2016至2020年杭州地区无偿献血人群HIV感染状况分析

目的了解杭州地区无偿献血人群HIV感染状况,为本地区降低HIV经输血传播风险,制定有效献血者招募及艾滋病防控策略提供数据支持。方法采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)和病原体核酸检测技术(nucleic acid testing,NAT)对2016年1月至2020年12月杭州地区902847例无偿献血者标本进行抗HIV-Ⅰ/Ⅱ抗体/抗原和HIVRNA检测。抗-HIV抗体/抗原或HIVRNA反应性标本送杭州市疾病控制中心进一步采用Western blot法和NAT进行确认。结果2016年1月至2020年12月杭州地区共检测HIV确证阳性103例,阳性检出率为0.01%,其中101例ELISA和NAT筛查均为阳性反应,2例ELISA筛查为阴性反应,NAT为阳性反应。103例感染者中,以男性(91.26%,94/103)、18~35岁(69.90%,72/103)、初次献血者(68.93%,71/103)为主。2016至2020年献血者HIV阳性率呈逐年下降趋势(χ^(2)=7.181,P=0.007)。男女献血者HIV阳性率各年的差异无统计学意义(χ^(2)=10.336,P=0.350;χ^(2)=0.653,P=0.957)。各年龄组献血者HIV阳性率各年的差异无统计学意义(χ^(2)=6.378,P=0.173;χ^(2)=2.318,P=0.678;χ^(2)=5.284,P=0.259;χ^(2)=9.183,P=0.057)。结论近5年HIV感染在杭州市无偿献血人群中呈低流行水平,但仍存在感染风险,应加强在低危人群中招募献血者并且应采用先进的检测技术,选择合适的检测策略,保证血液安全。

爆发性肝炎小鼠中髓系衍生抑制性细胞对NK细胞活性影响的研究

目的:利用爆发性肝炎小鼠模型,研究髓系衍生抑制性细胞(myeloid-derived suppressorcells,MDSCs)在爆发性肝炎进展过程中对自然杀伤细胞(nature killer cell,NK cell)的作用及其相关机制,探讨急性爆发性肝炎的发病机制及可能的干预措施。方法:通过腹腔注射细菌脂多糖和D-半乳糖胺诱发建立爆发性肝炎模型,流式细胞仪分析爆发性肝炎模型不同时间不同组织中MDSCs和NK细胞的比例变化以及NK细胞活性。结果:在模型小鼠中随着肝炎的发展不同组织中的MDSCs的比例增加,肝脏中NK细胞的比例增加,同时,不同组织中NK细胞表达NK细胞活化受体NKG2D的细胞比例增加,NKG2D的平均荧光强度增强。结论:小鼠爆发性肝炎模型中MDSCs能促进NK细胞的活化与增殖,初步揭示了在爆发性肝炎机体中MDSCs及NK细胞参与肝脏损伤的作用机制。

核酸检测系统检测无效原因分析

目的回顾自2016年以来,本实验室使用3种核酸检测系统检测献血者血液标本时出现的检测无效情况,分析其原因以采取措施提高核酸检测效能。方法统计Roche Cobas s201系统自2016年1-12月,Procleix Tigris系统自2016年1-9月,Procleix Panther系统2016年9月-2017年3月的检测无效测试数和类型并分析。结果 Cobas s201,Tigris和Panther系统的无效率分别为0.90%(402/44 838),4.01%(2 960/73 835)和1.34%(1 093/81741),3种检测系统的检测无效率之间差异有统计学意义(P<0.05)。各个仪器的无效率之间,除Roche Cobas s201和Panther 1404之间差异没有统计学意义,其他仪器相互之间的差异都具有统计学意义(P<0.05)。仪器故障、试剂自带校准品检测失败、操作失误、样本质量等都是造成检测无效的原因。结论仪器故障和试剂校准品检测失败等是造成无效的主要原因,检测无效结果的产生与不同的检测系统有一定相关性。

2014年杭州地区无偿献血者ALT不合格人群特征分析

目的分析2014年杭州地区无偿献血者丙氨酸氨基转移酶(ALT)不合格人群特征。方法将ALT初筛(干化学法)合格的2014年杭州地区无偿献血者133 851例血液标本进行ALT复检(湿化学法),以ALT≤50IU/L为合格,ALT>50IU/L为不合格。观察ALT复检不合格率,比较不合格人群中不同献血时间、ABO血型、性别、初/再次献血、年龄、体重的献血者ALT不合格率,分析其特征。结果 2014年杭州地区无偿献血者ALT复检不合格率为0.524%(701/133 851)。ALT不合格人群中不同献血时间的献血者ALT不合格率比较有统计学差异(P<0.05),其中11月份的不合格率最高;不同ABO血型的献血者ALT不合格率比较无统计学差异(P>0.05);男性献血者ALT不合格率高于女性(P<0.05);初次献血者ALT不合格率高于再次献血者(P<0.05);不同年龄的献血者ALT不合格率比较有统计学差异(P<0.05),其中30岁以下献血者不合格率较高;不同体重的献血者ALT不合格率比较有统计学差异(χ2=48.406,P<0.05),呈现体重越大不合格率越高的趋势。结论 ALT检测结果受多种因素影响,血站系统应加强献血前宣传教育,做好献血征询及ALT初检,利于降低ALT不合格率,减少血液资源的浪费。

2015—2019年杭州地区献血人群HBsAg流行状况

目的了解近年来杭州地区献血人群HBsAg流行及分布状况,以便进一步改进和完善HBV感染的预防策略。方法遵循献血者知情同意,采用ELISA法分别使用两种不同厂家的试剂检测献血后标本的HBsAg。回顾性分析2015年1月至2019年12月杭州地区无偿献血人群HBsAg阳性率,对年龄、性别、献血次数等不同分布组的HBsAg阳性情况进行比较。结果共检测无偿献血者741441人,HBsAg阳性率为0.231%。2015—2019年HBsAg阳性率分别为0.321%、0.241%、0.251%、0.179%、0.172%,差异有统计学意义(P<0.001)。将无偿献血人群分为18~24、25~34、35~44、45~54、55~60岁年龄组,各年龄组随着年龄增加献血人群比例下降,HBsAg阳性率存在差异,其中45~54岁年龄组阳性率最高(0.512%),差异有统计学意义(P<0.001)。男、女献血者HBsAg阳性率分别为0.271%和0.168%;初次献血者阳性率为0.336%,两次献血的人群阳性率为0.017%,两者差异均有统计学意义(P<0.001)。结论杭州地区无偿献血人群HBsAg阳性率低,不同年龄、性别和献血次数人群的阳性率存在差异,提高重复献血者率有利于提升血液安全。

核酸检测技术在脐带血保存产妇血液标本检测中的应用研究

目的探讨酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)与核酸检测(nucleic acid testing,NAT)筛查保存脐带血的产妇血液标本检测结果,评估NAT在产妇血液筛查中应用的必要性。方法选取2018年7月至2020年12月浙江省脐带血造血干细胞库送检的47579例保存脐带血的产妇血液标本,对产妇外周血液标本进行HBsAg、HCV抗体、HIV-1/2抗体的ELISA检测,以及HBV DNA、HCV RNA和HIV RNA的NAT检测。结果47579例产妇血液标本共检出ELISA无反应性但NAT阳性血液标本43例(0.09%),经鉴别检测17例(0.04%)为HBV DNA阳性,无HCV RNA阳性和HIV RNA阳性结果;另26例标本NAT联检筛查阳性,鉴别试验均为阴性。2018—2020年NAT单阳性率分别为0.14%、0.05%和0.11%,差异有统计学意义(χ^(2)=8.439,P=0.015);2018—2020年HBV鉴别单阳性率分别为0.05%、0.02%和0.05%,差异无统计学意义(χ^(2)=4.145,P=0.126)。结论ELISA检测合格的产妇血液仍有传播病原体的风险,NAT可以进一步提高血液病毒检测结果的准确性,对于降低因母婴垂直传播导致脐带血输注传播病原体风险有重要意义。

乙肝酶免无反应而核酸未鉴别反应性结果分析

目的分析乙型肝炎病毒表面抗原无反应性的献血者中,初始检测反应性而后续的鉴别试验或重复试验无反应性的未鉴别反应性献血者(non-discriminated reactive,NDR)的感染状态,探讨不同核酸检测系统对HBsAg^(-)/NDR是否存在检测差异性。方法对2020年1月至2022年8月献血者样本的检测结果以及反应性率进行比较,并对部分样本进行两种核酸检测系统的重复检测,分析HBsAg^(-)/HBV DNA+献血人群特征。结果通过对2020年1月至2022年8月的核酸结果分析,重复核酸检测可提高HBsAg^(-)/NDR献血者的检出,且检出率在不同的循环阈值(cycle threshold valve,Ct值)区间或不同的样本吸光度与临界值吸光度的比值(sample OD/Cutoff,S/CO值)区间存在偏移。同时将Ct值或S/CO值分组发现,在两种核酸检测系统中不同区间的检出率存在差异性(PCR:X^(2)=108.23,P<0.001,TMA:X^(2)=40.95,P<0.001),主要集中于Ct值小于38.5或S/CO值10至15之间。并对部分HBsAg^(-)/HBV DNA+献血人群分析发现,重复核酸检测对于不同年龄(X^(2)=9.38,P=0.025)、献血次数(X^(2)=22.52,P<0.001)、职业(X^(2)=24.92,P=0.002)及文化程度(X^(2)=10.37,P=0.016)的献血者存在显著性差异,而对于不同性别的献血者并无统计学差异(X^(2)=9.38,P>0.05),男性(67.50%)远多于女性。结论不同核酸检测系统对HBsAg^(-)/NDR献血者存在检测差异性,对于Ct值小于38.5、或S/CO值为10至15之间、或献血年龄在41至50岁的献血者,可结合另一检测技术提高检出率,降低HBsAg^(-)/NDR献血者的潜在病毒传播风险,保障临床用血安全。

浙江省乙肝酶免阳性核酸阴性献血者结果分析

目的分析浙江省血液中心无偿献血者乙肝酶免阳性核酸阴性感染情况[以下简称HBsAg-ELISA(+)/HBV-DNA(-)],探讨造成酶免与核酸结果不一致的原因。方法对常规血液筛查结果为HBsAg-ELISA(+)/HBV-DNA(-)献血者进行单人份核酸再次检测,分析该类献血者的检测结果。结果2022年5月至11月共114017例献血者中筛选出205例HBsAg-ELISA(+)/HBV-DNA(-)标本,男性献血者(0.14%)显著低于女性献血者(0.24%)(χ^(2)=14.761,P<0.005);初次献血者(0.32%)显著高于再次献血者(0.09%)(χ^(2)=78.781,P<0.005);不同文化程度之间差异有统计学意义(χ^(2)=47.753,P<0.005)。经单人份核酸再次检测后,ELISA双试剂阳性标本再次检测核酸阳性率高于单试剂阳性标本(χ^(2)=94.378,P<0.005);ELISA试剂1与试剂2再次检测核酸阳性率无显著性差异(χ^(2)=0.163,P>0.005);2种核酸检测系统的再次核酸检测阳性率无显著性差异(χ^(2)=0.626,P>0.005)。血清学补充实验显示11例HBV-DNA(+)标本经化学发光检测后共出现2种血清学组合模式,分别是HBsAg(+)/HBeAb(+)和HBeAb(+),大部分为HBsAg(+)/HBeAb(+),共10例,占90.91%,只有一例为HBeAb(+),占9.09%;HBsAg定量结果显示大多数处于低HBsAg水平。结论通过单人份核酸检测方法再次检测后,献血者HBsAg-ELISA(+)/HBV-DNA(-)标本中有一定比例为HBV-DNA(+)。但大部分标本仍为HBV-DNA(-),还需进行HBV血清学标志物和HBV-DNA的补充实验来确定其真实感染状态,明确造成酶免与核酸结果检测结果不一致的原因。另外,在献血者筛查中,尽可能选择灵敏度和特异度较高的核酸和HBsAg检测试剂,确保结果准确性。

核酸检测在献血筛查中的应用

目的分析单人份核酸检测方法 (NAT)在无偿献血者血液筛查中的应用。方法采用Procleix TIGRIS全自动核酸检测系统,结合血站常规的血清学检测,平行检测无偿献血者血液标本。对部分仅核酸检测阳性的献血者,特别是仅HIV核酸单阳性献血者和非重复反应性献血者进行追踪检测,并进行人群特性的描述性分析。结果在304 103份标本中,ELISA阴性NAT初始反应性标本608份(0.20%)。经鉴别实验检出HBV-DNA阳性标本232份,鉴别阴性复试阳性标本74份,非重复反应性阳性标本301份。追踪分析17名非重复反应性献血者,发现4人有HBV-DNA可鉴别的阳性。结论核酸检测技术用于献血者的常规血液筛查能进一步保障输血安全。非重复反应性的标本存在着真阳性的可能,应重视核酸检测非重复性的标本。

杭州市无偿献血者乙型肝炎病毒感染及其传播残余风险分析

目的了解杭州市无偿献血者乙型肝炎病毒(HBV)感染情况,评估输注其血液传播HBV的残余风险。方法通过献血者信息管理数据库收集2016—2019年杭州市无偿献血者资料,采用酶联免疫吸附法测定乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和核酸检测技术测定HBV DNA。采用发病率-窗口期模型评估无偿献血者血液传播HBV的残余风险。结果2016—2019年杭州市共筛查初次献血者320755人,HBV阳性率为0.56%;重复献血者279816人,HBV阳性率为0.13%。初次献血者HBV阳性率高于重复献血者(P<0.05)。初次献血者和重复献血者检测HBsAg后,输血传播HBV的残余风险分别为296.38/100万人次[95%CI:(277.57~315.19)/100万人次]和98.79/100万人次[95%CI:(87.15~110.43)/100万人次];检测HBV DNA后,输血传播HBV的残余风险分别为86.79/100万人次[95%CI:(76.60~96.98)/100万人次]和28.93/100万人次[95%CI:(22.63~35.23)/100万人次]。结论经检验合格的杭州市无偿献血者血液仍然存在输血传播HBV的风险,献血人群中开展核酸检测可明显降低输血传播HBV的残余风险。

2种策略鉴定ELISA无反应性Procleix Ultrio Elite血液核酸检测不确定标本的功效分析

目的比较2种策略鉴定ELISA无反应性Procleix Ultrio Elite单人份血液HBV/HCV/HIV核酸联合检测不确定献血者标本的效果。方法首先采用Procleix Ultrio Elite单人份血液HBV/HCV/HIV核酸联合试剂和2种不同厂家的ELISA试剂对献血者血液标本进行HBV、HCV及HIV-1/2感染性标志物筛查。ELISA无反应性Procleix Ultrio Elite血液核酸检测不确定献血者标本再分别进行一次TaqScreen MPX v2.0单人份标本HBV/HCV/HIV核酸联合检测(策略1)、2次Procleix Ultrio Elite HBV/HCV/HIV分项鉴别实验(策略2)。随后对其中的30份血液核酸检测不确定标本进行追踪分析。结果在检测的81 874份献血者标本中,181份为HBsAg、抗HCV、抗HIV的ELISA检测无反应性而经Procleix Ultrio Elite试剂血液HBV/HCV/HIV核酸联合检测不确定标本(0.22%)。在这些不确定标本中,策略1和策略2试验分别检测出核酸反应性标本33份和38份,均为HBV DNA阳性,两者的检出率差异无统计学意义(P>0.05)。追踪结果显示,30份血液核酸检测不确定标本在3个月～6个月内均未出现HBV DNA、HCV RNA、HIV RNA反应性结果。结论 ELISA无反应性Procleix Ultrio Elite单人份血液HBV/HCV/HIV核酸联合检测不确定标本中存在着一定数量的血液HBV DNA反应性标本,多种厂家试剂联合检测可提升检出效率。

髓系衍生抑制性细胞与感染性疾病的关系

髓系衍生抑制性细胞（MDSC）是一群具有高度异质性的髓系细胞群体，包括未成熟DC、巨噬细胞、粒细胞和其他早期分化阶段的髓系细胞等。在感染等疾病状态下，机体内环境产生募集和活化MDSC的因素，导致大量MDSC在淋巴器官及病变局部聚集并活化，随后通过多条途径下调机体的免疫应答，发挥免疫抑制的功能。此文就MDSC的性质、募集和活化的因素、免疫调节机制及其与感染性疾病的关系进行综述。