136次,本文就此细胞系的研究作初步报导。细胞培养来自一名69岁经病理诊断为子宫体腺癌患者的腹水。无菌采集腹水后,立即离心,500r/min,5min分钟。

密封铅酸蓄电池容量快速测试技术难点分析

论述了目前的铅酸蓄电池容量测试技术,如核对性放电法,不完全放电测试法,电导测量法,安时容量法等,对蓄电池容量快速测试难点进行了分析,并提出解决的方向。

人子宫内膜腺癌细胞系的RAPD标记

采用RAPD技术对人子宫内膜腺癌细胞系和正常子宫内膜组织的DNA进行比较分析，发现两者电泳谱带有明显差异，提示进一步应用该技术有可能建立人子宫内膜腺癌的分子遗传标记。

富含A蛋白的葡萄球菌菌苗的若干重要的反应性

本文研究富含A蛋白的金黄色葡萄球菌菌苗在动物试验时的反应性。用此菌苗给小鼠腹腔注射0.1～50mg/只都不引起毒性反应;给兔静脉注射时体温先下降后升高;幼猫口服和静脉注射无肠毒素毒性反应。但纯品SpA和菌苗能增强肥大细胞脱颗粒的能力。心内注射50mg菌苗,能引起25％豚鼠过敏休克死亡和37.5％豚鼠短期严重反应。用小鼠进行过敏性试验时,静脉注射10mg菌苗后,全部小鼠都有四肢无力和反应迟钝的症状,但一般在4小时后开始恢复正常。

麻疹病毒感染人子宫内膜腺癌细胞系试验

用麻疹病毒京160株感染我们建立的人子宫内膜腺癌细胞系，当病毒滴度为2.75LogTCID50／ml时，第二天即有细胞融合现象发生，第三天见到明显的多核巨细胞形成，经HE染色，有典型的嗜酸性包涵体。以感染病毒的细胞制片，荧光抗体法测定8例8～24个月婴儿接种麻疹疫苗前后血清抗病毒IgG的变化，结果显示，IgG的几何平均滴度升高32.03倍，最低效价1:4，最高1:128。提示该癌细胞系可用作麻疹病毒分离培养及疫苗接种后的抗体水平监测。

细胞培养法检测沙眼衣原体的探讨

对细胞培养沙眼衣原体的三种检测方法进行了评价。结果显示单抗免疫荧光法的敏感度最高，Giemsa次之，碘染色法较低但简便快速；沙眼衣原体标本贮存以液氮最佳，－70℃7天内亦可较好地保持沙眼衣原体的活性。

子宫内膜腺癌细胞JEC—9药物敏感性研究

用单层细胞培养、细胞生长抑制和集落形成试验三种方法,观察子宫内膜腺癌细胞JEC—9对九种常用抗癌药物和三种中药合剂的敏感性。结果表明,表阿霉素、顺铂和丝裂霉素对该癌细胞有高度敏感性,其中表阿霉素在1.2×10^(-6)mg/ml浓度下仍有明显的细胞毒效应。结合临床给瘤源患者用药,取得良好的治疗效果。

人白细胞干扰素对子宫内膜腺癌细胞系的作用

目的观察人白细胞干扰素（IFN－α）对子宫内膜腺癌细胞系（JEC）细胞生长和细胞周期的影响。方法用不同浓度：2000U／ml、500U／ml、100U／ml的IFN－α与JEC共同培养8d，观察JEC细胞生长曲线、细胞凝集素受体表达变化，并用流式细胞仪分析癌系细胞周期。结果和结论IFN-α对JEC细胞的增殖有抑制作用，实验浓度越大，抑制作用越明明，但不影响凝集素受体的表达；IFN－α可使JEC细胞G1／G0阻滞，S期积累和G2／M期减少，前者与IFN－α浓度呈正相关，而后者则为负相关。

杂交瘤细胞短期保存方法

单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立,包括有大量的细胞冻存工作。免疫脾细胞和骨髓瘤细胞融合后,将用各种敏感的检测方法来获得阳性的杂交瘤细胞克隆,然后再次克隆化。一株产生特异性的单克隆抗体细胞,往往要从众多的初次阳性克隆细胞中反复筛选。为了保持功能上稳定的杂交瘤细胞系,防止污染或其它原因丢失而绝种,在克隆化培养前应对每株阳性的杂交瘤细胞分几份冻存,一但培养成功。

迟钝爱德华菌感染大鲵的研究

目的研究迟钝爱德华菌对大鲵的致病性,为防治提供实验依据。方法用不同浓度(102～108cfu/ml)迟钝爱德华菌,通过不同的感染途径(喂养的水环境、灌喂及注射)感染大鲵,观察病原菌的致病条件及大鲵各组织器官的细菌分布(皮肤、消化道、肝、脾、血液)和病理变化及敏感抗生素的治疗作用。结果喂养的水环境不能感染,大量灌喂(106～108cfu/ml)出现轻微感染症状,注射感染(104～107cfu/ml)出现明显感染症状,且部分死亡。感染后细菌分布于皮下、血液、肝、脾、胃等器官。用敏感抗生素处理后病鲵好转。结论迟钝爱德华菌对大鲵可能是一种机会致病菌,病菌感染大鲵需要合适的入侵途径和数量,感染后用敏感抗生素进行治疗有较好效果。

肝硬化患者肠道微生态的变化

目的:观察肝硬化(hepatic cirrhosis,HC)患者粪便中类杆菌、双歧杆菌、肠球菌、大肠杆菌、直肠真杆菌-球形梭菌和梭状芽胞杆菌,比较肝硬化患者与健康对照组之间肠道微生态的差异,以了解肝硬化患者肠道菌群的变化.方法:收集2010-03/2010-12遵义市第一人民医院消化科所收治的肝硬化患者29例,并以13例同期健康在校大学生作对照,收集粪便标本.经固定、玻片上涂片,荧光原位杂交(fluorescent in situ hybridization,FISH),激光共聚焦扫描显微镜(laser scanning confocal microscopy,LSCM)对细菌进行计数观察.应用秩相关检测法进行分析.结果:肝硬化患者与健康对照组比较粪便中双歧杆菌、类杆菌、真杆菌-直肠梭菌、肠球菌、大肠杆菌和梭状芽胞杆菌均较健康对照组显著减少(Z=-4.006、-4.34、-4.399、-4.174、-3.558、-3.95,均P<0.01),6种细菌的比例发生改变,表现为双歧杆菌及类杆菌专性厌氧菌的数量减少,大肠杆菌、直肠真杆菌-球形梭菌、肠球菌和芽胞杆菌的数量增多(P<0.05).细菌数量及比例之间的这种改变与肝硬化病因及肝硬化严重程度(Child-Pugh)分级无明显相关性(P>0.05).结论:肝硬化患者肠道中6种细菌数量及构成比发生改变,肠道微生态的这种变化与肝硬化不同病因及疾病严重程度之间无明显相关性.

土贝母皂苷体外抗乙型肝炎病毒的药效研究

目的观察土贝母皂苷体外抗乙型肝炎病毒(HBV)效果。方法以2.2.15细胞为靶细胞,给药后通过检测细胞表面及培养液中HBsAg,HBeAg和HBV-DNA,观察土贝母皂苷抗HBV效果。结果土贝母皂苷各浓度组对HBsAg,HBeAg表达均有抑制作用,但以0.1 mg/m l作用48 h时最强,分别为43.46%和54.52%(P<0.01);对HBV-DNA的抑制作用以1 mg/m l组显著(P<0.05)。结论土贝母皂苷在体外有抗乙型肝炎病毒(HBV)作用。

甲型流感病毒H_3N_2诱导人子宫内膜腺癌细胞凋亡的实验研究

目的探讨甲型流感病毒H3N2对人子宫内膜腺癌细胞系(endometrialadenocarcinomacelllines,JEC)细胞的凋亡诱导作用及机制。方法取不同血凝单位的H3N2感染JEC细胞,经HE染色、琼脂糖凝胶电泳以及流式细胞术等方法检测细胞凋亡情况,并用免疫细胞化学法检测H3N2对JEC细胞Fas、FasL及TGF-β表达的影响。结果感染后的JEC在形态上呈现凋亡变化;电泳出现梯状条带;流式细胞术显示细胞凋亡率随病毒感染时间的延长而降低,且有随着病毒浓度增加而增高的趋势。免疫细胞化学法示病毒感染后JEC细胞的Fas染色增强,TGF-β染色减弱,但FasL始终没有表达。结论甲型流感病毒H3N2能够诱导JEC细胞凋亡,此作用与病毒浓度及感染时间有一定关系,其机制可能与Fas和TGF-β的表达有关。