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草鱼和鲤鱼线粒体 DNA 的分离纯化及其 COI 基因的分子克隆 被引量:38
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作者 吴乃虎 王钢锋 +3 位作者 阎景智 郭玲 严绍颐 秦鹏春 《动物学报》 SCIE CAS CSCD 1991年第4期375-382,共8页
本文报道配合使用差速离心和DNaseI核酸酶处理等步骤,从草鱼和鲤鱼新鲜肝组织分离线粒体DNA(mtDNA)的实验方法。这种方法经济简便,纯化的mtDNA产率多,纯度高,经限制性内切酶消化后进行琼脂糖凝胶电泳分离,可以得到清晰的DNA片段谱带,并... 本文报道配合使用差速离心和DNaseI核酸酶处理等步骤,从草鱼和鲤鱼新鲜肝组织分离线粒体DNA(mtDNA)的实验方法。这种方法经济简便,纯化的mtDNA产率多,纯度高,经限制性内切酶消化后进行琼脂糖凝胶电泳分离,可以得到清晰的DNA片段谱带,并可直接用于构建酶切图谱和线粒体基因的分子克隆。用这样的mtDNA,我们已克隆了草鱼和鲤鱼的细胞色素氧化酶亚基I基因(COI基因)。 展开更多
关键词 草鱼 鲤鱼 线粒体 脱氧核糖核酸
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基因研究的发展与现状 被引量:2
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作者 吴乃虎 《自然辩证法通讯》 1982年第4期35-42,共8页
基因学说是影响整个遗传学发展的基础理论。基因研究的发展过程,大体上可以分为两个不同的历史阶段。在本世纪五十年代以前,主要从细胞染色体水平进行研究,属于基因的染色体遗传学阶段;五十年代以后则主要从DNA大分子水平上进行研究,属... 基因学说是影响整个遗传学发展的基础理论。基因研究的发展过程,大体上可以分为两个不同的历史阶段。在本世纪五十年代以前,主要从细胞染色体水平进行研究,属于基因的染色体遗传学阶段;五十年代以后则主要从DNA大分子水平上进行研究,属于基因的分子遗传学阶段。从孟德尔遗传定律的提出到沃森-克里克DNA双螺旋结构的发现的有关历程, 展开更多
关键词 珠蛋白基因 噬菌体 大肠杆菌染色体 基因研究 五十年代 结构基因 分子遗传学 乳糖操纵子 假基因 蛋白质
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高等植物基因的表达与调控 被引量:2
3
作者 吴乃虎 《科学》 1996年第5期32-36,3,共5页
随着分子生物学的发展和基因工程技术培育转基因植物工作的深入,高等植物基因表达与调控的研究越来越受到重视。通过克隆基因的遗传操作及其有关分析,有可能深入洞察真核基因表达调控中的一些根本性问题,诸如控制转录作用的5′末端和3... 随着分子生物学的发展和基因工程技术培育转基因植物工作的深入,高等植物基因表达与调控的研究越来越受到重视。通过克隆基因的遗传操作及其有关分析,有可能深入洞察真核基因表达调控中的一些根本性问题,诸如控制转录作用的5′末端和3′末端非转译区的结构特征,转录终止作用机理等。配合转基因技术和植物细胞全能性特点,不仅有可能从本质上阐明高等植物基因表达调控的机理。 展开更多
关键词 高等植物 基因 调控 发育 基因表达
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深切怀念我的老师吴瑞教授
4
作者 吴乃虎 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期123-125,共3页
关键词 老师 分子生物学 分子遗传学
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DNA序列分析新进展
5
作者 吴乃虎 舒幼敏 《生物学杂志》 CAS CSCD 1989年第4期1-2,共2页
自从生物学家发现DNA是生命的遗传物质之后,便迫切地想知道它是如何携带信息及控制遗传的.这取决于对DNA分子中的碱基序列的分析.序列分析对于发现旧的基因,促进基因工程的发展有着重大意义.本世纪七十年代,世界上许多生物实验室相继进... 自从生物学家发现DNA是生命的遗传物质之后,便迫切地想知道它是如何携带信息及控制遗传的.这取决于对DNA分子中的碱基序列的分析.序列分析对于发现旧的基因,促进基因工程的发展有着重大意义.本世纪七十年代,世界上许多生物实验室相继进行这方面的研究.1977年,英国的Sanger序列测定的末端终止法,随后。 展开更多
关键词 DNA 序列分析
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农杆菌介导的中国水仙遗传转化体系的建立 被引量:19
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作者 曾荣华 陈亮 +3 位作者 沈明山 黄胤怡 陈睦传 吴乃虎 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期1145-1150,共6页
利用根癌农杆菌介导法将 GUS基因导入中国水仙 ,组织化学法检测转化后共培养 3d的水仙鳞茎盘组织块 ,GUS基因瞬时表达很好 ,90 %以上的材料呈现大面积的蓝色斑块 ,取筛选培养 2 0d的材料检测 GU S基因的稳定表达 ,约 1%的组织块有蓝色反... 利用根癌农杆菌介导法将 GUS基因导入中国水仙 ,组织化学法检测转化后共培养 3d的水仙鳞茎盘组织块 ,GUS基因瞬时表达很好 ,90 %以上的材料呈现大面积的蓝色斑块 ,取筛选培养 2 0d的材料检测 GU S基因的稳定表达 ,约 1%的组织块有蓝色反应 .水仙预培养 10 d后转化 ,转化前在菌液中加入 60 μmol/ L AS活化 2~ 3h,转化率提高了两倍以上 .转化材料在 MS+ BA10 + NAA0 .2+ Cef30 0 + Hyg30 培养基上培养 2 0 d左右分化出小鳞芽 ,频率约为 60 % ,组织块平均出芽 5 .7个 ,最多可达 14个 ,小鳞芽 10 d后长成小鳞茎 . 展开更多
关键词 中国水仙 遗传转化 根癌农杆菌介导法 GUS基因 转基因技术 组织培养
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两种水稻GDP解离抑制蛋白基因的分离及特征分析 被引量:23
7
作者 梁卫红 唐朝荣 吴乃虎 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期785-791,共7页
以Rho家族成员OsRacD为诱饵 ,采用酵母双杂交体系 ,分离到两种与OsRacD互作的水稻RhoGDP解离抑制蛋白的基因 ,分别命名为OsRhoGDI1和OsRhoGDI2 .酵母体内结合和GSTpulldown分析结果显示 ,OsRhoGDI1和OsRhoGDI2与野生型和组成型激活的OsR... 以Rho家族成员OsRacD为诱饵 ,采用酵母双杂交体系 ,分离到两种与OsRacD互作的水稻RhoGDP解离抑制蛋白的基因 ,分别命名为OsRhoGDI1和OsRhoGDI2 .酵母体内结合和GSTpulldown分析结果显示 ,OsRhoGDI1和OsRhoGDI2与野生型和组成型激活的OsRacD都能结合 ,且不依赖GDI的N端部分序列 ;GDI和Rho的结合具有一定的特异性 .两种GDI在水稻根、地上组织和幼穗等多种组织和器官都有表达 ,但在表达特征上存在明显差异 .研究证实 ,在水稻中存在着调控RhoGTPases的GDP解离抑制蛋白基因家族 。 展开更多
关键词 RHO蛋白 酵母双杂交 GDP解离抑制蛋白 原核表达 GST PULL DOWN
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RAPD技术在龙眼品种分类中的应用研究 被引量:50
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作者 林同香 陈振光 +1 位作者 戴思兰 吴乃虎 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1998年第12期1159-1165,共7页
利用RAPD技术结合聚类分析,研究了龙眼(DimocarpuslonganLour.)35个样品的分类和亲缘关系。结果表明:“荔枝本”和“荔枝龙眼”两个品种是荔枝(LitchichinensisSonn.)和龙眼天然... 利用RAPD技术结合聚类分析,研究了龙眼(DimocarpuslonganLour.)35个样品的分类和亲缘关系。结果表明:“荔枝本”和“荔枝龙眼”两个品种是荔枝(LitchichinensisSonn.)和龙眼天然杂交种的可能性很小;“荔枝本”、“南湖焦核”等品种为变异较大的龙眼突变品种;“焦核龙眼”品种基因组间差异较大;“东壁”龙眼可能有同名异品种现象;“红核子”等实生栽培品种可能有一定的基因突变。龙眼品种拟分为6个类,其中“水涨”、“乌龙岭”、“油潭本”等12个品种多为核大皮厚的宜制干的品种,可以归类为水涨乌龙岭类;“赤壳”、“福眼”、“蕉眼”、“处暑本”为代表的11个品种可以划归为赤壳处暑本类;东壁系列品种分类为东壁类;“立冬本”、“南湖焦核”、“荔枝本”品种与上述品种差异较大,暂分别独立分为各自相应的类。 展开更多
关键词 龙眼 分类 随机扩增多态性 RAPD
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cDNA文库的差异筛选与抑制性减数杂交相结合分离胡萝卜体细胞胚根发育相关基因 被引量:11
9
作者 张雷 杨志攀 +2 位作者 刘一鸣 黄美娟 吴乃虎 《自然科学进展》 北大核心 2002年第3期261-265,共5页
应用cDNA文库差异筛选与抑制性减数杂交相结合的技术程序,并通过反向Northern分析进一步验证,成功地从解调控12 h的胡萝卜体细胞胚的cDNA文库中,分离到7个在解调控12h特异表达的基因.其中4个含有完整的编码框,分别编码木质葡聚糖内转糖... 应用cDNA文库差异筛选与抑制性减数杂交相结合的技术程序,并通过反向Northern分析进一步验证,成功地从解调控12 h的胡萝卜体细胞胚的cDNA文库中,分离到7个在解调控12h特异表达的基因.其中4个含有完整的编码框,分别编码木质葡聚糖内转糖基化酶、脂肪酸去饱和酶、一种poly(A)结合蛋白和一种酰基转移酶.另外3个是5'端部分缺失的cDNA基因片段,分别编码三磷酸甘油醛脱氢酶、一种糖蛋白和一种与单链RNA/DNA结合的蛋白.对其中部分基因的Northern分析结果显示,它们的表达量在蔗糖调控下的胡萝卜体细胞胚根发育的不同时期均有显著变化,说明它们都是与胚根发育相关的基因. 展开更多
关键词 CDNA文库 胚根发育 胡萝卜体细胞胚 差异筛选 抑制性减数杂交 基因克隆 基因分离 基因表达
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蔗糖调控培养对胡萝卜体细胞胚内源ABA水平的效应 被引量:23
10
作者 程玉兰 刁丰秋 +1 位作者 吴乃虎 黄美娟 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1999年第7期761-765,共5页
利用酶联免疫吸附测定(ELISA)技术,分析了经不同浓度蔗糖调控的胡萝卜(DaucascarotaL.)体细胞胚及胚性器官的内源ABA水平。结果表明,随着胚的生长发育,内源ABA含量呈上升趋势,到子叶胚时,达到最高值... 利用酶联免疫吸附测定(ELISA)技术,分析了经不同浓度蔗糖调控的胡萝卜(DaucascarotaL.)体细胞胚及胚性器官的内源ABA水平。结果表明,随着胚的生长发育,内源ABA含量呈上升趋势,到子叶胚时,达到最高值。在胚的早期发育阶段,不同处理之间,ABA水平只有较小的差异,而当子叶胚开始膨大时,这种差异则较明显。一旦将调控胚解调控,体细胞胚内源ABA含量则明显下降。在两个月内,调控胚及胚性器官的ABA含量基本维持不变。表明蔗糖浓度可导致体胚内源ABA水平的变化,但这种影响依发育时期而异;高浓度的ABA水平有利于胚性状态的维持。与此同时,比较研究了外源ABA处理效应与高浓度蔗糖处理的差异,结果表明,蔗糖的调控效应与ABA的调控相似又不尽相同。总之,在蔗糖调控胡萝卜体细胞胚发育的信号传递网络中ABA可能是一个重要的中介信号因子。 展开更多
关键词 胡萝卜 体细胞胚 调控培养 ABA 蔗糖信号
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osRACD基因表达与光敏核不育水稻光周期育性转换的相关性 被引量:15
11
作者 叶建荣 黄美娟 +1 位作者 赵淑慧 吴乃虎 《自然科学进展》 北大核心 2004年第2期166-172,共7页
为检测水稻低分子量GTP结合蛋白编码基因osRACD与光敏核不育水稻农垦58S光周期育性转换的相关性,用农杆菌介导转化和潮霉素抗性筛选获得了大量的转基因水稻植株。通过PCR、Southern杂交、RT-PCR和Northern检测等,证明反义osRACD基因和正... 为检测水稻低分子量GTP结合蛋白编码基因osRACD与光敏核不育水稻农垦58S光周期育性转换的相关性,用农杆菌介导转化和潮霉素抗性筛选获得了大量的转基因水稻植株。通过PCR、Southern杂交、RT-PCR和Northern检测等,证明反义osRACD基因和正义osRACD基因均已分别在转基因农垦58N和58S水稻植株的幼穗中得到了稳定的表达。成熟转基因植株的自交结实率统计分析表明,反义osRACD基因的表达大大降低了转基因58N水稻植株的育性,其平均结实率明显低于对照植株;而正义osRACD基因在转基因58S水稻植株的幼穗中表达后,使得长日下生长的、本来不育的58S植株的育性得到一定程度上的恢复,有的植株的结实率还高于短日下生长的对照植株;而且,osRACD基因表达水平越高的转基因58S植株,其对应的结实率也越高。降低幼穗中内源osRACD基因的表达水平会导致转基因58N水稻植株的育性降低,恢复长日下生长的转基因58S水稻植株幼穗中osRACD基因的表达,则可恢复其育性。这表明,osRACD基因的表达参与了农垦58S光周期育性转换的调控过程。这是第一个报道的参与光信号传导与光敏核不育水稻光周期育性调控的低分子量GTP结合蛋白的编码基因。 展开更多
关键词 osRACD基因表达 光敏核不育水稻 光周期育性转换 转基因 农垦58S 农杆菌 潮霉素
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草鱼(Ctenopharyngodon idellus)线粒体DNA控制区及其两侧tRNA基因的克隆与结构分析 被引量:11
12
作者 张方 米志勇 +1 位作者 毛钟荣 吴乃虎 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第3期417-422,共6页
动物线粒体DNA控制区是线粒体基因组复制与基因表达的最主要的调控区.采用杂交和测序的方法对草鱼线粒体DNA控制区进行定位、克隆并测定了控制区及其旁侧的tRNAPhe、rRNAPro和rRNAThr三个基因的序列,与多... 动物线粒体DNA控制区是线粒体基因组复制与基因表达的最主要的调控区.采用杂交和测序的方法对草鱼线粒体DNA控制区进行定位、克隆并测定了控制区及其旁侧的tRNAPhe、rRNAPro和rRNAThr三个基因的序列,与多种脊椎动物的相应序列进行了比较,并进行了结构分析.草鱼线粒体控制区全长927bp,含有与酵母和爪蟾线粒体启动子相似的序列,其CSBⅠ、CSBⅡ和CSBⅢ序列与其他几种动物的CSB比较相当保守,TAS与其回文基序可形成稳定的茎环结构,成为H-链复制的终止信号.草鱼线粒体tRNAPhe、tRNAPro和tRNAThr可折叠成三叶草形二级结构,其基因具有许多不同于细胞质tRNA基因的结构特点。 展开更多
关键词 草鱼 线粒体DNA 线粒体tRNA 结构分析
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转水稻osRACD反义基因拟南芥植株的育性分析 被引量:15
13
作者 叶建荣 黄美娟 吴乃虎 《自然科学进展》 北大核心 2003年第3期313-317,共5页
利用反义RNA技术,将水稻低分子量GTP结合蛋白基因osRACD反向置于CaMV35S启动子的调控下,构成反义基因表达载体pBID,并用真空渗透法转化拟南芥植株,转基因植株的荚果自花谢之后就停止生长,其后荚果便自顶端开始逐渐枯黄并死亡;而对照植... 利用反义RNA技术,将水稻低分子量GTP结合蛋白基因osRACD反向置于CaMV35S启动子的调控下,构成反义基因表达载体pBID,并用真空渗透法转化拟南芥植株,转基因植株的荚果自花谢之后就停止生长,其后荚果便自顶端开始逐渐枯黄并死亡;而对照植株的荚果在花谢之后仍继续生长直到成熟。花粉离体萌发生长实验显示,转基因植株花粉萌发后的生长延伸过程受到抑制,形成短而略粗的花粉管;而对照植株花粉萌发后的生长状况正常,形成长圆柱形的花粉管。这些结果表明,osRACD基因的功能是参与控制花粉管的生长延伸过程,其编码的蛋白质可能是调控光敏核不育水稻58S育性的重要因子之一。 展开更多
关键词 水稻 osRACD基因 转基因拟南芥 育性 反义RNA技术 花粉萌发 花粉管 光敏核不育
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高等植物光信号应答的分子基础 被引量:6
14
作者 唐朝荣 罗敏 吴乃虎 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 2003年第9期45-49,共5页
光不仅为高等植物进行光合作用提供能源 ,同时还作为一种重要的发育信号而调控植物形态建成 ,影响其几乎全部的生命周期。就高等植物对光信号感受和应答的分子基础进行了综述 ,根据已有研究结果对高等植物可能的光信号传导通路作了一个... 光不仅为高等植物进行光合作用提供能源 ,同时还作为一种重要的发育信号而调控植物形态建成 ,影响其几乎全部的生命周期。就高等植物对光信号感受和应答的分子基础进行了综述 ,根据已有研究结果对高等植物可能的光信号传导通路作了一个粗略的概括 ,并简要介绍本试验室在水稻农垦 5 8S光周期育性转换研究中所取得的初步结果。 展开更多
关键词 植物 光信号 应答 信号传导通路 感受 光合作用
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高等植物胚胎发生的分子调控 被引量:10
15
作者 刁丰秋 黄美娟 吴乃虎 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2000年第4期331-340,共10页
Embryogenesis represents the critical transition from the fertilized egg to the new multicellular seedling. Considerable attention has recently been focused on the search for genes expressed during the embryogenesis o... Embryogenesis represents the critical transition from the fertilized egg to the new multicellular seedling. Considerable attention has recently been focused on the search for genes expressed during the embryogenesis of plant model systems, especially in Arabidopsis thaliana (L.) Heynh., to understand the regulation of plant development. This paper presents a brief description of gene expression and molecular regulation during embryogenesis. The molecular events to induce and determine cell fate and cell differentiation are reviewed, the gene regulation of shoot and root meristems are discussed and the molecular mechanisms of embryo maturation and dormancy would be followed as well. 展开更多
关键词 胚胎发生 细胞分化 器官发生 高等植物 分子调控
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胡萝卜LEA基因家族新成员DcLEA1的克隆及其结构与表达特性分析 被引量:6
16
作者 刘一鸣 刁丰秋 +2 位作者 张雷 黄美娟 吴乃虎 《自然科学进展》 北大核心 2004年第8期882-891,共10页
利用改进的cDNA代表性差示分析 (RDA)技术 ,从调控状态的胡萝卜体细胞胚中分离到LEA基因片段 ,以该片段为探针筛选调控状态的胡萝卜体细胞胚的cDNA文库及用控渗法构建的基因组文库 ,获得了胡萝卜LEA基因家族的一个新成员DcLEA1(GenBank... 利用改进的cDNA代表性差示分析 (RDA)技术 ,从调控状态的胡萝卜体细胞胚中分离到LEA基因片段 ,以该片段为探针筛选调控状态的胡萝卜体细胞胚的cDNA文库及用控渗法构建的基因组文库 ,获得了胡萝卜LEA基因家族的一个新成员DcLEA1(GenBank注册号 :AF30 8739) .该基因转录区由 5′UTR区、两个外显子、一个内含子及 3′UTR构成 ,启动区长 1.2kb ;开放阅读框为 4 80bp ,编码 15 9个氨基酸和一个终止密码子 .Northern杂交分析表明 ,DcLEA1基因在胡萝卜成体中无表达活性 ;在调控状态的胡萝卜体细胞胚中具有高表达活性 ;在解调控 12h的胡萝卜体细胞胚中 ,转录本含量急剧下降 ;随着解调控时间的延长 ,胡萝卜体细胞胚根开始延伸 ,DcLEA1基因的表达活性又有所增加 .这一现象与LEA基因在种子休眠和萌发过程中表达活性的变化规律相似 .由此推测 ,可以利用胡萝卜体细胞胚蔗糖调控 解调控体系 ,来模拟种子休眠与萌发的过程 ,研究植物胚根发育相关基因表达调控的分子机理 . 展开更多
关键词 胡萝卜 LEA基因 表达特性 胚根发育 克隆 基因表达
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高质量水稻基因组文库构建的策略和方法 被引量:5
17
作者 梁卫红 刘一鸣 吴乃虎 《河南师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期177-179,共3页
采用改良的CTAB法提取水稻基因组DNA,经Sau3AI部分酶切的产物经透析袋电洗脱法回收、正丁醇浓缩后,以1∶1的摩尔数比和载体臂连接.包装后测定,文库滴度达到106 pfu/ml;随机酶切重组克隆显示,插入片段达到预期的15~23 kb之间,提示该方... 采用改良的CTAB法提取水稻基因组DNA,经Sau3AI部分酶切的产物经透析袋电洗脱法回收、正丁醇浓缩后,以1∶1的摩尔数比和载体臂连接.包装后测定,文库滴度达到106 pfu/ml;随机酶切重组克隆显示,插入片段达到预期的15~23 kb之间,提示该方法适于植物材料高质量基因组文库的构建,有利于分离完整的基因序列及其调控区. 展开更多
关键词 基因组DNA 部分酶切 电洗脱 滴度
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叶绿体DNA及其在植物系统学研究中的应用 被引量:21
18
作者 黄瑶 李朝銮 +1 位作者 马诚 吴乃虎 《植物学通报》 CSCD 1994年第2期11-25,共15页
叶绿体DNA及其在植物系统学研究中的应用黄瑶,李朝銮,马诚,吴乃虎(中国科学院成都生物研究所,成都,610041)(中国科学院发育生物学研究所,北京,100080)CHLOHOPLASTDNAANDITSAPPLIC... 叶绿体DNA及其在植物系统学研究中的应用黄瑶,李朝銮,马诚,吴乃虎(中国科学院成都生物研究所,成都,610041)(中国科学院发育生物学研究所,北京,100080)CHLOHOPLASTDNAANDITSAPPLICATIONTOPLANTSYSTE... 展开更多
关键词 植物分类学 叶绿体 DNA
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胡萝卜体细胞胚DnaJ同源基因的分离及其表达特性分析 被引量:4
19
作者 杨志攀 张雷 +2 位作者 刁丰秋 黄美娟 吴乃虎 《自然科学进展》 北大核心 2003年第2期157-163,共7页
DuaJ/Hsp40蛋白是DnaK/Hsp70的辅助分子伴侣,它通过调节DnaK/Hsp70的ATPase活性来影响蛋白复合体的合成与组装。运用改进的cDNA代表性差示分析方法从解调控胡萝卜体细胞胚中分离出Dnal基因同源区段,进而以它为探针筛选解调控12h的胡萝... DuaJ/Hsp40蛋白是DnaK/Hsp70的辅助分子伴侣,它通过调节DnaK/Hsp70的ATPase活性来影响蛋白复合体的合成与组装。运用改进的cDNA代表性差示分析方法从解调控胡萝卜体细胞胚中分离出Dnal基因同源区段,进而以它为探针筛选解调控12h的胡萝卜体细胞胚cDNA文库,从胡萝卜中分离得到DuaJ蛋白同源基因DcJ1.序列分析表明它的编码区为1257bp,编码418个氨基酸和1个终止密码子,包含3个保守的特征结构域。Southern杂交分析表明,DcJ1基因在核基因组中以单拷贝或低拷贝形式存在;而Northern杂交则显示该基因仅在根中特异表达,其表达强度随着胡萝卜体细胞胚的调控-解调控过程发生明显的变化,并且不受热激的诱导。由此可见,DcJ1基因的表达活性与胡萝卜体细胞胚根的早期发育之间存在着明显的相关性。 展开更多
关键词 胡萝卜 体细胞胚 DnaJ基因 基因分离 基因表达 表达调控 热激蛋白
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一种新的水稻肌动蛋白基因Act的分子克隆及特征分析 被引量:7
20
作者 梁卫红 唐朝荣 吴乃虎 《自然科学进展》 北大核心 2004年第6期646-654,共9页
以植物Rho家族成员osRACD为诱饵 ,采用酵母双杂交体系从水稻幼穗中分离到肌动蛋白基因家族的一个新成员 Act.借助 5′RACE技术克隆到该基因的cDNA全长 ,其中含有一个1 1 34bp的读码框 ,编码 377个氨基酸和一个终止密码子 .同源性比较... 以植物Rho家族成员osRACD为诱饵 ,采用酵母双杂交体系从水稻幼穗中分离到肌动蛋白基因家族的一个新成员 Act.借助 5′RACE技术克隆到该基因的cDNA全长 ,其中含有一个1 1 34bp的读码框 ,编码 377个氨基酸和一个终止密码子 .同源性比较显示与其他已知的水稻肌动蛋白有 81 .8%~ 96 %的相似性 .生物信息学方法分析了蛋白的修饰位点、基因的结构和进化关系 .Southern杂交显示Act是单拷贝基因 ,RT PCR显示该基因在多种组织有广泛的表达 ,但在不同发育阶段表达量有明显变化 . 展开更多
关键词 水稻幼穗 酵母双杂交 肌动蛋白 RHO 基因克隆 生物信息学
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