着丝粒蛋白N在癌症中的研究进展

着丝粒蛋白N(centromere protein N,CENP-N)又叫做BM039、ICEN32和C16orf60,人类中该基因位于16号染色体的q23.2区域,是内层动粒的重要组成成分,在有丝分裂期间协助染色体定向转移到减数分裂的纺锤体结构,将母细胞复制的基因组信息平均传递给两个子细胞[1].如果CENP-N表达失常可能会导致染色体错配或丢失,产生病理的有丝分裂[2].研究发现,在低级别异型性组织中,病理性有丝分裂细胞比例为5%~10%,而在高级别恶变和癌变组织中,这一比例可能上升至60%~80%,这表明病理的有丝分裂可能是癌症发展的一个重要因素[3].除了作用于有丝分裂以外,CENP-N还可以通过调控有氧糖酵解、自噬、多种重要的信号通路以及肿瘤微环境中免疫细胞的功能而促进癌症的恶性进展.鼻咽癌、肝癌、乳腺癌、卵巢癌、肺腺癌、口腔癌、食管癌中均已发现有明显的CENP-N表达失调[4-10].因此,如果能对CENP-N表达进行干预,有望实现抗肿瘤效应,为癌症治疗开辟新途径及新方法.

鼻咽癌放疗抵抗机制的研究进展

鼻咽癌(NPC)是头颈部发病率和病死率较高的恶性肿瘤之一,放射治疗是NPC最有效的治疗手段之一。然而放射治疗无法有效根除肿瘤干细胞,且会导致肿瘤细胞代谢状况改变,刺激DNA双链断裂修复,通过自噬减少细胞损伤,以及细胞周期阻滞,最终导致NPC放疗抵抗。

头颈鳞癌预后相关差异表达LncRNAs的筛选、ceRNA网络构建及生物学功能预测

目的利用生物信息学方法筛选头颈鳞癌(HNSCC)预后相关的差异长链非编码RNA(LncRNAs),构建预后相关LncRNAs的ceRNA网络,并分析其生物学功能。方法以P<0.05和|log2FC|>1.0为标准,通过TCGA数据库筛选HNSCC组织与对照组织中差异表达的LncRNAs,并用Kaplan-Meier Plotter生存分析法对组织中不同lncRNA表达水平的HBSCC患者的生存率进行比较,挑选出有诊断潜力且未被报道的lncRNA作为候选lncRNA。利用star⁃Base在线网站构建候选lncRNAs的ceRNA网络,采用基因本体论(GO)京都基因和基因组百科全书(KEGG)分析候选lncRNA的生物学功能。结果共筛选出129个HNSCC组织与对照组织差异表达的LncRNAs,其中HOXA11-AS为有诊断潜力且未被报道的lncRNA。HOXA11-AS与4个差异表达miRNA和12个差异表达mRNA存在相互作用关系。HOXA11-AS参与的生物学功能主要有细胞对内源性刺激的反应、对信使核糖核酸蛋白复合物和细胞质翻译的负调控;涉及的信号通路主要有背腹轴形成和孕酮介导的卵母细胞成熟等与生殖相关的通路、脂肪代谢相关通路和癌症相关通路。结论筛选出头颈鳞癌预后相关候选lncRNA(HOXA11-AS),并构建了以HOXA11-AS为中心的ceRNA调控网络。HOXA11-AS参与的生物学功能主要有细胞对内源性刺激的反应等,涉及的信号通路主要有生殖、脂肪代谢、癌症相关的通路。

Notch1基因敲除后鼻咽癌细胞放疗敏感性的变化及分子机制

目的:探讨Notch1基因对鼻咽癌细胞放疗敏感性的影响及其分子机制。方法:使用CRISPR/Cas9技术构建敲除Notch1基因的CNE-2细胞(人鼻咽癌细胞株),通过RT-PCR以及Western blot法检测Notch1基因的表达。经不同剂量射线照射处理后,通过计算各组存活分数(SF),使用Linear-quadratic模型计算拟合剂量生存曲线,计算放射增敏比(SER)。以6 Gy为照射剂量,将实验分为4个组:Notch1(+)组、Notch1(-)组、IR+Notch1(+)组和IR+Notch1(-)组。CCK-8法检测各组细胞增殖情况,Annexin V-FITC/PI双染法检测各组细胞凋亡变化,Western blot检测各组细胞γH2AX、CyclinD1、Bax、Bcl-2和GAPDH蛋白的表达差异。结果:敲除Notch1基因的CNE-2细胞系构建成功。CCK-8实验显示,敲除Notch1可提高鼻咽癌放疗敏感性:与IR+Notch1(+)组细胞相比,IR+Notch1(-)组细胞增殖和细胞存活率显著降低(P<0.05)。Annexin V-FITC/PI双染法显示,与其他组比较,IR+Notch1(-)组凋亡率最高(P<0.05)。Western blot结果显示,敲除Notch1的鼻咽癌细胞经过照射后,γH2AX的表达量明显升高,Cyclin D1的表达量增高,Bax:Bcl-2比值较高。结论:敲除Notch1信号分子可有效提高体外培养的鼻咽癌细胞的放疗敏感性,其可能是鼻咽癌放疗增敏的一个潜在靶点。