商陆小G蛋白激活蛋白基因PaAGAP在逆境下表达研究

利用同源克隆和RACE方法在商陆(Phytolacca acinosa)中得到一个推测的小G蛋白ArfGTPase激活蛋白ArfGAP(ArfGTPase activating protein)的全长cDNA序列PaAGAP.PaAGAP序列编码332个氨基酸.蛋白含有保守的锌指结构域(CX2CX16 CX2C类)和C2结构域.实时荧光定量PCR表明在寒、旱、盐和重金属的不同时间胁迫下,PaAGAP可以被诱导,表达量有不同程度的上调.由此推测PaAGAP可能是通过快速启动转录和翻译,使ARF失活,抑制植物生长素极性运输,来参与植物逆境反应的.

基于微芯片电泳-电化学方法的细胞内谷胱甘肽分析

建立微芯片电泳-电化学检测技术分析细胞内还原型（GSH）和氧化型（GSSG）谷胱甘肽的新方法．分别考察缓冲液pH值、缓冲液浓度、SDS浓度、分离电压、进样时间、检测电位等因素对GSH、GSSG分离检测的影响．在最优实验条件下，在3min内实现GSH和GSSG的有效分离和检测．GSH和GSSG的线性范围分别为5．0～200．0μmol／L和2．0—100．0μmol／L（R2〉0．99），最低检测限（S／N≥3）分别为4．87μmol／L和1．98μmol／L．最终将所建立的方法应用于细胞样品中2种物质含量的测定，结果令人满意．

异基因皮肤移植对小鼠胸腺细胞亚群的影响

目的观察同种异基因小鼠皮肤移植急性排斥对受体小鼠胸腺细胞亚群组成的影响。方法以BALB/c小鼠作为供体,C57BL/6为受体,建立小鼠同种异基因皮肤移植模型,于术后第7天拆线,第10天取胸腺,制备胸腺单细胞悬液,通过流式细胞仪检测胸腺细胞各个亚群的比例。结果与对照组相比,同种异基因皮肤移植小鼠胸腺明显萎缩,胸腺细胞总数明显减少,胸腺细胞亚群细胞数量显著降低,同时,调节性T细胞及胸腺细胞发育和迁出不同阶段细胞绝对数均减少。结论皮肤移植排斥反应明显抑制受体小鼠胸腺及胸腺细胞的发育。该研究结果提示,急性移植排斥反应对中枢免疫器官胸腺中的T细胞发育分化具有重要影响。

通过转δ-OAT基因获得抗盐抗旱水稻

δ-OAT基因编码的鸟氨酸-δ-氨基转移酶是以鸟氨酸为前体合成脯氨酸途径中的关键酶。采用基因枪法将拟南芥δ-OAT基因导入粳稻品种中作321,通过PCR及分子杂交分析确定目的基因已插入水稻染色体中并得到超量表达。抗盐抗旱检测结果表明,水稻在受到渗透胁迫时会大量积累脯氨酸,各种条件下转基因水稻积累的脯氨酸是对照的5～15倍;同等胁迫条件下转基因株系相对生长更快,苗与根的生物学产量都要高于对照,最后种子产量也显著高于对照,如在0.1mol/L NaCl胁迫下转基因株系相对产量提高了16％～41％,说明δ-OAT基因超量表达并积累脯氨酸在抗渗透胁迫中有着重要作用,通过转化δ-OAT基因可以获得抗盐抗旱的基因工程水稻。

微流控芯片技术在细胞生物学研究中的应用进展

20世纪90年代以来,微流控芯片技术得到了快速发展。由于具有小型化、集成化、高通量、低消耗、分析快速等特点,微流控芯片作为一种新型的生物学研究平台,能够提供传统方法不具备的精细和可控制的细胞研究条件,在细胞生物学研究领域中得到了广泛关注。该文主要介绍其在细胞培养、分选、裂解、计数、凋亡检测、迁移、单细胞捕获、细胞间作用等方面的研究进展。