野菊花抑菌和抗病毒作用实验研究

对野菊花水提物与挥发油的抑菌和抗病毒活性实验研究结果表明，二者均具抑菌和抗病毒活性。对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、绿脓假单胞菌、福氏志贺菌的抑制作用及抗病毒活性，水提物强于挥发油，而对肺炎链球菌，则相反。

微生态血粉研制与应用

试验采用多株益生菌发酵黄牛血液制成的微生态血粉，其粗蛋白含量达３５６％，含益生菌活细胞５×１０８个／克。动物饲养试验结果表明，微生态血粉在９５％的基础日粮中添加５％，能提高肉鸡增重５５％和猪增重６１％；临床试验表明，微生态血粉对鸡白痢和仔猪白痢治疗有效率分别达９４５％和８９６％。

绿茶及茶多酚抗人轮状病毒的实验

人轮状病毒是一种引起人感染病毒性腹泻的主要病毒。用绿茶及茶多酚对人轮状病毒进行了细胞培养试验，结果表明，绿茶和茶多酚稀释浓度分别在１：１００（每毫升细胞培养液含２００μｇ绿茶）和１：８（每毫升细胞培养液含６．２５μｇ茶多酚）时，表现对该病毒的完全抑制作用，使正常细胞不受病毒侵袭。这种抑制作用在一定的范围内与茶汤浓度和茶多酚的浓度成正相关。试验结果还表明，绿茶茶汤在高浓度时具有细胞毒作用。

低硒与柯萨奇病毒B_(3/0)毒性突变

目的 : 体外观察低硒培养柯萨奇病毒非致病株 B3 / 0 ( CVB3 / 0 )的毒性突变。方法 : 筛选低硒胎牛血清 ,制备低硒细胞培养基 ,利用 CVB3 致病株和非致病株感染人脐静脉内皮细胞( human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)后结局不同 ,先于体外连续传代观察的毒性突变情况 ,然后于敏感动物体内鉴定突变株的致病性。结果 : CVB3 / 0 在低硒细胞培养液中培养的脐静脉内皮细胞 2 0次传代后 ,可出现细胞病变效应 ,该突变株接种 Balb/C小鼠后可使其心肌组织出现损伤。结论 : CVB3 / 0 非致病株不仅在低硒小鼠内可突变为致病株 ,在体外相对低硒 + H2 O2 培养基中培养的人脐静脉内皮细胞中也可发生。

四抗感冒口服液的抗病毒、抗菌及镇痛作用研究

目的 研究四抗感冒口服液 (CCD)的抗病毒、抗菌及镇痛作用。方法 应用病毒致细胞病变作用观察CCD的抗病毒作用 ;应用平皿挖洞灌药法观察CCD的抑菌作用 ;应用热诱发小鼠疼痛反应模型和冰醋酸诱导小鼠扭体反应模型观察CCD对疼痛的抑制作用。结果 CCD对疱疹病毒Ⅰ型的半数有效浓度为 0 98g·L-1。CCD 1 0 0g·ml-1对金葡菌(ATCC 2 5 92 3)、金葡菌 (MRSA)、表皮葡萄球菌、肺炎链球菌和草绿色链球菌均有抑制作用。CCD 5 0g·kg-1和 10 0g·kg-1可明显延长小鼠热痛反应潜伏期 (P <0 0 5 ,P <0 0 1) ,提高小鼠的痛阈值 ,且维持时间较阿司匹林长。CCD 10 0g·kg-1与 2 0 0g·kg-1对小鼠扭体反应次数有明显抑制作用 (P<0 0 1)。结论 CCD具有一定的体外抗病毒、抗菌作用 ;CCD具有镇痛作用 ,且作用维持时间较长。

孕血清中早孕因子单克隆抗体的制备

用纯化的早孕因子(EPF)免疫BALB/C小鼠,取其脾脏与SP2/0小鼠骨髓瘤细胞融合,用酶联免疫吸附试验(ELISA)间接法筛选,以有限稀释法进行克隆化。杂交瘤细胞经过2～3次克隆后。阳检率达lOO%,建立了1B_6、2F_(10)二株分泌EPF单克隆抗体(EPF—McAb)的杂交瘤细胞系。用ELISA检测其诱生腹水效价均达1:1.28×10~5,初步鉴定该McAb具有敏感性高、特异性强的特点。应用EPF—McAb—ELISA对孕血清中的早孕因子进行检测,结果表明阳性率达92.9%。

孕前接种人巨细胞病毒pp65DNA疫苗对阻断小鼠人巨细胞病毒宫内传播的效果

目的探讨构建的人巨细胞病毒(HCMV)pp65 DNA疫苗能否阻断HCMV宫内垂直传播及其免疫机制。方法24只6～8周龄健康雌性Balb/c小鼠随机分为A、B二组,每组12只。A组为疫苗组,B组为对照组。A组于0、2、4周各注射pp65DNA疫苗200μg,B组同期注射9g/L盐水0.3mL。末次接种后,各组与雄鼠配笼,妊娠d3孕鼠分别注射HCMVAD169株悬液,d20仔鼠经剖宫产娩出。荧光定量聚合酶链反应(PCR)测定孕鼠血清HCMVDNA载量,应用流式细胞仪技术、放射免疫法、酶联免疫吸附(ELISA)法测定其血清CD3+、CD4+、CD8+及IL-2、IFN-γ水平,比较二组间差异;比较二组孕鼠死胎率及1周内仔鼠病死率、仔鼠脑组织病理改变及血清HCMVDNA检出率。结果1.A组孕鼠死胎率及1周内仔鼠病死率分别为13.4%、3.45%,明显低于B组(54.2%、40.74%),其差异有显著性(Pa<0.01);2.A组孕鼠血清HCMVDNA拷贝数(100mg)-1为932.80±89.62,明显低于B组(387547.6±49721.07)(P<0.01);3.A组孕鼠血清CD3+、CD4+、CD8+、IL-2、IFN-γ水平明显高于B组,差异均有显著性(Pa<0.01);4.B组仔鼠脑组织有明显病理改变,A组则无;5.A组仔鼠血清HCMVDNA检测均阴性,B组检出8/12例阳性。结论pp65DNA疫苗可能通过增强孕鼠的免疫功能,尤其是细胞免疫水平阻断HCMV宫内垂直传播。

重组人干扰素α-2b体外抗呼吸道合胞病毒作用的实验研究

目的观察重组人干扰素α-2b在体外的抗呼吸道合胞病毒作用。方法观察不同浓度重组人干扰素α-2b抑制呼吸道合胞病毒对Hela细胞产生细胞病变(CPE)的作用,并与利巴韦林比较。结果实验表明重组人干扰素α-2b抗呼吸道合胞病毒的最低有效浓度为25IU/ml。结论重组人干扰素α-2b具有明显的抗呼吸道合胞病毒作用。

重组人白细胞介素10单克隆抗体的制备

目的 制备重组人白细胞介素 10 (rhIL 10 )单克隆抗体。方法 应用鼠 鼠杂交瘤技术建立分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞系 ,ELISA检测杂交瘤细胞培养上清、腹水效价 ,双向免疫扩散试验进行亚类鉴定 ,Giemsa染色镜下计数杂交瘤染色体数目。结果 获得了 2株能分泌抗rhIL 10单克隆抗体的杂交瘤细胞系 (1D3、2A3) ,无血清培养液效价为 1∶5 12、1∶2 5 6 ,腹水效价 1∶10 5、1∶10 4 。单克隆抗体为IgG2 亚类 ,染色体数目 98～ 10 3条。 2株杂交瘤细胞体外传代培养6个月以上 ,ELISA检测抗体滴度无明显降低。结论 制备的 2株单克隆抗体效价高 。

绿茶中提取的茶多酚抑制癌细胞生长的体外实验

通过体外实验,观察了从绿茶中提取、纯化的茶多酚对人宫颈癌和肺癌细胞生长的影响,结果表明:当培养液中茶多酚浓度为500微克/毫升时,对宫颈癌和肺癌细胞的杀伤率分别为50%和55%,而抗癌药物甲氨蝶呤则分别为13%和25%,二种药剂的杀伤效果均随浓度降低而降低。茶多酚的抗癌机理可能主要是损伤细胞膜和影响癌细胞内各种代谢。

抗人轮状病毒牛血丙球蛋白的研制

目的通过牛源抗人轮状病毒免疫球蛋白的研究,并经胃肠道给药观察其对人工感染仔猪腹泻的治疗效果。方法以人轮状病毒(HRV"Wa"株)为抗原免疫接种健康育肥黄牛,制备成牛血丙球蛋白口服液。结果丙球蛋白含量达52mg/ml,纯度达80%,中和抗体效达1∶16384,初步研究表明对人工感染HRV"Wa"毒株发生腹泻的仔猪治疗有效率达92.3%。结论牛源抗人轮状病毒免疫球蛋白可能成为新型治疗轮状病毒引起腹泻的有效新药。

Ⅱ型骨胶原对小鼠腹腔巨噬细胞产生白介素-Ⅰ的影响

Ⅱ型骨胶原是从软骨中提取的生化制剂,可诱导体内产生关节炎性质的自身免疫反应。近年来有很多的报道是用Ⅱ型胶原建立胶原性关节炎的动物模型。白介素-Ⅰ(IL-1)既是免疫调节因子,又是炎症介质,为了进一步探讨Ⅱ型胶原的免疫功能,本所进行体外ⅱ型骨胶原对白介素—I产生的初步研究。

引起婴幼儿腹泻的成人腹泻轮状病毒

从婴幼儿急性腹泻患者粪便中发现6株新轮状病毒,ELISA和免疫电镜证明属B组成人腹泻轮状病毒(ADRV),但其基因组核酸电泳图型为4:2:3:2,与典型ADRV(4:2:2:3)不同,而与婴幼儿腹泻A组轮状病毒相似,可能是ADRV基因组变异株。

轮状病毒快速ELISA诊断方法的研究和应用

为探讨既可检查婴幼儿腹泻轮状病毒抗原,又可同时检查其抗体的方法,采用快速ELISA方法检测临床粪便标本,阳性率62%,与常规方法符合。检查健康人血清标本,成人抗体阳性率100%,婴幼儿60%。结果显示,该方法特异、敏感、快速、简便,特别适合大量标本的流行病学现场调查和基层医疗单位应用。

柯萨奇B_3病毒经晚期孕鼠胎盘致母婴感染的小鼠动物模型研究

目的 :探讨柯萨奇B3病毒(CVB3m)在母婴间经胎盘垂直传播的可能性和条件 ,并建立小鼠动物模型。方法 :对不同孕期的母鼠分别接种最佳感染量柯萨奇B3病毒嗜心肌株 (CVB3m) ,剖腹取胎或产仔。对母鼠、胎鼠、仔鼠及胎盘分别进行病毒学、血清学及病理检查。结果 :晚期孕鼠接种适量的CVB3m后次日形成病毒血症 ,此时血中无抗CVB3m中和抗体。病毒经胎盘传播形成母婴垂直感染。胎盘、胎鼠、母鼠心肌及仔鼠血清和心肌中均查到较高滴度的病毒。电镜下可见受染仔鼠心肌细胞线粒体肿胀、嵴突缺失、肌纤维断裂、明暗带模糊等初期病变。结论 :晚期孕鼠感染CVB3m后形成病毒血症 ,通过胎盘屏障将病毒传至胎儿 ,引起胎鼠及仔鼠心肌病变 ,可作为防治CVB3

红茶、青茶、黑茶抗人轮状病毒的实验研究

采用病变抑制法在细胞培养上测定了红茶、青茶、黑茶对人轮状病毒的抑制作用。试验结果表明,红茶和青茶茶汤(2克茶叶用25ml沸水浸泡)在1:1000的稀释浓度时,可以完全抑制病毒,而黑茶茶汤在1:100时才能完全抑制病毒。试验结果还表明,茶汤在高浓度时具有细胞毒作用。

干扰素、病毒唑抗呼吸道合胞病毒的体外观察

目的 观察重组人干扰素、病毒唑单独及联合体外抗呼吸道合胞病毒 (RSV)的效果。方法 细胞病变抑制法 ,即测定药物单独及联合应用对RSV所致细胞病变的抑制作用。结果 干扰素浓度≥ 5IU·ml- 1或病毒唑浓度≥ 2 4 μg·ml- 1时 ,随着药物浓度的增加、抑制细胞病变的作用也增强 ,直至不出现细胞病变 (P <0 .0 1) ;两药在低于各自的有效浓度时合用 ,即干扰素 1IU·ml- 1、病毒唑 12 μg·ml- 1,仍具有明显的抑制细胞病变作用 (P≤ 0 .0 1)。结论 重组人干扰素及病毒唑体外均有抗RSV作用 。