基于RNAi的家蝇β-葡萄糖苷酶功能分析

【目的】探明家蝇β-葡萄糖苷酶(β-glucosidase,BG)在家蝇体内的功能,为深入研究家蝇BG在木质纤维素降解中的作用奠定基础。【方法】针对家蝇BG基因的功能结构域设计3对特异性引物用于dsRNA的体外合成,通过显微注射的方法将dsRNA导入家蝇2龄幼虫,利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测抑制效率,分别以滤纸、水杨苷、微晶纤维素及羧甲基纤维素钠为底物检测BG基因的干扰对家蝇消化道粗酶液滤纸酶活性、BG、CBH(Cellobiohydrolase)及EG(Endoglucanase)酶活性的影响。【结果】在注射dsRNA后18 h家蝇幼虫消化道中BG基因的表达量下降62%且此时为最佳干扰时间点,在BG基因表达受到抑制后家蝇消化道的滤纸酶、BG酶活性显著降低,且时间变化趋势与上述干扰条件下BG基因表达量变化一致,均在干扰后18 h酶活性达最低,但CBH及EG酶活性较对照组无显著变化。【结论】RNA干扰技术能够有效抑制家蝇BG基因的表达,推测家蝇BG具有滤纸酶和BG酶活性。

家蝇漆酶2基因的克隆及序列特性与表达分析

【目的】探明家蝇漆酶2(Lac-2)基因序列特性及表达,为深入研究家蝇漆酶的生物学功能奠定基础。【方法】通过PCR扩增家蝇Lac-2基因的全长cDNA序列;利用生物信息学手段分析其核苷酸和蛋白质序列特征;以GAPDH为内参基因,采用实时荧光定量PCR(Real-Time PCR)技术检测Lac-2基因在家蝇不同发育时期及家蝇3龄幼虫脂肪体、唾液腺、前肠、中肠及后肠中的表达特征。【结果】成功克隆家蝇Lac-2基因的cDNA序列,全长为885 bp,编码269个氨基酸,成熟肽编码蛋白的理论分子量为25 kDa,等电点为7.19。时空表达模式分析显示,Lac-2基因在家蝇3龄幼虫中的表达量最高,在家蝇3龄幼虫的各主要组织中以脂肪体为参照,Lac-2基因在中肠表达水平最高,其次是唾液腺及后肠。【结论】克隆得到家蝇木质素酶Lac-2基因,其功能可能与家蝇的生长发育及食物消化相关。

通风机远程变频控制技术应用

矿井通风系统是矿山主要生产系统之一,是矿山企业安全生产的保障。本文介绍了通风机远程变频改造的方案和过程,利用光纤通信技术、PLC控制技术和变频调速技术,建造一个风机远程变频控制系统,并对实施中遇到的问题进行了总结。项目的实施,不仅减少了人工劳动强度,提高了设备安全可靠性,同时极大地降低了能耗,对其他相似工程的建设与改造有一定的借鉴与指导意义。

自媒体环境下高校党建有效途径探析

中共教育部党组在2017年印发了《普通高等学校学生党建工作标准》,其中明确指出,"建立党建信息化平台,加强‘两微一端’建设,创建网上党校园地、党校、论坛等思想政治工作平台。"利用自媒体平台,推进大学生党建工作组织化、制度化、具体化,是党的建设工作的有效途径。本文通过对自媒体环境下高校党建工作的研究,以全国高校思想政治工作会议精神为指导,结合自媒体环境下全面从严治党的具体要求,对夯实高校基层党组织建设、解决学生党建突出问题进行分析并提出解决途径,为促进党的建设工作发展夯实基础。