如意黑白散对白癜风模型小鼠皮损组织PD-1/PD-L1信号通路的影响

目的探讨如意黑白散治疗白癜风的可能作用机制。方法将24只C57BL/6小鼠随机分为空白组,模型组及如意黑白散大、小剂量组,每组6只。除空白组外其余各组采用氢醌外涂构建白癜风动物模型。造模后如意黑白散大、小剂量组灌胃如意黑白散7.02、2.34 g/kg,空白组与模型组予10 ml/kg生理盐水灌胃,每日1次,各组均给药36天。给药结束后肉眼观察皮损情况,HE染色观察皮损组织黑色素含量,免疫组化测定皮损组织中CD3^(+)、CD8^(+)T细胞表达;免疫荧光染色测皮损组织中程序性死亡受体1(PD-1)表达;RT-PCR法检测皮损组织中细胞程序性死亡配体1(PD-L1)mRNA表达;ELISA法检测血清超氧化物歧酶(SOD)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、酪氨酸酶(TYR)含量。结果与空白组比较,模型组小鼠皮肤苍白,皮损组织HE染色后镜下可见黑色素含量明显减少,皮损优良率降低,表皮和毛囊周围细胞黑色素颗粒明显减少,皮肤组织中CD3^(+)、CD8^(+)T细胞表达显著增加,PD-L1 mRNA、PD-1表达下降,TYR含量下降,SOD、TNF-α含量增加(P<0.05)。与模型组相比,如意黑白散大、小剂量组皮肤颜色加深,黑色素含量增加,皮损优良率升高,棘细胞层、基底细胞及毛囊黑色素颗粒增多,皮损处CD3^(+)、CD8^(+)T细胞表达减少,PD-L1 mRNA、PD-1表达增加,TYR含量上升,SOD、TNF-α含量下降(P<0.05)。与如意黑白散小剂量组比较,如意黑白散大剂量组造模区域皮损色素恢复面积更大,皮损优良率升高,棘细胞层及基底细胞以及毛囊黑色素颗粒增多,皮损处CD3^(+)、CD8^(+)T细胞表达减少,PD-L1 mRNA、PD-1表达增加,TYR含量上升,SOD、TNF-α含量下降(P<0.05)。结论如意黑白散可以使白癜风模型小鼠皮肤黑色素含量增多,其作用机制可能为激活皮损组织PD-1/PD-L1信号通路,从而抑制T细胞介导的自身免疫对黑色素细胞的破坏。